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白蛋白检测操作程序.doc

1、白蛋白检测操作程序白蛋白(albumin,ALB)是一种仅含有氨基酸的单纯蛋白质,在血浆中发挥多种生理功能。溶于水和中性盐,易与阴离子染料结合,故本试验采用溴甲酚绿(阴离子染料)法测定,在反应中加入丁二酸缓冲液能够避免溶液混浊,降低空白吸光度。主要用于肝、肾等疾病的诊断。实验原理在 pH4.2 条件下,白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色结合物,蓝绿色结合物与样本中白蛋白浓度成正比,在630nm 处测定吸光度值,即可求得样本中白蛋白的浓度。试剂与仪器1. 试剂1.1. 白蛋白试剂盒(由上海复兴长征医学科学有限公司提供)化学组成:溴甲酚绿 0.35mmol/L丁二酸缓冲液 50mmol/L工作参数:T

2、est ALBAssay Code 1 Point 10Assay Point 3Wave (Sub/Main) (2nd/Primary) 700/ 600S. Vol. (Normal) 2ABS. Limit 32000 IncreaseProzone Limit 0 LowerReagent R1/T1 300 0 00306R2/T2 0 0 00306R3/T3 0 0 00306R4/T4 0 0 00306Calibration Type Linear 2 2 0SD Limit 999Duplicate Limit 32000Sensitivity Limit 0Sl ABS

3、 Limit -32000 32000Unit Name g/LDate Mode On BoardSTD (1) 0Conc (2) 41.5K Factor在开展项目之前或更换试剂品牌时,将以上工作参数输入到仪器内,并按要求进行调整后,方可进行实验。技术性能指标:试剂空白起始吸光度(630nm37)0.20A。线性范围:50g/L 10%。准确度:相对偏差(RE%)10%。精密度:批内精密度变异系数(CV%)5%;批间精密度相对极差(%)5%。储存条件、有效期:储存于 225,避光可稳定 18 个月。以蒸馏水为空白在 630nm 处光吸收值高于0.3A 时,则不能使用。计算公式:白蛋白深度

4、(g/L)= 校准液浓度( g/L)样品管吸光度校准管吸光度以上是依据化学实验计算测试结果的公式,全自动分析时将校准液浓度值(Conc 值)输入仪器即可。1.2. 英国郎道(RANDOX)质控品,每次采用正常和异常两个水平,并参照质控品测试要求进行。1.3. 校准液2. 仪器采用日立(HITACHI)7060 型全自动生化分析仪。选择波长 340-800nm 之间,能对终点、速率、两点、免疫比浊等方法的实验进行测定。标本测定程序1. 开 机:开机前要加清洗液、上打印纸、接蒸馏水等。然后打开电源及中文计算机信息管理系统。2. 试剂准备:开机后将所需试剂置于试剂盘相应位置。3. 校 准:建立实验时

5、,必须进行起始校准、再校准、试剂空白试验、杯空白试验(每周一次) ,通过后才能进行正常测试。4. 质 控:每日测定开始前,首先做两个不同浓度的质控血清,质控符合要求后,再进行常规样品测试。5. 标本测定: 将标本按顺序摆放于样品盘上,进行测试项目登记,然后执行标本测定程序。6. 审核结果:标本测定后,对结果进行审核,可疑数据需重新测定。检查测试数据全部正确后,传入中文计算机信息管理系统,保存并打印出中文报告。7. 关 机:将仪器冲洗后,执行关机程序。正常参考值3753g/L 临床意义白蛋白是主要的血浆蛋白。其主要功能包括调节细胞外液的分布;运输诸如激素、脂类、维生素、钙和其它微量元素;构成体内

6、部分氨基酸库;维持渗透压。测定血清白蛋白常用于病人状态的非特异监视。高白蛋白血症常见于脱水或血液浓缩。低白蛋白通常是由于血液被稀释;体内水份过多;蛋白质丢失过多,如肾病综合症,烧伤等;摄入不足、吸收不良或肝脏疾病而导致白蛋白合成降低;分解代谢增加,如甲状腺机能亢进、糖尿病和发热等。注意事项1. 试剂和样本用量可根据仪器的要求按比例确定。 2. 结果的准确性依赖于实验的校正和测定温度、时间的全面控制等。3. 高脂血清会引起测定结果假性升高,此时可采用样本空白管校正:在 3.00mL 生理盐水中加入 20L 样本,混合后在 630nm 处以生理盐水调零,读取样本空白管吸光度值,再用样本管吸光度值减去上述样本空白管吸光度值。4. 标本置于 28,可稳定 20 天。标本采集1. 血清:采用含有促凝剂或分离胶的负压真空管,清晨空腹静脉取血 4ml,并及时分离血清防止溶血。2. 血浆:采用含有肝素或 EDTA 抗凝剂的负压真空管抽取,及时送检。

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