1、1糖醛酸含量测定硫酸-咔唑（523 nm）1实验材料1.1药品：半乳糖醛酸、四硼酸钠、浓硫酸、无水乙醇、咔唑、漩涡混合器、具塞试管1.2对照品溶液的配制精密称取干燥至恒质量的半乳糖醛酸10mg, 用适量的蒸馏水溶解, 并定容于100mL 容量瓶中, 配成100g/mL 的对照品溶液。1.3供试品溶液的配制精密称取多糖10mg, 加入蒸馏水溶解, 并定容于10mL 容量瓶中, 配制成浓度为1mg/mL 溶液。1.4四硼酸钠- 硫酸溶液的配制精密称取0.478g 四硼酸钠溶解于100mL 浓硫酸中备用3。1.5咔唑溶液的配制精密称取咔唑75mg, 溶解于50mL 无水乙醇中,配制成0.15%的咔唑
2、溶液备用。2实验方法2.1测定波长的选择分别吸取对照品溶液、供试品溶液1mL, 置于10mL 具塞试管中, 在冰水浴中分别加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL, 用漩涡混合器混匀, 于沸水浴中加热20min, 取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 另取1mL 蒸馏水同法操作作参比, 在波长400800nm 扫描,2.2标准曲线的制作分别精密吸取对照品溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL 于10mL 具塞试管中, 各管加水至1mL, 分别在冰水浴中加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL,取出后立即冷却至室温,
3、 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 在最佳测定波长下测定其吸光度。编号100g/mL半乳糖醛酸溶液（ml）蒸馏水（ml）浓度（g/mL）四硼酸钠- 硫酸溶液0.15%咔唑溶液(ml)OD1 OD2 OD3平均值标 1 0 1 0 5 02标 2 01 09 10 5 02标 3 02 08 20 5 02标 4 03 07 30 5 02标 5 04 06 40 5 02标 6 05 05 50 5 02标 7 06 04 60 5 02标 8 07 03 70 5 02标 9 08 02 80 5 02标10 09 01 90 5 02标11 10 0 100 5
4、用漩涡混合器混匀, 于沸水浴中加热20min,022.3样品糖醛酸含量的测定取供试品溶液各1 mL，同时做三个重复, 以空白试剂为参比, 按上述标准曲线的测定法, 分别测定其吸光度值, 计算样品中蛋白质的含量。2蕨麻多糖（1 mg/ml）编号OD1 OD2 OD3 平均值浓度（mg/ml）蛋白含量%硒多糖PAP1-1 1-11-2 1-21-3粗糖1-32-1 1 mg/ml2-2 精糖 05mg/ml3 2004 4005 8006 12007 7000ASP8 ASPJ9 ASPC10 30011 60012 90013 130014 5000白沙蒿15 ASPJ16 ASPc17 S-2
5、（7.4）18 5（6.992）19 10（6.7）20 W-2（6.4）21 正9（5.9）22 黑沙蒿23 粗糖24 精糖25 19（9.9）26 30（8.4）27 25（7.9）328 13（7.3）29 WH1（5.9）30 瓜尔豆胶31 32 33 G31（7.1）34 G32（6.7）35 G25(6)36 G26(5.7)3.1 稳定性实验取同一供试品溶液1 mL, 按下列时间梯度 测定3 次,观测其稳定性, 结果见表。稳定性实验结果时间（min ） 10 20 30 40 50 60 70 80 90 120 150OD1OD2OD3平均值静置时间过长？3.2 精密度实验精密
6、吸取100 g/mL标准溶液 0.5 mL 进行精密度试验, 连续进行 6 次测定其吸光度,时间（min ）1 2 2 3 4 5 6OD3.3重现性实验精密吸取来自同一批原料的试样, 按样品测定方法, 分别测定其吸光度, 检验该测定方法的重现性,表明重复性较好, 样品号 1 2 3 4 5 6 平均值OD1OD2OD3平均值3.4回收率实验精密吸取1mg/mL 供试品溶液0.1mL, 分别加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL 的对照品溶液, 按样品测定方法, 分别测定其吸光度, 计算回收率样品号 0.10 0.2 0.3 0.4 0.5OD14OD2OD3平均值结果标样量mL吸光值 0.10 0.2 0.3 0.4 0.5OD1OD2OD3平均值
