1、课程名称 细胞工程实验论文设计 题 目 月季植物组织培养 学生姓名 刘会淼 专业班级 武昌理工学院生科院生工 1001 班 学 号 20104787028 指导教师 代建丽 2013 年 1 月 5 日 月季植物组培技术 研究意义：月季的学名为Rosa chznenszs Jacg. 是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一 共可作地栽或盆栽观赏 月季是重要的花卉 世界的销售额多年来稳居各类花卉的第一或第二 月季属蔷薇科蔷薇属 姿优美 花型丰富 花色齐备 月季的花色可编制成完美的连续色谱 月季的一大优点是分布极广 适应性良好 栽培容易 月季是四季常青花卉 花期长 花色多 芳香馥郁 既适合园林和路
2、带绿化 也宜于盆栽美化庭院居室 特别是月季切花品种插瓶配制花篮 花束 月季花色范围宽 树型易修剪 栽培难度小 其花型大 美丽 幽雅 高贵 在鲜花应用中月季花的地位和比重与日俱增。 研究背景：月季原产我国 早在汉代就有历史记载 200 年前 月季植入西方和各国的蔷薇结缘 繁育成千上万新月季品种 现代月季( 分为茶香月季HT 聚花月季F 壮花月季Gr 攀缘月季CL 微型月季Min以及中国月季Ch 等9 大系 ) 也随之推广到除热带和寒带外的世界各地 目前世界各地广为栽培的月季 是以中国月季为主要亲本 经以长期杂交育种而选育成功的 月季在观赏植物中的地位是很高的 全世界各国人民都普遍喜爱月季 月季的
3、销售额多年来稳居各类花木的前茅 月季的用途很广( 如用藤本月季布置长廊 拱门; 树状月季装饰主干道等) 国外月季花卉工厂化育苗开展较早 在某些国家和地区已成为获得巨额外汇的支柱产业 我们国家月季的组织培养技术与国外相比差距不大 但是产业化起步较晚 在加快科学技术转化为生产力的今天 植物组培技术广泛应用于月季花卉的繁殖育种 必将取得巨大的经济效益 社会效益和生态效益 月季生长繁殖速度较慢 应用组织培养技术可大大缩短它的增殖周期 快速繁殖优良品种 在短期内繁殖出数以万计的苗木 这些苗木的遗传特性和表型特性与母株完全相同 完全保持了母株的优良特性 月季花组培繁殖可以周年生产 不受季节限制并且耐贮藏不
4、易烂苗 可脱离培养基长途运输 实现了苗木运输 微型化 本文研究了月季组织培养中茎段外植体的选择 比较分析了不同种类 浓度的植物激素配比对茎段快繁的影响 试图找出月季快繁的最适培养基配方 为完善组培快繁技术 大规模工 实验设计：I 材料与方法1. 1 材料从哈尔滨市的花卉市场购得的切花月季1. 2 方法1. 2. 1 最适消毒方法的选取从盆载的植株上 选取健壮的当年生枝条 用饱满而未萌发的侧芽作为外植体 侧芽又以枝条中段的为好 枝条去叶 剥去附在茎上的叶柄及皮刺 然后切成小段 每段长2-3 cm 每段至少带有一个侧芽 把它们用水洗净， 用滤纸吸干。 在无菌条件下用75%的酒精消毒30 S，再用0
5、. 20%的升汞消毒10min最后用无菌水冲洗5-7 遍， 在超净工作台上把它们接种于不同的芽分化培养基上。 1. 2. 2 操作方法通常中部在接种后的第5 d 左右芽就萌发 而基部和梢部的芽往往迟至11-13 d 才萌发。 从芽萌发到芽长到1 cm 左右需要2-3 周。因为盆栽月季花的侧芽有限 所以还选取了月季花的叶片， 不带腋芽的嫩茎，枝条以及花瓣作为外植体， 用于诱导愈伤。以MS 为基本培养基 蔗糖3%-5% 琼脂0. 90% 附加不同的激素( 表1) 。诱导芽分化后 进行继代培养 使其不断的增殖 增殖量达到一定程度后， 把 丛生 芽切下转入到MS+6-BA0. 30 mg/ L+ NA
6、A0. 30mg/ L的培养基上，让小芽生长。待苗高3-4cm 时切下小苗， 再转移到生根培养基上( 表6) 。1. 3 培养基1. 3. 1 诱导芽分化培养基( 表1) 1. 3. 2 分化培养基MS+ 6-BA 0. 30 mg/ L+NAA0. 30 mg/ L 1. 3. 3 诱导愈伤培养基为了充分利用外植体，不受长芽与否的限制， 采取了诱导愈伤的办法进行培养G 由于诱导愈伤的方法与诱导芽分化的方法只是诱导的途径不同， 所以诱导愈伤均以MS 为基本培养基并加入不同激素（表2）。 表2 诱导愈伤培养基的附加激素( 单位:mg/L ) 2. 2 芽在茎段上的位置对生长的影响培养时将月季枝条
7、均匀的分成7 段( 含腋芽)将其放于含有不同激素的培养基上 经过一段时间的培养 含不同激素的培养基上茎段的生长表现不同的趋势 顶端和基部的芽萌发生长较慢 需11-13 d 而中部的芽萌发较快 需5 d ( 见图) 2. 3 愈伤的诱导结果表明 诱导芽分化培养基与诱导愈伤培养基接种茎段的个数相同 但明显后者的诱导率优于前的诱导率。 月季的叶片和花瓣不宜诱导出愈伤组织， 而不带腋芽的嫩茎和枝条诱导出的愈伤效果良好。 NAA 诱导月季茎段出芽的效果明显优于IAA 和IBA。 在本试验中 使用0. 10-1. 00 mg/L的NAA 浓度， 能达到较高的萌动出芽率。 2. 4 生根培养月季嫩芽长到一定
8、长度时， 接种到1/ 2MS+IBA 和1/ 2MS+NAA 两种生根培养基上O 经20 d培养后 1/ 2MS+IBA 培养基生根率达75. 30% 每株发根1 -3 根 1/ 2MS + NAA 培养基附加NAA0. 10- 1. 50 均可诱导不定根的产生 生根率在63. 30%- 96. 70% 且附加NAA 浓度为0. 50mg/L的效果最佳 根系生长良好。 其生根率为96. 70% ( 表6) O 生根试验表明， 低浓度的生长素有利根的形成 ，适当浓度的IBA、 NAA 对生根率有显著影响 浓度过高会抑制根的形成 只有选择0. 10-1. 50 mg/L的生长素浓度才能有效地促进根
9、的形成 ，加速苗的生长。1. 3. 4 诱导生根培养基参考了有关文献生根培养基的基本成份为1/2MS 向其中分别加入NAA 和IBA 两种激素诱导生根.NAA 的浓度为0. 10-1. 50 mg/ L 共设置了8 个浓度梯度,而IBA 的浓度为0. 0-1. 50 mg/L共设置了7 个浓度梯度. 2.预期结果与讨论：2. 1 侧芽诱导分化结果将月季的茎段接种在加入不同激素的培养基上, 7 d 后侧芽开始膨大, 10 d 左右分化芽逐渐形成幼苗。 从（表3） 可见以MS+ 6-BA2. 00 mg/L+NAA0. 50 mg/L培养基上的分化率较高. 说明6-BA 浓度较高时易诱导侧芽分化。
10、 在6-BA2. 00mg/L的浓度水平下, 不仅外植体腋芽萌动率高而且形成丛芽的比例较大,被认为是腋芽诱导较适宜的浓度G 增加适量NAA 有利离体侧芽分化 但浓度过高仅导大量愈伤组织,不利于侧芽的直接分化和生长。因此， 适宜月季侧芽分化的培养基为MS+6-BA2.00mg/L+NAA0. 01-1. 00 mg/L。 试验结果表明 随着6-BA 浓度的增加 芽的长度逐渐下降 芽的玻璃化现象也有逐渐加重的趋势( 表4) 。 生芽试验表明 具有细胞分裂素活性的6-BA 可有效地诱导芽的萌发， 一定的生长素与细胞分裂素进行适当的配比， 对月季器官的分化有很大的影响。 因此， 对芽长势较适宜的培养基
11、配方为:MS+6-BA2. 00 mg/L+NAA0. 10 mg/L。 3 结论3. 1 月季诱导培养基以MS+ 6 BA2. 00 mg /L1+NAA 0. 50 mg/L较好3. 2 诱导愈伤的最佳培养基为MS+ 6 BA2. 00mg/L+NAA0. 50 mg/L3. 3 生根培养基以1/ 2MS+IBA 0. 50 mg/L和1/ 2MS+NAA 0. 50 mg/L较好参考文献1. 何松林 朱道圩 任凝辉 等. 切花月季萨曼沙组织培养微繁的研究. 华北农学报 1996 11( 3) : 117-120. 2 毕艳娟 高书国 乔亚科. 植物生长调节剂对丰花月季茎段培养的影响 河北
12、农业技术师范学院学报 1994 8( 3) : 26-29. 3毕艳娟 高书国 乔亚科 等. 植物生长调节对月季组培萌芽和成芽的影响 . 河北农业技术师范学院学199612( 10) :37-40.4 浓润权 朴日子 曹后男. 月季试管苗快速繁殖和移栽. 延边农学院学报 1995 ( 17) : 33-36.5李师翁. 名贵月季品种微繁及工艺研究. 生物技术 1994( 4) : 19-23.6吕汰 斐建文 王娟. 丰花月季的组培快繁技术., 甘肃农业科技 2000 ( 2) : 44-45.7杨水花 朱亚东. 丰花月季组培快繁技术研究初报 ,甘肃农业科技 2000 ( 5) : 45-46.8张焱如 张艳君. 月季的茎段培养与快繁 . 内蒙古农业科技 2000 ( 5) : 9-10.
