1、Edit your company slogan,分子克隆实验技术,汇 报 人:宋菲菲预防兽医学 200903602,,汇报内容,,基本原理,克隆(clone) 是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆(Molecular Cloning)是在体外对DNA分子按照既定的目的和方案进行人工重组,将重组分子导入到合适的受体细胞中,使其在细胞中扩增和繁殖,以获得DNA分子大量复制,并使受体细胞获得新得遗传特征的过程。基本原理:将编码某一多肽或蛋白质的基因(外源基因)组装到细菌质粒(质粒是细菌染色体外的双链环状DNA分子)中,再将这种质粒(重组质粒)转入大肠杆菌体内,这样重组质粒
2、就随大肠杆菌的增殖而复制,从而表达出外源基因编码的相应多肽或蛋白质。,载体DNA (vector),目的DNA (target fragment),重组DNA (recombinant DNA ),宿主(host),筛选、扩增,克隆(clone),技 术 路 线,DNA 重组,转化,,基因克隆的基本步骤,,粘性末端,质粒,目的基因,粘性末端,匹配的粘性末端,酶切后的目的基因片段,连接后的重组质粒DNA分子,大肠杆菌,染色体,真好玩!,分解抗生素的酶,含抗生素的培养基,还活着!,玩完啦!,大肠杆菌,大肠杆菌,,大量生长,提取大量质粒,酶切鉴定,,应 用,Edit your company slogan,Thank You !,