1、原子吸收光谱法测定人体血清中微量元素钙、镁、铜、铁、锌1、2、实验部分2.1 仪器和试剂2.1.1 仪器PE 原子吸收光谱仪：PP900ATransferpette 微量移液管SIGMA 离心机： 3-152.1.2 试剂及其配制Cu、Fe、Zn 标准溶液为 1000 mg/L（国家标准物质中心） ，用时稀释至 10 mg/L 备用。Ca、Mg 标准溶液为 1000 mg/L（国家标准物质中心） ，用时稀释至 100 mg/L备用。曲拉通：北京全新拓达科技有限公司，Triton X-100；硝酸：北京化工厂，优级纯 GR；盐酸：北京化工厂，优级纯 GR；氯化钠：北京化工厂，分析纯 AR ；氧化
2、镧：国药集团化学试剂有限公司，高纯试剂；曲拉通与硝酸混合液：取曲拉通 47 mL，加硝酸 10 mL，用超纯水定容至 1 L，用时稀释 10 倍后备用。镧盐与氯化钠混合液：取氧化镧 287 g 加 100 mL 超纯水，436 mL 盐酸，30 g 氯化钠，最后用纯水定容至 3 L，用时稀释 4 倍后备用。2.2 实验步骤2.2.1 样品的预处理取事先存放在冰箱中保存的全血样品，上离心机离心 2 min，然后用微量取样器分取 500 L 血清于 5 mL 已经烘干的干净小塑料管中，加入 2 mL 稀释后的曲拉通与硝酸的混合液，摇匀备用，此试样用于血清中 Cu、Fe、Zn 的测定。再分取 100
3、L 血清于 5 mL 已经烘干的干净小塑料管中，加入 2 mL 稀释后的镧盐与氯化钠的混合液，摇匀备用，此液用于 Ca、Mg 血清中的测定。2.2.2 标准曲线的测定取 Cu、Fe、Zn 标准使用液 10 mg/L（此使用液三种元素可以配在一起） ，分别吸取 1.0 、 2.0 、3.0 、4.0 、5.0mL 于 100mL 容量瓶中，用稀释后的曲拉通和硝酸混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为 0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50 mg/L，摇匀备用。取 Ca 标准使用液 100 mg/L，分别吸取 2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mL于 100mL
4、容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为 2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mg/L，摇匀备用。和 Ca 的标准曲线配制一样，配成 Mg 的标准曲线为 0.5 、1.0 、1.5 、2.0 、2.5 mg/L，摇匀备用。3、结论血清中微量元素的正常值范围（单位：mg/L）Ca-0.902.00Zn-0.902.00Fe-0.903.00Ca-95.0115.0Mg-21.025.0其中，注意如果血清溶血则铁元素含量大于 3.00 mg/L，这时候测定的铁元素的数值就不准确了，需取样品重新测定。加标回收率元素 测定值 mg/L（为样品稀释后数值） 加
5、标量 mg/L 加标测定值 mg/L 回收率%Zn 0.19 0.20 0.38 95.0Cu 0.29 0.20 0.48 95.0Fe 0.30 0.20 0.49 95.0Ca 4.9 1.0 5.9 100.0Mg 1.0 1.0 2.0 100.0试验方法1、溶液配制1.1 曲拉通与硝酸混合液：取曲拉通 30 mL，加硝酸 10 mL，用超纯水定容至 1 L，用时稀释 10 倍后备用。1.2 镧盐与氯化钠混合液：取氧化镧 58.65 g 加 50 mL 超纯水，250 mL 浓盐酸（产生大量热，此步骤一定要慢） ，最后用纯水定容至 1L，备用。1.3 Cu、Fe、 Zn 标准使用液
6、10 mg/L（此使用液三种元素可以配在一起）：分别移取 1000 mg/L 标准溶液各 1 mL 于 100 mL 容量瓶中，配制成 10 mg/L 标准使用液，摇匀备用。1.4 Ca、 Mg 标准使用液（混合）Ca 标准使用液 10 mg/L：移取 1000 mg/L Ca 标准溶液 0.25 mL 于 25 mL 容量瓶中，配制成 10 mg/L 标准使用液，摇匀备用。Mg 的标准使用液 5 mg/L：移取 1000 mg/L Mg 标准溶液 0.125 mL 于 25 mL容量瓶中，配制成 5 mg/L 标准使用液，摇匀备用。2、 实验步骤2.1 样品的预处理取 2.5 mL 血清于
7、15 mL 已经烘干的干净小塑料管中，加入 10 mL 稀释后的曲拉通与硝酸的混合液，摇匀备用，此试样用于血清中 Cu、Fe、Zn 的测定。再分取 100 L 血清于 15 mL 已经烘干的干净小塑料管中，加入 10 mL 稀释后的镧盐与氯化钠的混合液，摇匀备用，此液用于 Ca、Mg 血清中的测定。2.2 标准曲线的测定取 Cu、Fe、Zn 标准使用液 10 mg/L，分别吸取 0.25 、0.50 、0.75 、1.0 、1.25 mL 于 25 mL 容量瓶中，用稀释后的曲拉通和硝酸混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为 0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50 mg/L，
8、摇匀备用。取 Ca 标准使用液 10 mg/L，分别吸取 0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 mL 于10mL 容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为 0.5 、 1.0 、2.0 、3.0 、4.0 mg/L，摇匀备用。取 Mg 的标准使用液 5 mg/L，分别吸取 0.1 、0.2 、0.4 、0.6 、0.8 mL 于 10 mL 容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为配成 Mg 的标准曲线为 0.05 、0.10 、0.20 、0.30 、0.40 mg/L，摇匀备用。2.3 进样3、结果计算血清中微量元素的正
9、常值范围（单位：mg/L）Cu-0.902.00Zn-0.902.00Fe-0.903.00Ca-95.0115.0Mg-21.025.0加标回收率元素 测定值 mg/L（为样品稀释后数值） 加标量 mg/L 加标测定值 mg/L 回收率%Zn 0.19 0.20 0.38 95.0Cu 0.29 0.20 0.48 95.0Fe 0.30 0.20 0.49 95.0Ca 4.9 1.0 5.9 100.0Mg 1.0 1.0 2.0 100.0原子吸收光谱法测定儿童指血与血清种微量元素发布时间：2011-03-21 来源：安徽省医学协会信息中心【摘要】 目的 通过检测儿童指血与血清 5 种
10、微量元素铜、锌、钙、镁、铁(Cu、Zn、Ca、Mg、Fe)进行比较，以了解二者的差异。方法 40 例 014 岁儿童同时采集指血和静脉血分离血清用 BH5100 型原子吸收光谱仪测定 5 种微量元素(Cu、Zn、Ca、Mg、Fe)。结果 测定指血铜与血清铜比较二者差异无显著性（P0.05)，测定指血与血清锌、钙、镁、铁比较二者差异有显著性(P0.053 讨论Cu、Zn、Ca、Mg、Fe 5 种微量元素在人体构成细胞成分，以酶和辅基激活剂的形式参与蛋白质、酶、激素和维生素的合成、分解与转化1，儿童正处于生长发育的关键时期，体内微量元素含量过高或缺乏直接影响其身心健康。闫福堂等用同法研究西安儿童血
11、清 5 种微量元素，结果显示儿童血清锌、钙、铁缺乏率较高2，因此应重视儿童体内微量元素的检测。而准确地测量血液中微量元素，指导临床有针对性地补充微量元素尤为重要。血铜、锌首选测定方法为原子吸收光谱法3，本研究从表可看出用原子吸收光谱法测定儿童指血与血清铜比较二者差异无显著性（P0.05)，测定指血与血清锌、钙、镁、铁二者差异有显著性(P0.001)；原子吸收光谱法测定儿童指血与血清 Cu 相关性较好(r 为 0.70)，而该法测定指血与血清锌、钙、镁、铁相关性较差（相关系数分别为 0.31、0.25、0.40、0.29）。其原因为血液中的锌 80%存在于红细胞的碳酸酐酶中，故指血中锌明显高于血
12、清中的锌，血液中的钙几乎全部存在于血浆(血清)中，故血清钙明显高于全血钙，细胞内液镁含量明显高于细胞外液含量，故指血镁测定结果明显高于血清镁，人体大部分的铁分布在血红蛋白中约占人体总铁量的 70.17%，全血铁的缺乏和血清铁的缺乏各有其临床意义。原子吸收光谱法测定儿童指血与血清 5 种微量元素除铜外其相关性较差，实验室必须测定大样本正常人群以确立本地区指血与血清 5 种微量元素各自的正常参考范围，临床医师应了解测定全血及血清 5 种微量元素的不同临床意义。【参考文献】1 周新，涂植光临床生物化学和生物化学检验，第 3 版北京：人民卫生出版社，2003,171-183.2 闫福堂，苏宝凤，曹三成西安市儿童血清中微量元素含量分析现代检验医学杂志，2007，22(2) ：126-127.3 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程，第 3 版.南京：东南大学出版社，2006,393-395.
