1、2010-3/25/30,1,第七章 芳香胺类药物的分析,第一节 芳胺类药物的分析,第二节 苯乙胺类药物分析,基本要求,练习与思考,2010-3/25/30,2,基本要求,一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物化学结构与分析方法间的关系、典型药物的鉴别试验；掌握特殊杂质对氨基苯甲酸、对氨基酚的检查；掌握亚硝酸钠滴定法、溴量法测定药物含量的原理；二、理解非水滴定测定原理和方法，理解紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚的含量；三、了解氨基醚衍生物类药物的分析。,2010-3/25/30,3,第一节 芳 胺类药物的分析,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化
2、学性质,（一）基本结构与典型药物,2010-3/25/30,4,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,2010-3/25/30,5,盐酸丁卡因,2010-3/25/30,6,1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。,（二）主要理化性质,水解特性：分子结构中的酯键易水解，水解产物为对氨基苯甲酸或对丁基苯甲酸。,弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具弱碱性。,4. 其它特性：游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体， 难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。,2010-3/25/30,7,二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质 （一）基本结构与典
3、型药物,2010-3/25/30,8,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜,2010-3/25/30,9,盐酸布比卡因,盐酸利多卡因,2010-3/25/30,10,1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基的特性反应。注意水解反应的速度受空间位阻的影响。,（二）主要化学性质,2.水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋酸乙酯香味。,2010-3/25/30,11,3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基，可与FeCl3发生显色反应。,（二）主要化学性质,4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉
4、淀反应，可相互区别。,5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因 酰氨基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。,2010-3/25/30,12,三、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯 氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH2,HCl,NaNO2,重氮盐,OH-,-萘酚,橙黄,猩红色,2010-3/25/30,13,直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺,间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜,利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。,2010-3/25/30,14,盐酸丁卡因虽无芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺可与酸性溶液中与NaNO2反
5、应生成N亚硝基化合物的乳白色沉淀。,区别,2010-3/25/30,15,2010-3/25/30,16,盐酸丁卡因,2010-3/25/30,17,（二）与三氯化铁反应,对乙酰氨基酚 + FeCl3,蓝紫色化合物,2010-3/25/30,18,1. 与铜和钴离子反应：利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物；与氯化钴生成亮绿色沉淀。,（三）与金属离子反应,2010-3/25/30,19,盐酸利多卡因,2010-3/25/30,20,2. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。（Chp）,2010-3/25/30,21,3. 与汞离子反应,盐酸利多卡因 + HNO3 + Hg(NO
6、3)2,黄色,对氨基苯甲酸酯 HNO3 + Hg(NO3)2,红色或橙黄色,2010-3/25/30,22,1. 盐酸普鲁卡因的鉴别,(四) 水解产物反应,2010-3/25/30,23,盐酸普鲁卡因水解,2010-3/25/30,24,2. 苯佐卡因的鉴别,苯佐卡因 + NaOH,乙醇,乙醇 + I2 + NaOH,CHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）,2010-3/25/30,25,(五) 紫外特征吸收光谱法,1. 在max 处测定供试液的百分吸收系数。例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于max =240nm;E1%1cm = 715。在HCl(0.1nol/L)-甲醇于max =249nm;
7、 E1%1cm = 880,2. 在规定的浓度测定max 例如：醋氨苯砜5g/ml; max =256nm; 284nm 再例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml; max = 280nm,(六)红外吸收光谱法-用于原料药的鉴别,2010-3/25/30,26,（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。,四、特殊杂质检查,检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓； 如显色，与棕红色2号或橙红色2号 标
8、准液比较，不得更深。,2010-3/25/30,27,2. 有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，采用TLC 法 中的杂质对照品法。,3. 对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，采用比色法。,2010-3/25/30,28,(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,采用TLC法中的杂质对照品法进行检查。（Chp）,2010-3/25/30,29,（一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法Ch.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液
9、水解后用本法。,五、含量测定,2010-3/25/30,30,2010-3/25/30,31,1. 原理：,Ar-NHCOR + H2O,Ar-NH2 + RCOOH,H +,Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl,Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O,2010-3/25/30,32,测定主要条件：,(1) 加KBr增加反应速度,重氮化的反应历程为：,NaNO2 + HCl,HNO2 + NaCl,HNO2 + HCl,NOCl + H2O,KHCl,2010-3/25/30,33,2010-3/25/30,34,KBr + HCl,HBr + KCl,HNO2 + HBr,NO
10、Br + H2O,KKBr, KHBr 比KHCl大300倍,生成NOBr量大得多 加快反应速度,2010-3/25/30,35,(2) 加过量HCl加速反应：重氮化速度加快；重氮盐在酸性介质中稳定；防止生成氨基偶氮化合物。Ar-N2+Cl- + H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar + HCl一般摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.56 。,2010-3/25/30,36,(3) 室温条件下滴定(1030):温度每升高10加快2.5倍，但,太高,可使Ar-N2+Cl- + H2O,Ar-OH + N2 + HCl,滴定管尖端插入液面下滴定滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一
11、次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定,2010-3/25/30,37,(1) 永停滴定法 溶液 检流计 终点前： 无过量HNO2 无电流终点时：有过量 有电流（使指针偏离零HNO2 永停在某一位置）(2) 外指示剂法用KI-淀粉指示剂指示终点的原理： 2NaO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2O,3. 指示终点的方法,电位滴定法 内指示剂法,2010-3/25/30,38,(二）非水溶液滴定法,基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因侧链叔胺氮具有弱碱性。在非水滴定时，因其在冰醋酸中碱性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质
12、子的酸性强，可增加碱性。,2(CH3CO)2O,(CH3CO)3O+ + CH3COO-,2010-3/25/30,39,盐酸丁卡因的含量测定,（一）原理,2010-3/25/30,40,（三）操作注意 为增强丁卡因的碱性，在冰醋酸中加入适量醋酐。 加醋酸汞溶液消除氢卤酸干扰,消除滴定误差，空白试验校正,2010-3/25/30,41,1. 对乙酰基酚原料的含量测定 在0.4%NaOH介质中；257nmD%E1%1cm样 E1%1cm标100 ；E1%1cm7152. 对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上）1片稀HCl 24ml + H2O 1000ml 精密量 取5ml + 0.4%NaO
13、H10ml + H2O 100ml 257nm测定A。W110005100100C （g/100ml)W(g) = 200 C; C = A/715 溶出度W标示量10080为合格,（三）紫外分光光度法,2010-3/25/30,42,此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量，该法简单准确。色谱条件：色谱柱为BondapakC18 300mm4mm ；流动相为甲醇1HAc(40:60); UV检测器250nm。,（四）HPLC法,2010-3/25/30,43,98：133盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有 A. 重氮化偶合反
14、应 B. 羟肟酸铁盐反应 C. 氧化反应 D. 磺化反应 E. 碘化反应,2010-3/25/30,44,97：137采用亚硝酸钠法测定含量的药 物有 A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C苯佐卡因 D. 醋氨苯砜 E. 盐酸去氧肾上腺素,2010-3/25/30,45,95：85下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者 A. 乙酰水杨酸 B. 对氨基水杨酸钠 C. 对乙酰氨基酚 D. 普鲁卡因 E. 苯佐卡因,2010-3/25/30,46,96：81（99：72）. 亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是 A. 添加Br B. 生成NO+Br C生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行,
15、2010-3/25/30,47,95：75中国药典所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为 A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E. 自身指示剂法,2010-3/25/30,48,96：127亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有： A. 自身指示剂法 B. 内指示剂法 C. 永停法 D. 外指示剂法 E. 电位法,2010-3/25/30,49,例1. 以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸 A. 盐酸普鲁卡因 B. 盐酸普鲁卡因胺 C. 盐酸普鲁卡因胺片 D. 盐酸普鲁卡因注射液,2010-3/25/30,50,例2. 盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应
16、条件是： A. 强酸 B. 加入适量溴化钾 C. 室温（1030）下滴定 D. 滴定管尖端深入液面 E. 永停法指示终点,2010-3/25/30,51,第二节 苯乙胺类药物的分析,一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质 （一）基本结构与典型药物,*,2010-3/25/30,52,常见的苯乙胺类药物,2010-3/25/30,53,常见的苯乙胺类药物,2010-3/25/30,54,常见的苯乙胺类药物,2010-3/25/30,55,常见的苯乙胺类药物,2010-3/25/30,56,（二）主要化学性质,1.弱碱性 本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮显弱碱性。2.酚羟基特性 本类药物结构
17、中有酚羟基，可与FeCl3发生络合显色，遇光、热易氧化变色。3.光学活性 多数药物结构中有手性碳原子，具有旋光性。,2010-3/25/30,57,二、鉴别试验,(一)与三氯化铁反应,Ar-OHFeCl3,络合显色 碱液,紫色或紫红色,2010-3/25/30,58,(二）氧化反应,本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2, H2O2, K3Fe(CN)6氧化而显色， 例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2, H2O2 氧化后，生成肾上腺素红；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。,2010-3/25/30,59,(三）紫外特征吸收与红外吸收光谱,例如：盐酸异丙肾上腺
18、素 0.05mg/ml max = 280nm A =0.50,这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别,2010-3/25/30,60,(一) 酮体检查 本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢 化不完全，易引入酮体杂质。采用UV法检查：利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。例如：肾上腺素本项检查 配2.0mg/ml =310nm A0.05 盐酸去氧肾上腺素 配2.0mg/ml =310nm A0.02盐酸异丙肾上腺素 配2.0mg/ml =310nm A0.15,三、特殊杂质检查,2010-3/25/30,61,(二) 有关物质的检查采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。（盐酸
19、去氧肾上腺素 Chp）,2010-3/25/30,62,四、含量测定 （一）非水溶液滴定法（多用于原料药）利用芳伯氨基或侧链脂烃胺的碱性，在冰醋酸溶液中，用高氯酸液滴定，以结晶紫为指示剂，也可用电位法指示终点。,2010-3/25/30,63,硫酸沙丁胺醇,2010-3/25/30,64,测定中应注意：冰醋酸溶解样品后，应放冷后再加醋酸酐，防止氨基被乙酰化。硫酸盐在滴定液中酸性很强，只能滴至HSO4-。作空白校正。,2010-3/25/30,65,(二) 溴量法本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及 其注射液用此法。,基本原理：,2010-3/25/30,66,(三) 紫外-可见分光光度法
20、利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3络合显色，进行紫外测定。（盐酸多巴胺注射液）也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，进行紫外测定。（盐酸克仑特罗栓剂）,2010-3/25/30,67,例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定,上述偶合剂可与HNO2显色，干扰比色测定，可先加氨基 磺酸铵分解过量的HNO2。,HNO2 2H2NSO3NH4,2N2 + (NH4)2SO4 + H2SO4 +H2O,2010-3/25/30,68,(四) 荧光分光光度法,肾上腺素测定：,ex410nm、em520nm处测定荧光强度，对照法定量。,肾上腺素 +I2,肾上腺红,一定条件下 转位,N-甲基-3,5
21、,6-三羟基吲哚（具有荧光性）,2010-3/25/30,69,(五) HPLC法例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量测定。例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定采用RPIP-HPLC-EChD 法；用标准曲线法进行定量测定。,2010-3/25/30,70,练习与思考,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C.水杨酸 D.对氨基苯甲酸 E. 氨基酚 2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚 3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是
22、 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D.酮体 E. 苯甲酸,2010-3/25/30,71,B型题,A。硫酸铜反应 B.氧化反应 C. 还原反应 D.水解后重氮化-偶合反应 E. 重氮化-偶合反应1. 盐酸利多卡因 2. 肾上腺素3. 盐酸普鲁卡因4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,2010-3/25/30,72,X型题,1. 直接能与FeCl3产生颜色反应的药物有 A。盐酸普鲁卡因 B. 盐酸去氧肾上腺素 C. 对乙酰氨基酚 D. 盐酸利多卡因 E. 盐酸丁卡因2. 直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有 A。盐酸丁卡因 B. 盐酸普鲁卡因 C. 对乙酰氨基酚 D. 对氨基酚 E. 盐酸肾上腺素,2010-3/25/30,73,问答题,1、亚硝酸钠滴定法常采用的指示终点的方法有哪些？中国药典采用的是哪种？ 2、紫外分光光度法检查苯乙胺类药物中酮体的原理是什么？ 3、用溴量法测定苯乙胺类药物含量时，溴液能否过量太多？为什么？,
