1、 1 尼康 TI-S 操作规程 眼视光 研究室 2012-02-29 2 警告和注意 1 高温警告 此标记在透射照明器的顶部及 12V100W 灯室上，提醒您注意以下几点： A 灯亮时，灯泡可产生高温高热，灯室在使用过程中及照明刚关闭时非常热，为避免烫伤，请勿在灯亮时触摸灯室，而要在关闭电源 30 分钟后方可接触； B 为避免火灾，切勿在亮灯或熄灯三十分钟内，在 灯室周围放置纤维织品、纸张或易燃物质如汽油、乙醚、稀料或酒精； C 在使用时电源底座发热，请不要堵塞电源侧面的通风孔； D 更换灯泡前确信灯室已充分冷却。 3 不要弄湿显微镜 如果显微镜被弄湿，可能会导致电路短路从而损坏显微镜或发生危
2、险。如果不小心将液体溅到显微镜上，请立即关闭电源开关 (拨至 O 侧 )并拨掉电源线，然后用一块干布擦干。如果有液体进到显微镜内，请停止使用并与就近的尼康代理商联系。 4 微弱电磁波 本显微镜有微弱的电磁波，如果靠近精密电子仪器使用，其精度有可能受到不良影响。 5 搬运显微 镜 当移动显微镜时，请不要紧握调焦旋钮、目镜筒、平台、透射照明器等部位，因为这有可能导致部件损坏或脱落。而要握紧显微镜前、后的底部。 6 小心 T-SR 矩型载物台的伸出齿条 平台移动时 T-SR 矩型载物台的齿条会向外伸出，在调焦或转动物镜转换器时，小心不要被齿面弄伤您的手。 明场显微术操作规程 A 明场显微术用于观察染
3、色标本和定位样本观察视野； B 透明照射器（卤素灯）使用时灯泡可产生高温高热，使用完请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源 30 分钟后再盖上防尘罩，防止烧坏显微镜部件和发生火灾 8； C 聚光器调焦旋钮、聚光器和环形光阑调中螺钉由工程师调整固定好，请不要随意调整，以免造成显微镜使用不正常 8， 12； D 使用完毕后，请及时登记显微镜使用状态。 注意： 流程： 3 流程： 1 了解明场显微镜光学系统部件：电源 -透射照明器 -滤光片 -聚光器 -聚光镜 -载物台-物镜及物镜转换器 -荧光滤光块转盘 -目镜 2 打开电源 ： A 打开外置电源开关 8； B 打开显微镜左侧的透射照明器开关 10；
4、C 将显微镜上的亮度调节盘调整到 12V100W 位置 10； 3 将滤光片 DNCB 推进到光路中 ， ND 根据亮度需要移入和移 出光路 9； 4 将聚光器模块旋转至 A 位置 12； 5 将荧光滤光块转盘旋转至无字母标示位置（明场无需使用荧光滤光片） 10； 6 先用低倍物镜确定观察视野，调节亮度和焦距，找到并观察样本 7， 10； 7 调整目镜筒的屈光度使成像清晰度，调整目镜筒瞳距宽度 11； 8 通过物镜转换器切换高倍物镜观察细胞，调节亮度、焦距和物镜校正环，找到并观察样本，使显微图像最清晰（切换高倍物镜后光线会减弱） 10； 9 20 倍物镜和 40 倍物镜带有物镜校正环，当校正环
5、刻度设定值与实际容器底板厚度（细胞培养皿或载 玻片的底部）一致时，显微图像为最清晰状态 10； 10 肉眼观察找到需拍照视野后，通过光路转换盘切换光路，打开电脑和软件拍照 11； 11 观察结束时，把显微镜左侧亮度调节旋钮调至最小，依次关闭显微镜左侧的透射照明器开关和外置电源开关，登记显微镜使用情况； 12 请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源 30 分钟后再盖上。 相差显微术操作流程 A 相差显微术用于观察活细胞，显微图像立体感更强； B 透明照射器使用时灯泡可产生高温高热，使用完请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源 30 分钟后再盖上防尘 罩，防止烧坏显微镜部件和发生火灾 8； C 聚光器调焦
6、旋钮、聚光器和环形光阑调中螺钉由工程师调整固定好，请不要随意调整，以免造成显微镜使用不正常 8， 12； D 使用完毕后，请及时登记显微镜使用状态。 注意： 4 1 了解相差显微镜光学系统部件；电源 -透射照明器 -滤光片 -聚光器 -聚光镜 -载物台-物镜转换器 -荧光滤光块转盘 -目镜； 2 打开电源 ： A 打开外置电源开关 8； B 打开显微镜左侧的透射照明器开关 10； C 调整亮度调节盘 10； 3 将滤光片 D 推进到光路中， NCB 滤光片移入 ， ND 根据亮度需要移入和移 出光路 9； 4 将孔径光阑完全打开 12； 5 将聚光器模块旋转至 Ph1(使用 10 倍或 20
7、倍物镜时 )或 Ph2(使用 40 倍物镜时 ) 12； 6 将荧光滤光块转盘旋转至无字母标示位置（相差无需使用荧光滤光片） 10； 7 先用低倍物镜确定观察视野，调节亮度和焦距，找到并观察样本 7， 10； 8 调整目镜筒的屈光度使成像清晰度，调整目镜筒瞳距宽度 11； 9 通过物镜转换器切换高倍物镜观察细胞，调节亮度、焦距和物镜校正环，找到并观察样本，使显微图像最清晰（切换 高倍物镜后光线会减弱） 10； 10 20 倍物镜和 40 倍物镜带有物镜校正环，当校正环刻度设定值与实际容器底板厚度（细胞培养皿或载玻片的底部）一致时，显微图像为最清晰状态 10； 11 肉眼观察找到需拍照视野后，通
8、过光路转换盘切换光路，打开电脑和软件拍照 11； 12 观察结束时，把显微镜左侧亮度调节旋钮调至最小，依次关闭显微镜左侧的透射照明开关和外置电源开关，登记显微镜使用情况； 13 请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源 30 分钟后再盖上。 荧光显微术操作流程 A 荧光显微术用于观察荧光染色和荧光标 记的样本； B 使用前明确样本荧光激发光波长和发射光波长，了解需要使用的荧光滤光片 13； C 荧光显微镜光学系统部件在组成以及原理上与前三种显微镜差别很大，在使用时应了解荧光显微镜光程和明场显微镜光程； D 荧光 灯灯室可产生高温高热，使用完请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源 30 分钟后再盖上防尘罩
9、，防止烧坏显微镜部件和发生火灾 8； E 为延长汞灯使用寿命，应按规范操作：开启汞灯变压器电源预热三分钟后再启注意： 流程： 5 动激发按钮，激发后就可以使用，每次使用至少开机 20 分钟，两次连续使用的时间间隔至少 20 分 钟以上 13； 1 了解荧光显微镜光学系统部件：汞灯电源 -汞灯灯室 -荧光减光片 -荧光滤光块转盘 -物镜转换器 -载物台 -目镜； 2 为避免室内日光灯对观察荧光的影响，观察时应关闭室内日光灯，最好使观察环境处于暗室中； 3 使用荧光显微术观察样本，先关闭荧光光闸，用明场显微术找到并观察细胞，确定观察视野后，关闭明场显微术光源，再将荧光显微术相关部件转换到光路中，打
10、开荧光光闸进行观察 13； 4 根据样本荧光的激发波长选择荧光滤光块转盘上的相应荧光滤光块 13； 5 调节亮度和焦距，荧光亮 度是通过汞灯灯室旁边的荧光减光片的进出来调节激发光的强度 13； 6 需要重新定位观察视野时，应关闭荧光滤光块转盘上的荧光光闸来切断荧光激发光，减少样本的荧光淬灭，再用明场显微术来确定观察视野 13； 7 肉眼观察找到需拍照视野后，通过光路转换盘切换光路，打开电脑和软件拍照 11； 8 观察结束时，根据汞灯使用规则关闭荧光电源，把荧光减光片退出光路，并根据明场显微术操作说明关闭明场电源，登记显微镜使用情况 13； 9 请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源 30 分钟后再盖上。 附 11 荧 光滤光块使用波长范围： 荧光滤光块（过滤激发光） 激发波长 发射波长 荧光颜色 UV 330-380nm 420nm 蓝色 Blue 450-490nm 520nm 绿色 Green 510-560nm 590nm 红色 附 12 常用荧光素的激发波长与发射波长（另参见一本黑色资料） 6 起偏器（微分干涉棱镜）
