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单光束分光光度计.doc

1、. 单光束分光光度计其光路示意图如下图所示,经单色器分光后的一束平行光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单,操作方便,维修容易,适用于常规分析。国产 722 型、751 型、724 型、英国 SP500 型以及 Backman DU8 型等均属于此类光度计。2. 双光束分光光度计 其光路示意于下图。光源发出光经单色器分光后,经反射镜(M1)分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,另一束通过样品池,光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两

2、束光同时分别通过参比池和样品池,因而能自动消除光源强度变化所引起的误差。这类仪器有国产 710 型、730 型、740 型等。3. 双波长分光光度计 其基本光路如下图所示。由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长(1 和 2)的单色光;利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池,然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液) 分析,以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下,利用双波长分光光度法,往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计,能获得导数光谱。通过光学系统转换,使双波长

3、分光光度计能很方便的转化为单波长工作方式。如果能在 1 和 2 处分别记录吸光度随时间变化的曲线,还能进行化学反应动力学研究。1,单光束分光光度计经单色器分光后的一束平行光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单,操作方便,维修容易,适用于常规分析。2,双光束分光光度计经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池,还能自动消除光源强度变化所引起的误差。3. 双波长分光光度计由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长 1 和 2 的单色光;利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池,然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析,以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下,利用双波长分光光度法,往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计,能获得导数光谱。

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