1、,实验一 显微镜的使用与原生动物的观察,一、实验目的,1. 显微镜使用的一般方法；2. 通过草履虫、眼虫、变形虫等的形态结构观察,了解纤毛纲、鞭毛纲和肉足纲的主要特征。,二、实验材料,1草覆虫培养液或野外采集水样。2各种纤毛虫、变形虫、眼虫及疟原虫的染色标本装片。3. 显微镜、载玻片、盖玻片、胶头吸管、吸水纸、擦镜纸、1%碘液等,显微镜的结构,1.镜脚,4.载物台,5.标本夹,8.镜臂,2.开关,6.细调螺旋,7.粗调螺旋,3.滑动变阻器,11接目镜,10.镜筒,9.接物镜,三、光学显微镜的使用 1. 取镜 拿显微镜时，必须一手握紧镜臂，一手平托镜座,将显微镜安置在座位左侧离桌边三、四公分处
2、;2对光 转动转换器使低倍物镜对着载物台中央的通光孔 ;3放片 把切片放在载物台上，使要观察的部分对准接物镜镜头，用玻片夹夹住切片;4低倍接物镜的使用 一般都是用一个放大倍数适中的目镜（10）和最低倍的物镜开始观察，逐步改用倍数较高的物镜，从中找到符合实验要求的放大倍数。转换物镜时，先用低倍镜观察，调节到正确的工作距离（成像最清晰）;,5高倍接物镜的使用 使用高倍接物镜时，首先要用低倍接物镜按上法对好，然后将要放大观察的部分移至视野的中央，再把高倍接物镜头转至中央，使用高倍物镜观察。在用低倍物镜观察清晰时，换高倍物镜应可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动细准焦螺旋进行调节。 齐焦现象，可
3、以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。 显微镜观察时，要练习双眼同时张开，用左眼看镜。,6 油浸物镜的使用 如果使用油镜头，也必须先在低倍镜中找到被检部分后再换高倍镜调正焦点，并将被检部分移到视野中心。然后移开镜头，在盖玻片上滴一滴香柏油，再将油镜头换上观察。 切记：在使用油镜头时，绝对不能使用粗调只能用细调、否则会压碎玻片或损伤镜头。油镜使用完毕，应立即用擦镜纸蘸少许清洁剂, 将镜头上的香柏油擦去，否则香柏干燥后，就不易擦去 , 最好不用二甲苯擦，以免二甲苯入镜头，使树胶溶解，透镜松动
4、。,7. 显微镜用毕后的处理 （1）上升镜筒，取下载玻片。 （2）用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去镜头上残留的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。 切忌用手或其他纸擦拭镜头，以免使镜头沾上污渍或产生划痕，影响观察。 （3）用擦镜纸清洁其他物镜及目镜。 （4）将各部分还原，将物镜转成“八”字形，再向下旋。同时把聚光镜降下，以免接物镜与聚光镜发生碰撞危险。,四、生物绘图注意事项 用2H3H的铅笔，铅笔要削尖。 要边看显微镜，边按视野中的实际情况绘图，先轻轻勾画出轮廓，而后再画具体。 形态结构要准确，比例要正确，要求真实感，立体感，精美而美观。图的大
5、小要适当，应位于底的略偏左上方，以便在右侧和下方注解文字。 图中较暗的地方；用铅笔点上细点表示，越暗的地方(如细胞核)细点越多。 绘图的线条要光滑、匀称，点点要大小一致。字尽量注在图的右侧，用尺引出水平的指示线，指示线的右端平齐，然后注字。绘图完成后要写明时间，在图的下方注明图名及放大倍数。,草履虫（Paramecium caudatum）的形态观察,图1-1 草履虫 ParameciumA绿草履虫； B尾草履虫；C多核草履虫；D双核草履虫。（自何志辉）,五、草履虫临时装片的制备,取载玻片 少许脱脂棉 滴草履虫培养液 加盖玻片 （吸水）观察草履虫的外形与运动（低倍镜观察）观察外形及纤毛、口沟等
6、结构游泳时，草履虫全身纤毛有节奏的呈波状依次快速摆动由于口沟的存在和该处纤毛摆动有力，使虫体绕其中轴向左旋转，沿螺旋状路径前行遇到阻力时，虫体如何运动？,六、观察草履虫的内部结构,选择一个比较清晰而又不太活动的虫体，用高倍镜观察下列结构：表膜、食物泡、伸缩泡、胞口、胞咽、胞肛刺丝泡：用蓝黑墨水染色细胞核：用5的冰醋酸染色（12min）,七、草履虫的生殖装片观察,无性生殖：草履虫的无性生殖是横裂，注意观察细胞核的分裂情况。 有性生殖：草履虫的有性生殖是接合生殖，注意二虫在何处接合。,八、思考题,1以草履虫为例，说明原生动物是单细胞的结构，而同时又是完整独立的有机体。2绘草覆虫结构图并注明各构造名
7、称。3原生动物各纲的主要特征是什么？它们的分类依据是什么？,三丁基锡对草履虫增殖的影响,实验十 选择性开放实验,实验设计,按动物生物学实验指导(第2版) 介绍的方法收集、纯化草履虫。用稻草培养液( 10 g 稻草加1 L双蒸水煮沸过滤)培养草履虫。 显微镜观察草履虫,出现无性繁殖或有性繁殖即可进行接种。将草履虫接种于4个含不同浓度的TBT（0、10、100、1000ng/L）的溶液中。计数,具体操作: 轻轻搅拌使草履虫分布均匀, 从每个烧杯中各取出1 ml培养液, 同时向原培养液中补充1 ml新鲜培养液, 5%乙酸处死草履虫后置于显微镜下观察计数, 1 ml待测培养液随机分于计数玻板的6孔中, 每孔计数, 即得1 ml培养液中草履虫的数量。计数同时还对草履虫增殖方式进行观察、记录, 数码相机拍照。,
