流式细胞术检测细胞周期.doc

1、1流式细胞术检测细胞周期流式细胞术在许多题中常用到，但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例，大家共同学习。图中白色箭头及尾部 G1,G2,S 是我用 PS 加上去的，方便讨论。首先来认识下图： 1. 纵坐标 Cell Number：即计数到的有效细胞数；2. 横坐标 DNA Content：即 DNA 量，为什么用 DNA 量来区别各周期我们等下再讲；3. G1、G2、S 三期在上图已经用箭头标示；4. 右侧数字含义：Mean G1=195.4 即 G1 期 DNA 含量平均值为195.4；%G1=73.6 即 G1 期细胞数占总数的 73.6%；以此类推2下

2、面从细胞周期的角度看各参数的意义：1、细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。可分为四个阶段（见图）： G1 期(gap1)，指从有丝分裂完成到期 DNA 复制之前的间隙时间； S 期(synthesis phase) ，指 DNA 复制的时期； G2 期(gap2)，指 DNA 复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间； M 期又称 D 期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。2、从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类： 连续分裂细胞，在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 休眠细胞暂不

3、分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称 G0 期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关，如：小鼠十二指肠上皮细胞的周期为 10 小时，人类胃上皮细胞 24 小时，骨髓细胞 18 小时，培养的人了成纤维细胞 18 小时，CHO 细胞 14 小时，HeLa 细胞 21 小时。不同类型细胞的G1 长短不同，是造成细胞周期差异的主要原因。33、流式细胞结果图各参数的意义：前面讲过，常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞 DNA 含量（横坐标）来分析的：G1 期：细胞 DNA 复制还没有开始，也是 DNA 含量最少的，即流式检测结果图的第一个峰；S 期：细胞开始复制，到完成复制，是一个一倍 DNA 到二倍 DNA 的过程，在流式结果图中显示期跨度特别大（第二个不高但很宽的峰） ；G2 期：DNA 复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍 DNA，在流式结果图中的第二个峰；M 期：细胞分裂过程，此时细胞内也是二倍 DNA，用 DNA 含量的方法是无法与 G2 期分开，所以有第三峰明显升高时报告：G2/M 期阻滞。