1、现代生物学实验,实验一、TEM样品包埋块的制备,实验步骤 切取1mm3左右大小的组织块，立即放入PBS（pH7.2)配制的2.5%戊二醛中固定1小时。 用0.1molPBS缓冲液冲洗三次每次510分钟。 1锇酸固定1小时，然后用缓冲液冲洗三次每次510分钟。 丙酮脱水：3050708090100100每级510分钟 浸透：脱水剂：包埋剂=3：1 1小时脱水剂：包埋剂=1：3 过 夜,包埋,聚合：45 oC 12h 60 oC 24h,磷酸缓冲液（Phosphate Buffer Saline, PBS） 0.2molL-1 PBS 配制A液：Na2HPO4 .2H2O 35.61g加DDW 至
2、 1000ml B液：NaH2PO4 .H2O 27.6g加DDW 至 1000ml,不同pH磷酸缓冲液的配制pH 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6A液 18.8 24.5 30.5 36.0 40.5 43.5 (ml)B液 31.2 25.5 19.5 14.0 9.5 6.5 (ml),Epon812包埋液的配制Epon812树脂 20mlDDSA 4.6mlMNA 15.3mlDMP-30 0.8ml,实验二、支持膜与胶体金的制备,胶体金的制备,柠檬酸三钠法0.01%氯金酸（HAuCl4)水溶液100ml加热至沸腾，加1.5ml 1%柠檬酸三钠水溶液，出现橙红色。金颗粒大小与柠檬酸三钠的关系柠檬酸三钠（ml) 4 1.5 1.0 0.75 金颗粒的直径（nm) 15 30 50 60,胶体金与标记蛋白的配比,胶体金pH的调节：用0.1mol K2CO3调到pH9.0 取7支2ml离心管分别加入1ml胶体金 再向每支管中加入1ml不同浓度的牛血清白蛋白 混合均匀后分别加入0.1ml10%NaCl 混合均匀后按照下图观察颜色的变化 确定出包裹胶体金蛋白的量,胶体金与标记蛋白的比例40 35 30 25 20 15 10 蛋白含量mg,试验三、TEM、SEM观察,实验四、超速离心、紫外分光光度仪演示,试验五、气相、液相色谱演示,
