1、DNS 法测还原糖方法一 原理DNS 即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成 3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，540nm 处有吸收，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。 二 试剂及方法2.1 试剂1. 1 mg/ml 的葡萄糖溶液2. 3,5二硝基水杨酸用 400mL 蒸馏水溶解 6.3g3，5 二硝基水杨酸，逐步加入 21g 氢氧化钠，再加入182g 四水合酒石酸钾钠、5.0g 苯酚、5.0g 无水亚硫酸钠，温水浴(不超过 48)，不断搅拌，直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至 1
2、000mL，保存在棕色瓶中，与二氧化碳隔绝，静置 5 7 天后使用， 贮存期 为 6 个月。2.2 葡萄糖标曲的绘制表 1 葡萄糖标曲的绘制方法试管试剂0 1 2 3 4 5葡萄糖标准液(ml) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5蒸馏水(ml) 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 03,5-二硝基水杨酸(ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5糖含量（ mg） 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5混合均匀，沸水浴 5min，冷却后加入 4mL 蒸馏水，混匀，在 540nm 下测 OD 值2.3 发酵液样品测定将发酵液稀释一定倍数后，取 3 只比色管标号 1,2,3，加入稀释和的发酵液 0.5 ml，加入 DNS 试剂 0.5 ml 混匀，沸水浴 5min，冷却后加入 4 ml 蒸馏水混匀，测 OD540表 2 样品的测定方法管号 0 1 2还原糖待测样品 （mL） 0.0 0.5 0.5蒸馏水 （mL） 0.5 0.0 0.0DNS 试剂 （ mL） 0.5 0.5 0.5蒸馏水 （mL） 4 4 4A540 nm计算所得还原糖含量 （mg）三 结果计算3.1 标曲3.2 样品的还原糖含量 稀 释 倍 数）加 人 样 品 的 体 积 （ ）计 算 得 到 的 还 原 糖 量 （）还 原 糖 含 量 （ ml5.0g/gL
