1、高效液相色谱法测定水中苯并 芘假阳性的解决办法乔素兰（深圳水务集团水质监测站 广东 深圳 518055 ） 摘要 深圳水务集团水质监测站采用高效液相色 谱（HPLC ）法测定水中苯并 芘（BaP ）出现假阳性，通过排除法找到原因，发现是因为前 处理中加入的活化剂国产异丙醇 质量不稳定，改用色 谱纯异丙醇可以解决 HPLC 法测定水中 BaP 假阳性的 问题。关键词 HPLC 苯并 芘 假阳性 解决水中苯并 芘（BaP ）是国家标准规定的检测项目，深圳水务集团水质监测中心测定水中 BaP 一直采用高效液相色谱（HPLC）法，方法灵敏稳定，供水水样大多低于检出限 0.3ng/L，最近的月检（30
2、个水样）检出结果异常高，在 1.1 ng/L4.3ng/L 之间，用纯水做空白也测出了 1.6 ng/L 的假阳性结果。为解决此问题，采用排除法从 HPLC 仪器本身和前处理的各个环节找原因，并提出解决办法。1 原因分析1. 1 HPLC 仪器本身设空白（色谱纯乙腈） 、BaP 标准品0.1ug/L、前处理空白（前处理纯水）和前处理实际水样 C01，结果见表 1。表 1. HPLC 测定水中 BaP 假阳性仪器本身因素排除实验样 品 乙腈空白 BaP标准品前处理纯水空白前处理水样C01平均测定值（n=3 ） 0.3 ug/L0.9 ug/L2.7 ng/L3.3 ng/L由结果可以看出 HPL
3、C 仪器本身没有造成假阳性，方法稳定。1. 2 前处理各环节水中 BaP 前处理采用固相萃取（SPE）法，步骤如下 2：1 升水样，加入50ml 分析纯异丙醇（异丙醇可以使 SPE柱在上样过程中保持活化状态，提高回收率 3） ，过 5ml 甲醇活化的 Waters C18 SPE小柱以富集 BaP，用 10ml 纯水洗柱体，氮气吹干，用5ml 四氢呋喃(色谱纯)分两次洗脱；洗脱液在氮吹仪上吹干，用 1ml 乙腈(色谱纯) 溶解，转入进样瓶后上机测定。根据以往的经验分析造成假阳性几率的大小，首先需排除 SPE 小柱，然后是纯水，最后是活化剂异丙醇。方案及相应结果见表 2 和表 3。表 2 HPL
4、C 测定水中 BaP 假阳性 SPE 柱和纯水因素排除实验样 品本实验室纯水市水质检测中心纯水本站水样C01C18 1.6 1.4 2.8平均测定值（ug/L, n=3）HLB 1.7 1.6 2.9结果显示：不管是本实验室纯水还是外实验室纯水，不管是 C18 还是 HLB 作为SPE 柱，都不是造成 BaP 假阳性的原因。进一步排除活化剂异丙醇，见表 3。表 3 HPLC 测定水中 BaP 假阳性活化剂因素排除实验样 品 纯水 本站水样 C01分析纯异丙醇1.8 2.9平均测定值（ug/L, n=3）色谱纯异丙醇 0.3 0.3结果明确显示：活化剂使用分析纯异丙醇是导致 BaP 假阳性的直接
5、原因。2 解决办法及讨论根据以上的原因分析，造成本实验室近段 BaP 假阳性的原因是活化剂分析纯异丙醇，改用色谱醇异丙醇可以解决此问题。分析纯异丙醇较色谱纯廉价，可以降低成本 3，所以一直使用。为什么之前用分析纯异丙醇作为活化剂没有造成假阳性呢？这可能是因为国产异丙醇质量不稳定，尽管 BaP 不是国产异丙醇的质量指标，但在本实验中却影响很大，也许批号改变或换用其他品牌也可以解决 BaP 假阳性问题，但稳定性差。所以本实验室采取改用色谱纯异丙醇作为前处理的活化剂，HPLC 法测定水中 BaP 假阳性的问题得以解决。参考文献1 生活饮用水卫生标准 GB 57492006 国家标准化管理委员会2 Waters OASIS sample extraction products Environment Agrochemical Applications Notebook 2002,123 自动固相萃取 -高效液相色谱法测定水中痕量多环芳烃 深圳市水务集团科技项目结题报告 P7-13 2003,5作者简介：乔素兰(1969)，女，博士，主要从事环境中有机物分析检测。qiao_ .
