1、3.3.1 气相色谱仪及结构流程,1. 气相色谱仪,第三节 气相色谱仪,2. 气相色谱结构流程,1-载气钢瓶；2-减压阀； 3-净化干燥管；4-针形阀； 5-流量计；6-压力表； 7-进样口与汽化室；8-分离柱 9-热导检测器；10-放大器；11-温度控制器；12-记录仪,载气系统,进样系统,色谱柱,检测系统,温控系统,3. 气相色谱仪主要部件,(1) 载气系统包括气源、净化干燥管和载气流速控制。,常用的载气有：氢气、氮气、氦气。净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）。载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀，控制载气流速恒定。,(2) 进样装置,进样装置：进样器
2、+汽化室。气体进样器（六通阀）：推拉式和旋转式两种。 试样首先充满定量管，切入后，载气携带定量管中的试样气体进入分离柱。,液体进样器：,不同规格的专用注射器，填充柱色谱常用10L；毛细管色谱常用1L；新型仪器带有全自动液体进样器，清洗、润冲、取样、进样、换样等过程自动完成，一次可放置数十个试样。,汽化室：将液体试样瞬间汽化的装置。无催化作用。,(3) 色谱柱（分离柱）,色谱柱：色谱仪的核心部件。柱材质：不锈钢管或玻璃管，内径36 mm。长度可根据需要确定。柱填料：粒度为6080目或80100目的色谱固定相。液-固色谱：固体吸附剂液-液色谱：担体+固定液柱制备对柱效有较大影响，填料装填太紧，柱前
3、压力大，流速慢或将柱堵死，反之空隙体积大，柱效低。有关固定液性质及其选择见下一节。,(4) 检测系统,通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成；被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图。检测器：广谱型对所有物质均有响应；专属型对特定物质有高灵敏响应。常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器；有关检测器原理、结构见第三节。,(5) 温度控制系统,温度是色谱分离条件的重要选择参数。汽化室、分离室、检测器在操作时均需控制温度。汽化室：保证液体试样瞬间汽化。检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝。,分离室：准确控制分离需
4、要的温度。当试样复杂时，分离室温度需要按一定程序控制温度变化，各组分在最佳温度下分离。,3.3.2 气相色谱固定相,一、气固色谱固定相 1. 种类(1) 活性炭有较大的比表面积，吸附性较强。(2) 活性氧化铝有较大的极性。适用于常温下O2，N2，CO，CH4，C2H6，C2H4等气体的相互分离。CO2能被活性氧化铝强烈吸附而不能用这种固定相进行分析。(3) 硅胶与活性氧化铝大致相同的分离性能，除分析上述物质外，还能分析CO2，N2O，NO，NO2等，且能够分析臭氧。,气固色谱固定相,(4) 分子筛碱及碱土金属的硅铝酸盐(沸石)，多孔性。如3A，4A，5A，10X及13X分子筛等(孔径：埃)。常
5、用5A和13X(常温下分离O2与N2)。除了广泛用于H2、O2、N2、CH4、CO等的分离外，还能够测定He、Ne、Ar、NO、N2O等。(5) 高分子多孔微球（GDX系列）新型的有机合成固定相(苯乙烯与二乙烯苯共聚)。型号：GDX-01，GDX-02，GDX-03等。适用于水，气体及低级醇的分析。,2. 气固色谱固定相的特点,（1）性能与制备和活化条件有很大关系。 （2）同一种固定相，不同厂家或不同活化条件，分离效果差异较大。 （3）种类有限，能分离的对象不多。 （4）使用方便。,二、 气液色谱固定相,气液色谱固定相固定液 + 担体(支持体)：小颗粒表面涂渍上一薄层固定液。固定液特点：固定液
6、在常温下不一定为液体，但在使用温度下一定呈液体状态。固定液的种类繁多，选择余地大，应用范围不断扩大。担体：化学惰性的多孔性固体颗粒，具有较大的比表面积。,1. 作为担体使用的物质应满足的条件,比表面积大，孔径分布均匀；化学惰性，表面无吸附性或吸附性很弱，与被分离组分不起反应；具有较高的热稳定性和机械强度，不易破碎；颗粒大小均匀、适度。一般常用6080目、80100目。,2.担体（硅藻土）,红色担体：孔径较小，表孔密集，比表面积较大，机械强度好。适宜分离非极性或弱极性组分的试样。缺点是表面存有活性吸附中心点。 白色担体：煅烧前原料中加入了少量助溶剂（碳酸钠）。 颗 粒疏松，孔径较大。比表面积较小
7、，机械强度较差。但吸附性显著减小，适宜分离极性组分的试样。,气液色谱担体,3.固定液,固定液：高沸点难挥发的有机化合物，种类繁多。(1) 对固定液的要求应对被分离试样中的各组分具有不同的溶解能力，较好的热稳定性，并且不与被分离组分发生不可逆的化学反应。(2) 选择的基本原则“相似相溶”，选择与试样性质相近的固定相。(3) 固定液分类方法如按化学结构、极性、应用等的分类方法。在 手册中，一般将固定液按有机化合物的分类方法分为脂肪烃、芳烃、醇、酯、聚酯、胺、聚硅氧烷等。,(4) 固定液的最高最低使用温度,高于最高使用温度易分解，温度低呈固体。(5) 混合固定液对于复杂的难分离组分通常采用特殊固定液
8、或将两种甚至两种以上配合使用。(6) 固定液的相对极性规定：角鲨烷（异三十烷）的相对极性为零，-氧二丙腈的相对极性为100。,3.3.3 气相色谱检测器 一、气相色谱检测器特性,1.检测器类型 浓度型检测器：测量的是载气中通过检测器组分浓度瞬间的变化，检测 信号值与组分的浓度成正比。热导检测器。 质量型检测器：测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测信号值与单位时间内进入检测器组分的质量成正比。 广谱型检测器：对所有物质有响应，热导检测器。 专属型检测器：对特定物质有高灵敏响应，电子俘获检测器。,2.检测器性能评价指标,响应值（或灵敏度）S ：在一定范围内，信号E与进样量Q呈线性关系：
9、E = S Q S=E/Q 单位： mV/ (mg/mL)；浓度型检测器mV/ (mg/s)； 质量型检测器 S 表示单位质量的物质通过检测器时，产生的响应信号的大小。S 值越大，检测器（也即色谱仪）的灵敏度也就越高。检测信号通常显示为色谱峰，则响应值也可以由色谱峰面积（A）除以试样质量求得：S = A / m,3. 检出限和最小检出量,噪声水平决定着能被检测到的浓度（或质量）。,从图中可以看出：如果要把信号从本底噪声中识别出来，则组分的响应值就一定要高于N。检测器响应值为3倍噪声水平时的试样浓度(或质量)，被定义为检出限(或该物质的最小检出量)。,4.线性度与线性范围,检测器的线性度定义：检
10、测器响应值的对数值与试样量对数值之间成比例的状况。检测器的线性范围定义：检测器在线性工作时，被测物质的最大浓度(或质量)与最低浓度(或质量)之比。,二、热导检测器,1. 热导检测器的结构池体: 一般用不锈钢制成。热敏元件：电阻率高、电阻温度系数大、且价廉易加工的钨丝制成。参考臂：仅允许纯载气通过，通常连接在进样装置之前。,测量臂：仅载气携带被分离组分的流过，连接在紧靠近分离柱出口处。,2.检测原理,平衡电桥，见图。不同的气体有不同的热导系数。,钨丝通电，加热与散热达到平衡后，两臂电阻值： R参=R测 ; R1=R2 则： R参R2=R测R1 无电压信号输出；记录仪走直线（基线）。,进样后:,载
11、气携带试样组分流过测量臂而这时参考臂流过的仍是纯载气，使测量臂的温度改变，引起电阻的变化，测量臂和参考臂的电阻值不等，产生电阻差，即R参R测 则： R参R2R测R1,这时电桥失去平衡，a、b两端存在着电位差，有电压信号输出。信号与组分浓度相关。记录仪记录下组分浓度随时间变化的峰状图形。,3. 影响热导检测器灵敏度的因素,桥路电流I ： I，钨丝的温度 ，钨丝与池体之间的温差，有利于热传导，检测器灵敏度提高。检测器的响应值S I3，但稳定性下降，基线不稳。桥路电流太高时，还可能造成钨丝烧坏。池体温度：池体温度与钨丝温度相差越大，越有利于热传导，检测器的灵敏度也就越高，但池体温度不能低于分离柱温度
12、，以防止试样组分在检测器中冷凝。,载气种类：载气与试样的热导系数相差越大，在检测器两臂中产生的温差和电阻差也就越大，检测灵敏度越高。载气的热导系数大，传热好，通过的桥路电流也可适当加大，则检测灵敏度进一步提高。氦气也具有较大的热导系数，但价格较高。,某些气体与蒸气的热导系数，单位：10-5J / cms,三、氢火焰离子化检测器,1. 特点(1) 典型的质量型检测器。(2) 对有机化合物具有很高的灵敏度。(3) 无机气体、水、四氯化碳等含氢少或不含氢的物质灵敏度低或不响应。(4) 氢火焰离子化检测器具有结构简单，稳定性好，灵敏度高，响应迅速等特点。(5) 比热导检测器的灵敏度高出近3个数量级，检
13、出限可达10-12gs-1。,2. 氢焰检测器的结构,(1) 在发射极和收集极之间加有一定的直流电压（100300V）构成一个外加电场。(2) 氢焰检测器需要用到三种气体：,N2 ：载气携带试样组分；H2 ：为燃气；空气：助燃气。使用时需要调整三者的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。,3. 氢火焰离子化检测器的原理,(1)当含有机物 CnHm的载气由喷嘴喷入火焰时，在C层发生裂解反应产生自由基 ：CnHm CH (2)产生的自由基在D层火焰中与外面扩散进来的激发态原子氧或分子氧发生如下反应： CH + O CHO+ + e (3)生成的正离子CHO+ 与火焰中大量水分子碰撞而发生分子离子反应：C
14、HO+ + H2O H3O+ + CO,A区：预热区 B层：点燃火焰 C层：热裂解区： 温度最高 D层：反应区,氢火焰离子化检测器的原理,(4) 化学电离产生的正离子和电子在外加恒定直流电场的作用下分别向两极定向运动而产生微电流（约10-610-14A）。 (5) 一定范围内，微电流的大小与进入离子室的被测组分质量成正比，质量型检测器。 (6) 组分在氢焰中的电离效率很低，大约五十万分之一的碳原子被电离。 (7) 离子电流信号输出到记录仪，得到峰面积与组分质量成正比的色谱流出曲线。,A区：预热区 B层：点燃火焰 C层：热裂解区： 温度最高 D层：反应区,4. 影响氢火焰离子化检测器灵敏度的因素
15、,各种气体流速和配比的选择N2流速的选择主要考虑分离效能， N2 H2 = 1 11 1.5氢气 空气=1 10 极化电压正常极化电压选择在100300 V范围内。,四、 电子捕获检测器,高选择性，(放射源 63N，产生射线；N2载气，产生电子(基流)。含杂原子试样吸收电子产生负峰)。仅对含有卤素、磷、硫、氧等元素的化合物有很高的灵敏度，检出限10-14 gmL-1。对大多数烃类没有响应。,较多应用于农副产品、食品及环境中农药残留量的测定。,ECD,五、 其他检测器,1.火焰光度检测器(flame photometric detector,FPD)化合物中硫、磷在富氢火焰中被还原，激发后，辐射
16、出400 nm和550 nm 左右的光谱，可被检测。该检测器是对含硫、磷化合物的高选择性检测器。 2. 定性检测器(联用仪器)色-质联用仪 (通过分子分离器连接)。,3.4.1 色谱柱及使用条件的选择,1. 固定相的选择气-液色谱，应根据“相似相溶”的原则。,分离非极性组分时，通常选用非极性固定相。各组分按沸点顺序出峰，低沸点组分先出峰。, 分离极性组分时，一般选用极性固定液。各组分按极性大小顺序流出色谱柱，极性小的先出峰。,第四节 分离操作条件的选择, 分离非极性和极性的（或易被极化的）混合物，一般选用极性固定液。此时，非极性组分先出峰，极性的（或易被极化的）组分后出峰。, 醇、胺、水等强极
17、性和能形成氢键的化合物的分离，通常选择极性或氢键性的固定液。, 组成复杂、较难分离的试样，通常使用特殊固定液，或混合固定相。,2. 固定液配比（涂渍量）的选择,配比：固定液在担体上的涂渍量，一般指的是固定液与担体的百分比，配比通常在5%25%之间。配比越低，担体上形成的液膜越薄，传质阻力越小,柱效越高，分析速度也越快。配比较低时，固定相的负载量低，允许的进样量较小。分析工作中通常倾向于使用较低的配比。,3.柱长和柱内径的选择,增加柱长对提高分离度有利(分离度R正比于柱长L2)，但组分的保留时间 tR ，且柱阻力，不便操作。柱长选用原则：在能满足分离目的的前提下，尽可能选用较短的柱，有利于缩短分
18、析时间。填充色谱柱的柱长通常为13 m。可根据要求的分离度通过计算确定合适的柱长或实验确定。柱内径一般为34 mm。,4.柱温的确定,控制在固定液的最高使用温度（超过该温度固定液易流失）和最低使用温度（低于此温度固定液以固体形式存在）范围之内。,柱温升高，分离度下降，色谱峰变窄变高。柱温，被测组分的挥发度，即被测组分在气相中的浓度，K，tR，低沸点组份峰易产生重叠。,柱温，分析时间。两组分的相对保留值增大的同时，两组分的峰宽也在增加，当后者的增加速度大于前者时，两峰的交叠更为严重。,柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温度。组分复杂，沸程宽的试样，采用程序升温。,程序升温,3.4.2 载
19、气种类和流速的选择,1. 载气种类的选择三个方面：载气对柱效的影响、检测器要求及载气性质。载气摩尔质量大，可抑制试样的纵向扩散，提高柱效。载气流速较大时，传质阻力项起主要作用，采用较小摩尔质量的载气（如H2，He），可减小传质阻力，提高柱效。热导检测器需要使用热导系数较大的氢气有利于提高检测灵敏度。在氢焰检测器中，氮气是首选。载气的安全性、经济性及来源是否广泛等因素。,2. 载气流速的选择,由图可见存在最佳流速（uopt）。实际流速通常稍大于最佳流速，以缩短分析时间。,3.4.3 其他操作条件的选择,1.进样方式和进样量的选择液体试样采用色谱微量进样器进样，规格有1L，5L，10L等。进样量应
20、控制在柱容量允许范围及检测器线性检测范围之内。进样要求动作快，时间短。气体试样应采气体进样阀进样。,2.汽化温度的选择,色谱仪进样口下端有一汽化器，液体试样进样后，在此瞬间气化；汽化温度一般较柱温高3070C，防止汽化温度太高造成试样分解。,3.5.1 色谱定性鉴定方法,1.利用纯物质定性的方法利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中的位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。,第五节 色谱定性与定量分析方法,2.利用文献保留值定性,利用相对保留值r21定性相对保留
21、值r21仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。,3.保留指数,又称Kovats指数，是一种重现性较好的定性参数。测定方法：将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。其他物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示。,保留指数计算方法,4.与其他分析仪器联用的定性方法,小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS）色谱-红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定,3.5.2 色谱定量分析
22、方法,1. 峰面积的测量 （1）峰高（h）乘半峰宽（Y1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍：A = 1.064 hY1/2（2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：A = h（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积：A = hbtR （4）自动积分和微机处理法,2. 定量校正因子,试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即：m i = fi Ai 绝对校正
23、因子：比例系数fi ，单位面积对应的物质量，即f i =m i / Ai相对校正因子fi ：即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。,当mi、mS以摩尔为单位时，所得相对校正因子称为相对摩尔校正因子，用fm表示；当mi、mS用质量单位时， 以fw表示。,3.常用的几种定量方法 （1）归一化法,特点及要求： 归一化法简便、准确； 进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大； 仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。,（2）外标法,外标法也称为标准曲线法。 特点及要求：,外标法不使用校正因子，准确性较高，操作条件变化对结果准确性影响较大。对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的
24、快速分析。,（3）内标法,内标物要满足以下要求： （a）试样中不含有该物质； （b）与被测组分性质比较接近； （c）不与试样发生化学反应； （d）出峰位置应位于被测组分附近。 试样配制：准确称取一定量的试样W，加入一定量内标物mS,内标法计算式：,试样配制：准确称取一定量的试样m，加入一定量内标物ms 计算式：,内标法特点：,(a) 内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。 (b) 每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。 (c) 若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定，则：,内标标准曲线法。,3.6.1 毛细管气相色谱的特点 一、 毛细管
25、色谱的特点,1. 提高色谱分离能力的途径(1)塔板理论：增加柱长，减小柱径，即增加柱子塔板数。(2)速率理论：减小组分在柱中的涡流扩散和传质阻力，可降低塔板高度。,第六节 气相色谱法的应用技术,2. 毛细管色谱柱的结构特点,（1） 不装填料，阻力小，长度可达百米的毛细管柱，管径0.2mm。 （2）气流单途径通过柱子，消除了涡流扩散。 （3）固定液直接涂在管壁上，总柱内壁面积较大，涂层很薄，则气相和液相传质阻力大大降低。 （4）毛细管色谱柱柱效高达每米30004000块理论塔板，一支长度100 m的毛细管柱，总的理论塔板数可达104106。,3. 毛细管色谱具有以下优点,（1）分离效率高：比填充
26、柱高10100倍。 （2）分析速度快：比填充柱色谱速度快。 （3）色谱峰窄，峰形对称。较多采用程序升温方式。 （4）灵敏度高，一般采用氢火焰离子化检测器。 （5）涡流扩散为零。,4. 毛细管色谱柱的制备方法,涂壁开管柱（wall coated open tubular，WCOT柱）：将固定液直接涂敷在管内壁上。柱制作相对简单，但柱制备的重现性差，寿命短。多孔层开管柱（porous layer open tubular，PLOT柱）：管壁上涂敷一层多孔性吸附剂固体微粒。构成毛细管气固色谱。载体涂渍开管柱（support coated open tubular，SCOT柱）：将非常细的担体微粒粘接在管壁上，再涂固定液。柱效较WCOT柱高。化学键合或交联柱：将固定液通过化学反应键合在管壁上或交联在一起。使柱效和柱寿命进一步提高。,二、结构流程,具有分流和尾吹装置,三、分流比调节,毛细管柱内径很细，因而带来三个问题： （1）允许通过的载气流量很小。 （2）柱容量很小，允许的进样量小。需采用分流技术。 （3）分流后，柱后流出的试样组分量少，流速慢。解决方法：灵敏度高的氢火焰离子化检测器，采用尾吹技术。,分流比：放空的试样量与进入毛细管柱的试样量之比。一般在501到500 1之间调节。,
