灭生性除草剂草铵膦的作用机理及其应用.pdf

1、 文 章 编 号 : 100223186 (2002) 0420100206收 稿 日 期 : 2002206208 ; 修 订 日 期 : 2002206220作 者 简 介 : 杨 逢 玉 , 中 国 农 业 大 学 植 物 保 护 学 院 , 010 - 62891302灭 生 性 除 草 剂 草 铵 膦 的 作 用 机 理 及 其 应 用杨 逢 玉 , 张 宏 军 , 倪 汉 文(中 国 农 业 大 学 , 北 京 100094)摘 要 : 草 铵 膦 ( Glufosinate) 是 有 机 磷 类 非 传 导 性 灭 生 除 草 剂 , 靶 标 酶 为 谷 氨 酰 胺 合 成 酶(

2、 GS) 。 草 铵 膦 是 继 草 甘 膦 之 后 又 一 性 能 优 良 的 灭 生 性 除 草 剂 , 其 不 但 可 以 灭 生 除 草 , 还 可 以作 为 转 基 因 技 术 研 究 的 筛 选 剂 , 而 且 随 着 转 基 因 抗 草 铵 膦 作 物 的 问 世 , 更 加 拓 展 了 使 用 空 间 。光 强 、 温 度 和 湿 度 等 环 境 因 子 对 其 活 性 有 很 大 影 响 。关 键 词 : 草 铵 膦 ; 灭 生 性 ; 除 草中 图 分 类 号 : S482. 4 + 8 文 献 标 识 码 : A美 国 有 利 来 路 公 司 于 1958 年 (Unir

3、oyal chemical) 发 现 第 一 个 有 机 磷 除 草 剂 即 伐 草 膦(2 , 42DEP , Falone) 。 随 后 , 其 他 农 药 公 司 也 相 继 研 制 出 了 一 些 有 机 磷 类 除 草 剂 品 种 。 草铵 膦 ( Glufosinate) 是 艾 格 福 公 司 开 发 的 有 机 磷 类 非 传 导 性 灭 生 除 草 剂 , 靶 标 酶 为 谷 氨 酰胺 合 成 酶 ( GS) 。 对 其 基 本 特 性 的 总 结 和 研 究 , 为 更 好 利 用 和 开 发 草 铵 膦 的 潜 力 奠 定 基础 。1 草 铵 膦 的 基 本 特 性111

4、 草 铵 膦 的 研 制 与 开 发草 铵 膦 ( Glufosinate) 是 有 机 磷 类 除 草 剂 , 属 灭 生 性 仿 生 茎 叶 处 理 剂 1 。 草 铵 膦 的 研制 与 开 发 是 与 双 丙 氨 膦 密 切 相 关 。 双 丙 氨 膦 是 从 链 霉 菌 ( S t reptom yces hygroscopicus) 发酵 液 中 分 离 提 纯 的 一 种 三 肽 天 然 产 物 , 双 丙 氨 膦 本 身 无 除 草 活 性 , 在 植 物 体 内 降 解 成 具 有除 草 活 性 的 草 铵 膦 。 据 此 , 德 国 艾 格 福 公 司 直 接 合 成 草 铵

5、 膦 ( Glufosinate) , 成 功 开 发 出一 个 新 除 草 剂 品 种 。 草 铵 膦 制 剂 已 被 广 泛 使 用 在 非 耕 地 防 除 多 种 一 年 生 和 多 年 生 禾 本 科 草和 阔 叶 草 2 。112 草 铵 膦 的 杀 草 机 理谷 氨 酰 胺 合 成 酶 在 植 物 的 氮 代 谢 中 起 重 要 作 用 , 它 是 植 物 中 一 个 重 要 的 解 毒 酶 , 其 可以 解 除 由 硝 酸 盐 还 原 、 氨 基 酸 降 解 及 光 呼 吸 中 释 放 出 的 氨 的 毒 性 。 草 铵 膦 的 靶 标 酶 正 是 谷氨 酰 胺 合 成 酶 (

6、GS) 3 5 , 草 铵 膦 抑 制 植 物 GS 的 活 性 , 造 成 植 物 氮 代 谢 失 调 , 必 需 氨 基酸 缺 乏 , 最 终 导 致 细 胞 内 氨 的 含 量 过 量 而 中 毒 , 随 之 叶 绿 素 解 体 , 植 物 死 亡 (见 图1) 6 7 。 喷 施 草 铵 膦 3 5d 后 , 植 株 固 定 CO2的 速 率 迅 速 下 降 , 植 物 叶 片 出 现 枯 黄 和 坏 死第 17 卷 第 4 期2002 年 10 月北 京 农 学 院 学 报JOURNAL OF BEIJ IN G A GRICUL TURAL COLL EGEVol. 17 , No

7、. 4Oct. , 2002的 症 状 8 。 虽 然 草 铵 膦 抑 制 细 菌 、 植 物 及 哺 乳 动 物 的 GS , 但 因 它 不 能 进 入 哺 乳 动 物 的 血液 和 脑 组 织 , 因 此 草 铵 膦 对 哺 乳 动 物 安 全 6 ,9 10 。图 1 草 铵 膦 ( Glufosinate) 对 生 物 氮 代 谢 的 作 用 机 制113 草 铵 膦 的 吸 收 与 传 导草 铵 膦 是 非 选 择 性 茎 叶 处 理 剂 , 传 导 较 差 。 一 般 来 说 , 草 铵 膦 在 植 物 体 内 随 蒸 腾 流 在木 质 部 运 输 11 , 但 是 在 一 些

8、植 物 体 内 ,14 C2草 铵 膦 也 可 以 由 韧 皮 部 运 输 到 根 的 分 生 组 织 。研 究 还 发 现 杂 草 对 草 铵 膦 的 敏 感 性 与 草 铵 膦 在 韧 皮 部 内 传 导 的 速 率 密 切 相 关 12 。 Steckel等 人 (1997b) 报 道 , 草 铵 膦 处 理 狗 尾 草 、 稗 草 、 苘 麻 和 藜 24h 后 , 对 草 铵 膦 的 吸 收 依 次是 67 %、 53 %、 42 %、 16 %。 用 14C2同 位 素 示 踪 法 检 测 这 4 种 杂 草 对 草 铵 膦 传 导 性 , 处 理狗 尾 草 12h 后 , 对 草

9、 铵 膦 运 输 达 到 26 % ; 处 理 稗 草 24h 后 , 对 草 铵 膦 运 输 达 到 14 %。 经研 究 发 现 , 处 理 叶 片 将 所 吸 收 的 草 铵 膦 向 根 部 运 输 , 这 就 说 明 狗 尾 草 和 稗 草 对 草 铵 膦 的 运输 是 经 韧 皮 部 进 行 的 13 。114 草 铵 膦 的 代 谢最 早 研 究 草 铵 膦 在 土 壤 中 的 代 谢 是 Tebbe 和 Reber (1988 , 1991) 14 15 , 随 后 Smith(1988 , 1989) 16 17 也 进 行 了 研 究 。 草 铵 膦 在 土 壤 中 降 解

10、很 快 , 半 衰 期 短 , 其 土 壤 活 性 很低 。 草 铵 膦 在 土 壤 中 一 般 被 降 解 为 42甲 基 磷 酸 亚 基 222氧 代 丁 酸 ( PPO) 和 32甲 基 磷 酸 亚基 2丙 酸 (MPP) 。2 环 境 因 子 对 草 铵 膦 活 性 的 影 响除 草 剂 的 药 效 受 环 境 因 子 的 影 响 很 大 18 19 , 已 有 报 道 证 明 , 水 分 和 温 度 等 对 草 铵 膦活 性 有 很 大 影 响 。211 温 度在 一 定 温 度 条 件 下 , 可 以 改 善 苗 后 除 草 剂 除 草 的 效 果 , McWhorter (198

11、0) 20 发 现 当温 度 由 24 增 加 到 35 时 , 草 铵 膦 对 假 高 粱 的 防 效 增 加 ; 在 较 低 温 度 情 况 下 , 草 铵 膦 对狗 尾 草 和 大 麦 的 防 效 降 低 12 21 。 温 度 在 12 24 之 间 , 草 铵 膦 对 猪 殃 殃 的 防 效 较 理 想 ,但 在 低 温 情 况 下 , 防 效 会 降 低 。212 水 分在 空 气 湿 度 40 % , 温 度 22/ 17 情 况 下 , 01100kg/ hm2 (有 效 量 ) 的 草 铵 膦 无 法 杀 死2002 年 第 四 期 杨 逢 玉 等 : 灭 生 性 除 草 剂

12、 草 铵 膦 的 作 用 机 理 及 其 应 用 101 狗 尾 草 。 同 样 条 件 下 , 空 气 湿 度 达 到 95 %时 , 草 铵 膦 就 可 以 彻 底 杀 死 狗 尾 草 21 。 Coetzer等 人 (2001) 研 究 发 现 , 环 境 因 子 可 以 影 响 杂 草 对 草 铵 膦 的 吸 收 , 通 过 对 苋 属 杂 草 帕 麦 尔苋 、 反 枝 苋 的 研 究 发 现 , 空 气 湿 度 对 草 铵 膦 药 效 的 作 用 要 显 著 于 温 度 的 作 用 23 。空 气 湿 度 较 高 可 提 高 杂 草 对 药 剂 的 吸 收 与 传 导 21 , 这

13、是 因 为 在 这 种 条 件 下 , 植 株 表皮 是 亲 水 性 的 19 , 可 以 延 长 药 液 浸 润 叶 片 的 时 间 24 , 所 以 水 溶 性 除 草 剂 , 如 草 铵 膦 就 很容 易 进 入 到 叶 片 中 。 如 果 在 湿 度 较 低 的 情 况 下 , 表 皮 干 燥 , 植 株 气 孔 关 闭 , 其 对 草 铵 膦 的吸 收 明 显 减 少 22 。土 壤 含 水 量 也 会 影 响 茎 叶 处 理 剂 的 吸 收 与 传 导 , 已 有 报 道 证 明 , 土 壤 湿 度 很 低 的 情 况下 , 苗 后 茎 叶 处 理 剂 的 药 效 降 低 25 2

14、7 。 在 干 旱 胁 迫 下 , 植 物 叶 片 卷 曲 , 叶 片 表 皮 增 厚 ,从 而 降 低 了 对 除 草 剂 的 吸 收 。 干 旱 条 件 下 , 植 物 细 胞 内 水 分 流 动 和 细 胞 间 的 渗 透 能 力 降低 , 药 液 传 导 能 力 下 降 19 。经 研 究 发 现 , 湿 度 和 光 强 对 草 铵 膦 药 效 的 影 响 要 显 著 大 于 温 度 。 在 高 温 、 高 湿 和 高 光强 的 条 件 下 , 草 铵 膦 作 用 下 , 植 株 体 内 氨 积 累 速 度 加 快 , 植 物 死 亡 的 速 度 也 快 28 。3 草 铵 膦 的 应

15、 用 前 景311 灭 生 性 除 草草 铵 膦 具 有 活 性 高 , 吸 收 好 , 杀 草 谱 广 , 低 毒 , 环 境 兼 容 性 好 等 特 点 , 大 量 的 文 献 表明 01400kg/ hm2 就 可 很 好 的 防 除 一 年 生 杂 草 , 较 高 剂 量 可 防 除 多 年 生 杂 草 。 0130001500 kg/ hm2 的 草 铵 膦 就 可 防 除 野 燕 麦 、 雀 麦 、 早 熟 禾 、 辣 子 草 、 宝 盖 草 、 小 野 芝 麻 、龙 葵 、 繁 缕 、 田 野 勿 忘 草 等 。 01500 01600 kg/ hm2 的 草 铵 膦 可 防 除

16、 鼠 尾 看 麦 娘 、 马 唐 、稗 草 、 野 大 麦 、 多 花 黑 麦 草 、 狗 尾 草 、 金 狗 尾 草 、 野 小 麦 、 野 玉 米 , 多 年 生 禾 本 科 和 莎 草科 杂 草 , 如 : 野 茅 、 曲 艺 发 草 、 羊 茅 、 绒 毛 草 、 黑 麦 草 、 双 穗 雀 稗 、 芦 苇 、 早 熟 禾 ;01700 11000 kg/ hm2 可 防 除 匍 匐 冰 草 、 匍 匐 翦 股 颖 、 拂 子 茅 、 苔 草 、 狗 牙 根 、 反 枝 苋等 。312 转 基 因 研 究 的 筛 选 剂获 得 有 用 的 目 的 基 因 是 基 因 工 程 的 基 本

17、 前 提 。 目 前 用 于 作 物 的 外 源 基 因 , 已 从 早 期 用来 检 测 的 报 告 基 因 , 如 : cat 、 nos、 npt 等 , 转 向 具 有 应 用 价 值 的 基 因 , 包 括 抗 除 草 剂 基因 , 抗 虫 基 因 、 抗 病 基 因 、 抗 逆 基 因 及 改 良 作 物 品 质 的 种 子 贮 藏 蛋 白 基 因 等 29 。有 效 的 识 别 转 化 基 因 是 基 因 操 作 的 一 个 关 键 步 骤 。 大 多 数 转 基 因 作 物 中 常 用 的 筛 选 标记 主 要 为 抗 性 基 因 。 在 选 择 压 力 存 在 的 条 件 下

18、 , 抗 性 基 因 在 受 体 细 胞 内 的 表 达 有 利 于 从 大量 的 非 转 化 细 胞 中 筛 选 出 转 化 克 隆 。 来 源 于 大 肠 杆 菌 的 npt 基 因 , 可 编 码 卡 那 霉 素( Kanamycin) 、 新 霉 素 (Neomycin) 的 抗 性 产 物 , 被 广 泛 用 于 转 化 体 的 筛 选 。 但 有 些 作 物对 卡 那 霉 素 有 较 高 的 天 然 的 抗 性 , 而 G41830 、 巴 龙 霉 素 ( Paromycin) 31 做 筛 选 试 剂 可 克服 这 一 缺 点 。 hpt 基 因 可 赋 予 细 胞 潮 霉 素

19、(hygromycin) 抗 性 , 是 水 稻 和 玉 米 转 化 中 理 想的 筛 选 标 记 32 33 。 除 草 剂 抗 性 基 因 筛 选 作 用 明 显 , 检 测 方 法 灵 敏 , 越 来 越 受 到 人 们 的 青睐 。 bar 基 因 是 其 中 的 代 表 , 目 前 吸 水 链 霉 菌 ( S t reptom yces hygroscopicus) 的 bar 基 因 被普 遍 用 作 水 稻 中 的 选 择 标 志 基 因 , 该 基 因 编 码 膦 丝 菌 素 乙 酰 转 移 酶 ( PA T) 提 供 对 除 草 剂(草 铵 膦 和 双 丙 氨 膦 ) 的 抗

20、 性 34 35 , 作 为 筛 选 标 记 的 同 时 又 赋 予 转 基 因 植 株 农 业 上 的 有102 北 京 农 学 院 学 报 第 17 卷用 性 状 , 还 有 报 道 认 为 bar 基 因 的 插 入 表 达 有 助 于 提 高 分 化 频 率 。313 抗 草 铵 膦 转 基 因 作 物抗 草 铵 膦 的 基 因 是 一 种 来 自 土 壤 细 菌 吸 水 链 霉 菌 ( S t reptom yces hygroscopicus) 的 bar基 因 36 37 , 另 一 种 来 自 S 1 vi ri dochromogenes 的 pat 基 因 38 。 德 国

21、 学 者 用 化 学 合 成 法 合成 了 bar 基 因 。 Bar 基 因 为 615bp , 编 码 的 草 铵 膦 乙 酰 转 移 酶 ( PA T) , 其 由 183 个 氨 基 酸组 成 , pat 基 因 为 1312bp , 编 码 的 PA T 在 pat 基 因 的 Bg/ - Sst 片 段 上 , 两 种 基 因 的 产物 有 相 似 的 催 化 能 力 , 氨 基 酸 序 列 86 %同 源 。 bar 基 因 作 为 草 铵 膦 的 抗 性 机 理 在 于 , bar基 因 编 码 的 PA T 使 草 铵 膦 的 自 由 氨 基 乙 酰 化 从 而 对 草 铵

22、膦 解 毒 。通 过 PEG法 、 微 弹 轰 击 法 、 电 激 法 及 Ri 双 元 载 体 质 粒 将 bar 和 pat 基 因 导 入 烟 草 、马 铃 薯 、 番 茄 、 颠 茄 、 水 稻 、 小 麦 、 玉 米 、 甘 蔗 等 20 多 种 作 物 中 , 这 些 转 基 因 植 株 对 草铵 膦 、 双 丙 氨 膦 的 抗 性 超 过 正 常 用 量 的 4 15 倍 。 这 种 转 基 因 技 术 所 培 育 出 来 的 品 种 , 为控 制 一 些 抗 性 杂 草 提 供 了 一 条 很 好 的 途 径 39 40 。大 量 研 究 报 道 表 明 , 高 剂 量 的 草

23、 铵 膦 对 转 基 因 抗 性 作 物 有 一 定 的 伤 害 , 但 伤 害 很 轻 ,对 抗 性 作 物 的 产 量 无 显 著 的 影 响 。 抗 草 铵 膦 作 物 安 全 剂 量 (有 效 量 ) 范 围 在 210kg/ hm2以 上 , 而 (有 效 量 ) 014 015kg/ h2 的 草 铵 膦 就 可 防 除 大 部 分 的 杂 草 41 47 。4 结 语由 于 转 基 因 技 术 的 应 用 , 成 功 培 育 出 抗 草 铵 膦 作 物 , 使 草 铵 膦 用 于 作 物 田 除 草 成 为 可能 。 草 铵 膦 具 有 活 性 高 , 吸 收 好 , 杀 草 谱

24、 广 , 低 毒 , 环 境 兼 容 性 好 等 特 点 , 所 以 草 铵 膦 具有 广 阔 的 使 用 前 景 。 虽 然 草 铵 膦 具 有 这 么 多 优 点 , 但 草 铵 膦 成 本 高 , 对 某 些 杂 草 防 效 不 好等 制 约 其 推 广 和 使 用 , 所 以 研 究 草 铵 膦 的 合 成 路 线 , 降 低 其 生 产 成 本 , 添 加 某 些 农 化 物质 , 在 保 证 草 铵 膦 除 草 活 性 的 同 时 , 降 低 其 田 间 用 量 现 已 成 为 研 究 的 热 点 。参 考 文 献 : 1 Schwerdtle F , H Bieringer an

25、d M Finke1Hoe 39866 ein neues nicht selektives Blatterbizid1Zeitschrift fuiPflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz , Sonderheft IX , 431 4401 Ahrens W1H1 , ed1 19941 Herbicide Hand2book1 7th ed1 Champaign , IL : Weed Science Society of America , 1981 2 Ahren W H , ed1 Herbicide Handbook1 7th ed1 Cham

26、paign , IL : Weed Science Society of America , 1994 3 Bayer E , K H Gugel , K Kagele , H Hagenmaier , S Jessipow , W A Konig and H Zahner1 Stoffwecheselprodukte vonmikroorganismen1 981 Mitteilung 1 1 Phosphinothricin und phosphinothricylalan - ylanin1 Helv1 Chim1 Acta ,1972 , 55 : 2242239 4 Lea P J

27、, K W Joy , J L Ramos and M G Guerrero1 The action of the 2 - amino - 4 - (methylpho sphinyl) - butanoicacid (phosphinothricin) and its 2 - oxo - derivative on the metabolism of cyanobacteria and higher plants1 Phytochem2istry , 1984 , 23 : 126 5 Bellinder R R , K K Hatzions and H P Wilson1 Mode of

28、action investigations with the herbicides HOE - 39866 and SC- 02241 Weed Sci , 1985 , 33 : 7792785 6 Tachibana K , T Watanaba1 Y Seikizawa and T Takematsu1 Accumulation of ammonia in plants treated with bialaphos1Pestic1 Sci1 , 1986 , 11 : 33237 7 Bellinder R R , R E Lyons , S E Scheckler and H P Wi

29、lson1 Cellular alterations resulting from foliar applications of HOE- 398661 Weed Sci1 , 1987 , 35 : 272352002 年 第 四 期 杨 逢 玉 等 : 灭 生 性 除 草 剂 草 铵 膦 的 作 用 机 理 及 其 应 用 103 8 Miliszkiewics D , P Wieczorek , B Lejczak , E Kowalik and P Kafarski1 Herbicidal actitivity of phosphonic and phos2phinic acid an

30、alogues of glutamic and aspartic acids1 Pestic Sci1 , 1992 , 34 : 3492354 9 贾 士 荣 1 转 基 因 植 物 食 品 中 标 记 基 因 的 安 全 性 评 价 1 中 国 农 业 科 学 , 1997 , 30 (2) : 1215 10 苏 少 泉 1 除 草 剂 作 用 机 制 的 生 物 化 学 与 生 物 技 术 的 应 用 1 生 物 工 程 进 展 , 1993 , 14 (2) : 30234 11 Anderson D M , C J Swanton , J C Hall and B G Merse

31、y1 The influence of soil moisture , simulated rainfall and time ofapplication on the efficacy of glufosinate - ammonium1 Weed Research , 1993a , 33 : 1492160 12 Mersey B G , J C Hall D M Anderson and C J Swanton1 Factors affecting the herbicidal activity of glufosinate2ammoni2um : absorption , trans

32、lacation and metabolism in barley and green foxtail1 Pesticide Biochemistry and Physiology ,1990 , 37 : 90298 13 Steckel G J , S E Hart and L M Wax1 Absorption and translocation of glufosinate on four weed species1 Weed Science ,1997b , 45 : 378238114 Tebbe C C and H H Reber1 Utilization of the herb

33、icide phosphinothricin as a nitrogen sourdce by soil bacteria1 ApplMicrobiol Biotechnol , 1988 , 29 : 1032105 15 Tebbe C C and H H Reber1 Degradation of 14C phosphinothricin (glufosinate) in soil under laboratory conditions : ef2fects of concentration and soil amendments on 14CO2 production1 Biol Fe

34、rtil Soils , 1991 , 11 : 62267 16 Smith A E1 Persistence and transformation of the herbicide 14C - glufosinate - ammonium in prairie soils under laboratoryconditions1 Agric Food Chem , 1988 , 36 : 3932397 17 Smith A E1 Transformation of the herbicide 14C - glufosinate in soils1 Agric Food Chem , 198

35、9 , 37 : 2672271 18 Gerber H R , A Nyfeller and D H Green1 The influence of rainfall , temperature , humidty and light on soil - and foliar- applied herbicide1 Pages 1 - 14 in J1C1 Caseley , ed1 Aspects of Apllied Biology 41 Influence of Environmental Fac2tors on Herbicide Performance and Crop and W

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37、20 McWhorter C G1 Translocation of 14C - glyphosate in soybean ( Glycine max) and johnsongrass ( Sorgbum balepense)1 Weed Sci , 1980 , 28 : 1132118 21 Anderson D M , C J Swanton , J C Hall and B G Mersey1 The influence of temperature and relative humidity on the ef2ficacy of glufosinate - ammonium1W

38、eed Research , 1993b , 33 : 1392147 22 Nalewaja J D and Z Woznica1 Environment and chlorsulfuron phytotoxicity1 Weed Science , 1985 , 22 : 3952399 23 Coetzer E , A Kassim and M L Thomas1 Glufosinate efficacy , absorption , and translocation in amaranth as affected byrelative humidity and temperature

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40、r stress1 Weed Science , 1988 , 36 :3052312 26 Reynolds D B , T G Wheless , E Basler and D S Murray1 Moisture stress effects on absorption and translocation of fourfoliar - applied herbicide1 Weed Technology , 1988 , 2 : 437244127 Boydston R A1 Soil water content affects the activity of four herbici

41、des on green foxtail ( Setaria viridis) 1 Weed Sci2ence , 1990 , 38 : 578258228 Petersen J and K Hurle1 Influence of climatic conditions and plant physiology on glufosinate - ammonium efficacy1Weed Research , 2001 , 41 : 31239 29 郭 殿 京 , 张 丽 明 , 孙 勇 如 1 禾 谷 类 作 物 基 因 工 程 新 进 展 1 农 业 生 物 技 术 学 报 , 19

42、97 , 5 (4) : 360 365 30 Nehra N S et al1 Self - fertiletransgenic wheat plants regenerated from isolated scutellar tissues following microprojectilebombardment with distinc gene constructs1 Plant J , 1994 , 5 (2) : 2852297 31 Torbert K A et al1 Use of paromomycinasa selective agent for oat transform

43、ation1 Plant Cell Rep , 1995 , 14 : 6352639 32 Kurata N et al1 Conservation of genome structure between rice and wheat1 Bio/ Tech , 1994 , 12 : 2762278104 北 京 农 学 院 学 报 第 17 卷 33 Vasil I K , et al1 Rapid production of transgenic wheat plants by direct bombardment of culture dimma - tureembryos1Bio/

44、Tech , 1993 , 11 : 155321555 34 Datta M R , K Datta , et al1 Herbicide - resistant indica rice plant from IRRI breeding line IR72 after PEG - mediatedtransformation of protoplasts1 Plant Molecurlar Biology , 1992 , 20 : 6192629 35 Rathore K S , V K Chowdhury and T K Hodges1 Use of bar as selectable

45、marker gene and for the production of herbi2cide - resistant rice plants from protoplasts1 Plant Molecular Biology , 1993 , 21 : 8712884 36 Thompson C J1 Characterization of the herbicide resistance gene bar from Streptomyces hygroscopicus1 EMBO J 1987 ,(6) : 25192252337 White J1 A Cassette containi

46、ng the bar gene of Streptomyces hygroscopicus : aselectable Marker for plant transforma2tion1 Nucleic Acid Res , 1990 , (18) : 106238 Wohlleben W1 Nuclotide Sequence of Phosphinothricin - N - acetyltranferase gene from Streptomyces Viridochro2mogenes Tue H94 ard its expression in Nicotiana tabacum1

47、Gene , 1998 , (70) : 25237 39 Derksen D A , K N Harker and R E Blackshaw1 Herbicide tolerant crops and weed population dynamics in westernCanada11999 Brighton conference : Weeds1Volume 21Proceedings of an international conference1Brighton , U K , 15- 18 November , 1999 , 4172424 40 Marshall G1 Herbi

48、cide - tolerant crops real farmer opportunity or potential environment problem1 transgenic crops : newperspectives in crop protection1 Conference held in London , Uk on 11 March 19971 Pesticide - Science , 1998 , 52 :3942402 41 Kransz R F , G Kapusta , J L Matthews , J L Baldwin and J Maschaff1 Evaluation of Glufosinate - resistance corn ( Zeamays ) and Glufosinate : efficacy on annual weeds1 Weed Technology , 1999 , 13 (4) : 6912696 42 Read M A and J G Ball1 The control of weeds with glufosinate ammonium in genetically modified crops of forage