1、显 微 观 察,一、显微镜的结构及使用方法,目镜,物镜,粗准焦螺旋,细准焦螺旋,镜筒,镜座,转换器,通光孔,载物台,遮光器,压片夹,反光镜,镜臂,显微镜的操作：一、取镜和安放1、右手握住镜臂，左手托住镜座，取出显微镜。2、把显微镜放在实验台距边缘2厘米左右，略偏左。安装好目镜和物镜。二、对光（即眼睛、目镜、物镜、通光孔和反光镜成一条直线）3、转动转换器，使低倍镜对准通光孔（物镜前端与载物台要保持2厘米距离）。4、把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目镜内，另一只眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。,三、观察（低倍镜观察）5、把所要观察的玻片标本放
2、在载物台上，用压片夹压住，标本正对通光孔的中心。6、转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛一定要看着物镜）。7、左眼观察，右眼睁开。转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，直到看清楚目标物为止。四、观察（高倍镜观察）8、在低倍镜下观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央。9、转动反光镜使视野明亮。10、转动转换器，换成高倍物镜。11、观察并用细准焦螺旋调焦。,一（ ） 二（ ） 三（ ）四（ ） 五（ ） 六（ ）七（ ） 八（ ）细观察用后（ ）再 （ ）,取,放,安装,转低倍,对光,放玻片,下降,调物象,整理,归箱,小结操作步骤,分析显微镜操作有关的问题,（1）怎样把
3、视野调亮、调暗？（2）怎样在低倍镜下找到物象？（3）“上”字在显微镜下观察是什么样的?如果向左下方移动装片，物象移动的方向是怎样的？（4）怎样转换高倍镜，是先升高镜筒还是直接转换高倍镜？高倍镜下的视野与低倍镜下的视野有何区别？（5）如果视野中出现污物怎样判断其位置？,（反光镜、光圈）,（调焦、移动装片）,（倒像、右上方）,（高倍镜下视野暗，看到的细胞大，但数量少）,物像放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数放大倍数是指放大物体的长度和宽度，而不是面积和体积。视野观察到细胞的数目多少与总放大倍数成反比；而每个细胞的大小与总放大倍数成正比。目镜长度与放大倍数成反比；物镜长度与放大倍数成正比。放大倍数与镜
4、头和盖玻片（载玻片）之间的距离成反比。,（1）目镜与物镜,大光圈：光线强、视野亮。光线过弱时可使用。小光圈：光线弱、视野暗。光线过强时可使用。平面镜：反射的光线较弱。光线过强时可使用。凹面镜：反射的光线较强。光线过弱时可使用。低倍物镜的凸透镜凸度小，且直径大，通光量大，视野明亮；高倍物镜的凸透镜凸度大，且直径小，通光量少，视野变暗。,（2）对光,例题1：某同学用显微镜观察装片时，见视野中有甲、乙、丙三异物。为判断异物的位置，他先转动目镜，见甲异物动，然后转换物镜，三异物仍然存在。据此，三异物可能在,A、目镜上B、物镜上C、反光镜上D、装片上,甲,乙、丙,A、D,例2用普通光学显微镜观察切片，当
5、用低倍物镜看清楚后，转换成高倍物镜却看不到或看不清原来观察到的物体，可能的原因是 A物体不在视野中央 B切片放反，盖玻片在下面 C低倍物镜和高倍镜的焦点不在同一平面 D未换目镜,ABC,例3用显微镜的一个目镜分别与4个不同倍数的物镜组合来观察血细胞涂片。当成像清晰时,每一物镜与载玻片的距离如图所示。如果载玻片位置不变,用哪一物镜在一个视野中看到的细胞最多,D,例4显微镜目镜为10，物镜为10，视野中被相连的64个分生组织细胞所充满。若物镜转换为40后，则在视野中可检测到的分生组织细胞数为A2个 B4个 C8个 D16个,B,（一）目的要求：、初步掌握高倍显微镜的使用方法。、观察几种细胞。,（二
6、）材料用具：建议选用的观察材料：真菌（如酵母菌）细胞。低等植物（如水绵等丝状绿藻）细胞。高等植物细胞（如叶的保卫细胞）。动物细胞（如鱼的红细胞或蛙的皮肤上皮细胞）以上这些材料，做成临时装片后就可以观察。也可以使用其他材料代替。,二、使用高倍显微镜观察几种细胞,（三）试剂：1、如果实验过程中需要染色，应准备常用的染色液。2、清水。（四）用具： 显微镜载玻片盖玻片镊子滴管消毒牙签铅笔,（五）临时装片制作的一般方法,1、擦片：将载玻片和盖玻片擦干净。,2.滴水（将清水滴在载玻片的中央）,3.取材：撕取观察材料。,4.展平：将材料在载玻片水滴中展平,5.盖片：放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡
7、产生,6.吸取,擦、滴、取、盖、滴、引,一般方法,方法并非一成不变的，根据实验材料、实验目的不同，需要改变和不断创新。,（五）临时装片制作的一般方法,（ 六）方法步骤：先低倍镜观察，后高倍镜观察。,练习：试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的原因。,相同点：都有细胞膜、细胞质、细胞核。差别：植物细胞：有细胞壁、有叶绿体、大液泡。动物细胞：无细胞壁、无叶绿体、无大液泡。,产生差异的原因：这些细胞的位置和功能不同，其结构与功能相适应。这是个体发育过程中细胞分化的差异。,三、观察DNA和RNA在细胞中的分布,（一）目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞 中分布的方
8、法。,（二）原理：1、甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同。甲基绿使DNA呈绿色，吡罗红使RNA呈红色。2、利用甲基绿、吡罗红混合染色剂可显示DNA和RNA在细胞中的分布。3、盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。,（三）材料与用具：1、材料：人的口腔上皮细胞。2、用具：大烧杯，小烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，铁架台，石棉网，火柴，洒精灯，吸水纸，显微镜。3、试剂：0.9%的NaCl溶液，8%的盐酸，吡罗红甲基绿染色剂，蒸馏水。,（四）步骤：,制片,水解,冲洗涂片,染色,观察,具体过程参看世纪金版P14,注意
9、事项： 1、由于绿色植物叶肉细胞含有叶绿体，为避免色素的干扰，该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。 2、DNA和RNA在细胞核和细胞质中都有分布，只是量的多少不同。,练习：世纪金版P14例题2、互动探究、变式训练。,在“观察DNA和RNA在细胞中分布”的实验中，下列说法正确的是（ ）A、染色时先用甲基绿染液，再用吡罗红染液B、用8%的盐酸目的之一是使DNA与蛋白质分离，使DNA水解C、洒精灯烘干载玻片，可迅速杀死细胞，防止细胞死亡时溶酶体对核酸的破坏D、用高倍显微镜可以比较清楚地看到绿色的染色体和呈红色的RNA分子,酒精灯烘干临时装片的目的是杀死并固定细胞，否则品腔上皮细胞在死亡时，溶酶体中的水
10、解酶会破坏细胞内的结构，包括DNA、RNA等,C,1、RNA产生的部位和发生作用的部位相同吗？为什么？2、实验选材用猪血行吗？为什么？,3、观察DNA和RNA在细胞中的分布，所运用的原理是（ ）A、单独利用甲基绿对细胞染色，可显示DNA在细胞中的分布，从而推知RNA的分布B、单独利用吡罗红对细胞染色，可显示RNA在细胞中的分布，从而推知DNA的分布C、利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞染色，同时显示DNA和RNA在细胞中的分布D、在细胞核、细胞质内可以分别提取到DNA和RNA的分布,C,体验制备细胞膜的方法,一、实验原理： 细胞内的物质具有一定的浓度。把细胞放入清水中，细胞由于吸水而胀破，除去
11、细胞内的其他物质，得到细胞膜。二、目的要求： 体验用哺乳动物红细胞制备细胞膜的方法和过程。三、材料用具： 猪（或牛、羊、人）的新鲜红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水） 蒸馏水，滴管，吸水纸，载玻片，盖玻片，显微镜,四、实验步骤,选材,制作装片,观察,滴清水,观察,结果,猪（或牛、羊、人）的新鲜红细胞稀释液,用滴管吸取一滴红细胞稀释液滴在载玻片上，盖上盖玻片,用显微镜观察红细胞形态（先低倍后高倍）,在盖玻片的一侧滴，在另一侧用吸水纸吸引（引流法）,持续观察细胞变化,凹陷消失，体积增大，细胞破裂，内容物流出，获得细胞膜,五、实验注意事项：1、取得红细胞后应先用适量的生理盐水稀释，目的是：（1）使红
12、细胞分散开，不易凝集成块。（2）使红细胞暂时维持原有的形态。2、操作时载物台应保持水平，否则易使蒸馏水流走。3、滴蒸馏水时应缓慢，边滴加边用吸水纸吸引，同时用显微镜观察红细胞的形态变化。4、如果该实验过程不是在载物台上的载玻片上操作，而是在试管中进行，那要想获得较纯净的细胞膜，红细胞破裂后，还必须经过离心、过滤才能成功。,讨论：为什么选用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料？,1、动物细胞没有细胞壁，无细胞壁的支持、保护，细胞易吸水胀破。省去了去除细胞壁的麻烦。2、哺乳动物和人成熟的红细胞，没有细胞核和具有膜结构的细胞器，易用离心分离法得到不掺杂细胞内膜系统的纯净的细胞膜。3、红细胞数量大，材料易得
13、。,1阅读下列材料后，回答问题：科学家在进行细胞膜化学成分分析时，采用哺乳动物或人的红细胞作为实验材料。将其特殊处理使细胞破裂发生溶血现象，一些物质溶出，再将溶出细胞外的物质洗掉，即可得到纯净的细胞膜（又称血影）。有的科学家将“血影”中的脂质提取出来，使其空气和水界面上铺展成单分子层，所形成的薄膜面积是原来细胞整个表面积的2倍。（1）如何处理红细胞才能使其发生溶血现象？ 。（2）红细胞溶血后，溶出细胞外的主要物质应该是 ，这种物质的特征是 ，因而使红细胞具有 的功能。,把红细胞放到清水里，细胞吸水胀破，细胞内的物质流出来，这样就可以得到细胞膜了,血红蛋白,在氧浓度高的地方易与氧结合，在氧浓度低
14、的地方易与氧分离,运输氧,（4）选取鸡的红细胞验证细胞膜具有磷脂双分子层结构可以吗？若先用鸡的红细胞会得到什么结论？为什么？（5）使用下列哪种物质处理会使细胞失去识别能力（ ）A核酸酶 B龙胆紫 C糖水解酶 D双缩脲试剂,不可以。若选 用鸡的红细胞，则磷脂形成的单分子层面积大大超过膜面积的2倍。因为细胞内各种细胞器的膜与细胞膜在成分上基本一致,（3）“血影”的化学组成是 、 、 ，其中的脂质主要是指 。,脂质 蛋白质 糖类,磷脂,C,五、用高倍镜观察线粒体和叶绿体,实验原理： 叶绿体的辨认依据： 叶绿体分布于细胞质中，呈绿色，扁平的椭圆球形或球形。 线粒体辨认依据： 线粒体分布于细胞质中，形态
15、多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。通过染色，可以在高倍镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。,实验目的： 使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布 实验材料： （1）材料：观察叶绿体时选用：藓类的叶（或波菜叶、黑藻的叶）。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。 若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。 观察线粒体时选用：人的口腔上皮细胞。 注意： 1、由于叶绿体呈绿色，因此不需要染色便可直接观察。 2、由于高
16、等植物细胞同时含 叶绿体和线粒体，因此观察线粒体时不选用高等植物细胞。,2、用具：显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，消毒牙签。,3、试剂：生理盐水，新配制的质量分数1%的健那绿染液，加热器。,方法步骤（观察线粒体）,方法步骤（观察叶绿体）,、讨论题：,（1）细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。（2）叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细
17、胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。,用显微镜观察叶绿体和细胞质流动，请回答：1、为什么选用黑藻的幼嫩叶片而不是幼根作为材料观察细胞质流动？,2、如果选用高倍镜观察，可能会出现什么情况？,幼叶中存在叶绿体，便于细胞质流动的观察，幼根中细胞质没有明显的参照物，不便于观察。,可能会找有到观察对象，还可能会出现高倍镜镜头压破玻片（损坏镜头）的情况。,1、小明用光学显微镜观察叶片细胞时，他看到了细胞核和细胞壁。他还可能看到的构造是（ ）A线粒体、高尔基体、核糖体 B叶绿体、线粒体、高尔基体C只有叶绿体D上述细胞器均不能看到2、下列哪种材料不能直接放在载玻片上观察叶绿体 （ ）A藓类的叶片 B
18、黄杨叶的横切片C菠菜叶下表皮或沾在下表皮上的少数叶肉细胞 D种子植物的叶片,C,D,3、在高倍显微镜下看到的叶绿体是 （ ）A绿色、棒状 B红色、棒状C绿色、扁平的椭球形或球形 D红色、扁平的椭球形或球形4、右图为显微镜下黑藻细胞的细胞质环流示意图，视野中的叶绿体位于液泡的右方，细胞质环流的方向为逆时针，则实际上，黑藻细胞中叶绿体的位置和细胞质环流的方向分别为 （ ）A叶绿体位于液泡的右方，细胞质环流的方向为顺时针B叶绿体位于液泡的左方，细胞质环流的方向为逆时针C叶绿体位于液泡的右方，细胞质环流的方向为逆时针D叶绿体位于液泡的左方，细胞质环流的方向为顺时针,C,B,六、观察植物细胞的质壁分离和
19、复原,实验原理：（1）质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。（2）质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。,、实验目的：（1）学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。 （2）了解植物细胞发生渗透作用的原理。、实验材料： 紫色洋葱
20、鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。 4、用具：显微镜，载玻片，盖玻片，刀片，滴管，镊子。,5、实验步骤,4、实验步骤,4、实验步骤,5、讨论题：,(1)如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。(2)当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？答：不会。因为红细胞不具细胞壁。,6、练习与巩固,(1)、将一张洋葱鳞片叶放在某一浓度的蔗糖溶液中,制成装片,放在显微镜下观察,有3种状态的
21、细胞,如图,你认为这3个细胞（均为正常的活细胞）在未发生上述情况之前,其细胞液的浓度依次是： A.ABC B.AAC D.BAC,A,(2)、一学生做质壁分离和复原实验时，显微镜下只有一个细胞没有发生质壁分离，其他细胞都出现了明显的质壁分离现象，这最可能是因为： A. 该细胞是正在发育过程中的细胞B. 该细胞是死细胞 C. 蔗糖溶液浓度太小D. 实验操作不正确(3)、将洋葱鳞片叶表皮细胞浸入05摩尔KNO3溶液中，细胞将发生的情况是A质壁分离 B死亡C不发生质壁分离 D质壁分离后自动复原,B,D,七、观察细胞的有丝分裂,1实验原理：（1）在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由
22、于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。（2）染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。,2实验目的：（1）制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片（2）观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。3实验材料： 洋葱（可用葱、蒜代替）根尖。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。4、用具： 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪刀，滴管，镊子。5、试剂： 15%
23、的盐酸，95%的洒精，0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液。,6实验步骤：一、根尖的培养 二、装片的制作（解离漂洗染色制片） 三、观察,5、讨论题：,制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？答：制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点：（1）剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间；（2）解离时，要将根尖细胞杀死，细胞间质被溶解，使细胞容易分离；（3）压片时，用力的大小要适当，要使根尖被压平，细胞分散开。,提醒：1、观察细胞有丝分裂，我们不能看到一个细胞的连续变化，是因为解离时细胞已被杀死。2、间期历时最 长，所以观察细胞有丝分裂装片时，大多数细
24、胞处于间期。,练习：世纪金版P56例3，P58考点基础达标T1,八、观察细胞的减数分裂,1实验原理： 蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂：减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化，因而可据此识别减数分裂的各个时期。2实验目的： 通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。,3方法步骤：,6、下列关于生物学实验的描述正确的是 （ ）A观察叶绿体时，换用高倍镜后视野会变暗，这时应该使用较小光圈或换平面镜采光B观察洋葱根尖细胞有丝分裂时，在高倍镜的视野中可以看到一个细胞从分裂前期到中期的变化C观察低温诱导染色体数目的变化时，最好选择均处于分裂中期的正常细胞和变异细胞进行观察比较D取人口腔上皮细胞，用吡罗红甲基绿染色并制成临时装片，在高倍镜下可观察到蓝绿色的线粒体,C,A.精巢管顶端 B.减数第一次分裂C.减数第二次分裂 D.精子细胞 E.精子,
