1、药理学设计性实验实验一、石菖蒲的镇静作用【目的】 1、应用小动物自主活动学习镇静药物的实验方法。2、应用小动物自主活动仪，研究地西泮、石菖蒲对小鼠自发活动的影响。【原理】小动物自主活动仪的原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生改变，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动，通过记录器记录动物活动次数。地西泮是镇静催眠的代表药。石菖蒲具有宁心安神作用，其挥发油对中枢有广泛的抑制作用。本实验以小鼠自发活动次数为指标，观察药物的镇静作用。【动物】小鼠 6 只，实验前禁食 12h。【药品】0.05%地西泮溶液，石菖蒲水煎液，生理盐水【主要器材】动物自主
2、活动仪 1 台，电子称 1 台，1ml 注射器 2 支，烧杯 2 杯。【方法】将 6 只动物随机分为甲乙丙组，甲组灌胃生理盐水，乙组灌胃石菖蒲水煎液（连续两天） ，丙组灌胃地西泮 1 次，0.2ml/10。给药后 1 小时各组动物放入小动物自主仪，先适应 2 分钟，再记录 5 分钟内小鼠自主活动次数。【结果】地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响。 （结果见表 1）表 1 地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响组别 动物数 自主活动次数生理盐水组地西泮组石菖蒲组【注意事项】1、实验室要尽量保持安静，以免惊动动物使自主活动次数增多。2、实验室温度应在 20-25之间。参考文献：1 胡锦官，顾健，王志旺.
3、 石菖蒲及其有效成分对神经系统作用的药理研究J. 中药药药理与临床.1999.15（30：192 刘新民.石菖蒲的研究现状J. 中医药研究.1992.（4）： 573 吴启端，吴清和，石菖蒲的药理学研究进展J.2006,17（6）:477-480实验二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用【目的】1、学习小鼠跳台原理和操作，正确运用跳台实验仪器对小鼠进行学习记忆能力行为学测试。2、观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效作用。【原理】鼠跳台实验装置由 DT-200 小鼠跳台测试箱和 DT-200 小鼠跳台测试仪组成。测试箱由 6 个小房间构成，一次可同时试验 6 只动物，每个小房间有一橡皮台，箱底是可
4、通电的铜栅，在训练期通电小鼠跳下平台在箱底不断被电击，这个过程中小鼠获得记忆，24 h后测试时观察小鼠第一次跳下平台的时间和 5 min 内跳下平台的次数，比较各组老鼠记忆保持的能力。戊巴比妥钠能造成小鼠学习记忆障碍。石菖蒲具有开窍醒神，宁心安神的作用，能够促进学习记忆。本实验以小鼠跳下潜伏期及 5min 内错误次数作为指标，观察药物对小鼠学习记忆能力影响作用。【动物】小鼠 6 只【药品】生理盐水、0.08g/ml 盐酸多奈齐、石菖蒲挥发油乳浊液、0.5% 戊巴比妥钠溶液【主要器材】小鼠跳台仪 1 台，电子称 1 台，1ml 注射器 2 支。烧杯 2 只。【方法】按小鼠跳台法筛选 6 只合格小
5、鼠（260s） 。将 6 只小鼠随机分为甲乙丙组，分别灌胃生理盐水、盐酸多奈齐、石菖蒲挥发油乳浊液，每天一次，0.1mg/ml，连续 14 天。第 15 天给药 1h 后，分别腹腔注射 0.1mg/g，15min 后将 6 只小鼠分别放入反射箱内，先适应 3min，然后通电。训练 5min 并记录 5min 内跳下的错误次数。24h 后重新测试，重测时把小鼠放到跳台上，记录小鼠第 1 次跳下时在跳台上的停留时间，即为潜伏期，并记录5min 内的出错次数。测试时若小鼠停留在平台上超过 3min，其潜伏期按 180s 计。【结果】盐酸多奈齐、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用。 （结果见表 2）表
6、 2 盐酸多奈齐、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用组别 动物数 潜伏期 训练时 5min 内出错次数 测试时 5min 内出错次数生理盐水组盐酸多奈齐石菖蒲挥发油乳浊液参考文献：1 徐叔云,卡如濂,陈修.药理实验方法学( 第三版).北京:人民卫生出版社,2002,413-550.2 胡锦官，顾健，王志旺 .石菖蒲及其有效成分对学习记忆的实验研究.中药材J ，1999,22（11）：584-5853 程秀娟，等.脑血管扩张剂 -尼莫地平、硝苯吡啶和长春胺对大鼠和小鼠记忆障碍的改善作用J. 药学学报， 1986,21（ 10）：731实验三、石菖蒲的抗癫痫作用【目的】1.学习癫痫药物的实验方法2
7、.研究石菖蒲水煎液对戊四唑（PTZ）所致癫痫小鼠的作用【原理】一般认为 石菖蒲的挥发油抗癫痫的作用最强，其中化学成分较多- 细辛醚是其主要有效成分之一，用于急性传染病、麻醉药及巴比妥类药物中毒时引起的呼吸抑制、急性循环衰竭。大 量 可 致 惊 厥 。【动物】小鼠, 18 20g, 雄性实验前禁食 12h【药品】0.07%戊四唑,石菖蒲醇溶液，生理盐水【主要器材】注射器，灌胃针头，烧杯，天平。【方法】用 PTZ 腹腔注射小鼠，连续 5 天，建立癫痫小鼠模型。将小鼠随机分成 2 组, 每组 2 只。受试药物组以石菖蒲醇溶液（ 10g/kg）灌胃 3d, 每天 2 次(上、下午各一次) , 对照组给
8、予生理盐水（10g/kg） , 第 4d 上午给药一次( 给药前精确称重) , 末次给药 30min 后开始实验, 腹腔戊四唑（PTZ） （40mg/kg） ，记录小鼠癫痫潜伏期、癫痫持续时间、死亡率和死亡时间等指标。【结果】石菖蒲对戊四唑所致惊厥小鼠的影响。 （结果见表 3）表 3 石菖蒲对戊四唑所致惊厥小鼠的影响药物 动物数（n）剂量（g/kg）癫痫潜伏期 死亡时间石菖蒲醇溶液生理盐水参考文献：1 吴启端, 吴清和, 石菖蒲的药理研究进展 J. 中药新药与临床药理 2006.17(6)：477-4802 陈莉，廖卫平，等，石菖蒲水煎液抗癫痫动物模型的药效学J.广州医学院学报.2002,30（3）：133 周大兴，包祖晓，吴雄生，等.石菖蒲醇提取物的抗癫痫作用 J.中国现代应用药学杂志，1999,16（2）：194 唐洪梅 , 席苹. 石菖蒲不同部位镇静抗致惊厥作用实验研究J. 中国实验方剂学杂志，2004, 10: 45-47.
