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粪肠球菌对多 形核 白细胞释放基质金属蛋白酶 8及凋亡影.doc

1、粪肠球菌对多形核白细胞释放基质金属蛋白酶 8及凋亡影【摘要】目的体外研究粪肠球菌对多形核白细胞(PMNs)释放基质金属蛋白酶-8(MMP-8)及凋亡的影响。方法提取PMNs,以加入粪肠球菌悬浮液的PMNs作为实验组;加入乙酸肉豆蔻佛波醇的 PMNs为阳性对照组;PMNs的PBS悬浮液为阴性对照组。培养0、20、60、120min后,ELISA法检测各时间点 MMP-8的释放量。以加入粪肠球菌裂解液的PMNs为实验组,PMNs的PBS悬浮液为对照组,培养 2、5、10、15h后,流式细胞分析仪检测PMNs 的凋亡率。结果在 0min时,实验组和阳性对照组 MMP-8释放量间差异无统计学意义(P0

2、.01);在60、120min时,代写代发医学论文专业写作医学论文,医学职称论文,医学毕业论文,医学课题申请等官方网站地址:-电话:13296551955QQ:273322232E-mail:实验组MMP-8的释放量明显低于阳性对照组,二者间差异有统计学意义(P0.01);whereasat60,120min,E.faecalisinducedasignificantlowerMMP-8releasecomparedwiththepositivecontrol(P0.01)。0min时,实验组和阳性对照组MMP-8释放量间差异无统计学意义(P0.01),60、120min时,实验组MMP-8的

3、释放量明显低于阳性对照组,二者间差异有统计学意义(P0.01)。60、120min时,实验组MMP-8的释放量明显低于阳性对照组,二者间差异有统计学意义(P0.01)。此现象提示PMNs在与粪肠球菌反应的过程中,防御性蛋白酶MMP-8的释放量很低。其可能原因为PMNs通过吞噬作用杀灭细菌,导致PMNs的活性降低或PMNs快速凋亡,水解酶的释放量相应降低。PMNs凋亡率检测组的作用时间分别为2、5、10、15h,为降低细菌在此期间扩增产生的干扰影响,以及更好地反映粪肠球菌毒力因子的作用效果,采用粪肠球菌裂解液。裂解液作用于PMNs后,凋亡率检测结果显示,随着时间的增加,实验组与对照组中的PMNs

4、凋亡率均呈逐渐增高趋势。实验组在各个检测时间点的凋亡率均高于对照组(P0.01),进一步证实粪肠球菌能够避免其他微生物如牙龈卟啉单胞菌所能导致的延缓PMNs凋亡直至坏死,并释放胞内的前炎症介质和毒性产物,进而造成局部组织内炎症细胞堆积和刺激炎性反应的现象。这可以解释临床经常观察到的再次感染的病例中急性炎症表现的很少,粪肠球菌似乎在根管中引起或维持慢性感染,但很少伴随急性根管感染。本实验显示粪肠球菌能够介导PMNs提前凋亡,从而影响其吞噬、杀灭病原体等免疫防御作用。PMNs是机体重要的防御屏障,它的受损或病理性凋亡延迟会使原本不会致病的微生物造成机会性感染,甚至局部或全身急性重症炎症。然而在口腔

5、微生态系中有多种细菌和其他微生物,它们相互依存、相互制约,孤立的致病菌所引发的组织损伤能否适用于复杂的口腔微生物群尚有待进一步研究。【参考文献】1MolanderA,ReitC,DahlnG,etal.Microbiologicalstatusofroot-filledteethwithapicalperiodontitisJ.IntEndodJ,1998,31(1):1-7.2PeciulieneV,ReynaudAH,BalciunieneI,etal.Isolationofyeastsandentericbacteriainroot-filledteethwithchronicapica

6、lperiodontitisJ.IntEndodJ,2001,34(6):429-434.3FerrariPH,CaiS,BombanaAC.Effectofendodonticproceduresonenterococci,entericbacteriaandyeastsinprimaryendodonticinfectionsJ.IntEndodJ,2005,38(6):372-380.4SundqvistG,FigdorD,PerssonS,etal.Microbiologicanalysisofteethwithfailedendodontictreatmentandtheoutcom

7、eofconservativere-treatmentJ.OralSurgOralMedOralPatholOralRadiolEndod,1998,85(1):86-93.5LoveRM.Enterococcusfaecalis-amechanismforitsroleinen-dodonticfailureJ.IntEndodJ,2001,34(5):399-405.6SassoneL,FidelR,FigueiredoL,etal.Evaluationofthemicro-biotaofprimaryendodonticinfectionsusingcheckerboardDNA-DNA

8、hybridizationJ.OralMicrobiolImmunol,2007,22(6):390-397.7JacintoRC,GomesBP,DesaiM,etal.Bacterialexaminationofendodonticinfectionsbyclonalanalysisinconcertwithdena-turinghigh-performanceliquidchromatographyJ.OralMicrobiolImmunol,2007,22(6):403-410.8SiqueiraJFJr,R?抵?觭asIN,SantosSR,etal.Efficacyofinstru

9、-mentationtechniquesandirrigationregimensinreducingthebacterialpopulationwithinrootcanalsJ.JEndod,2002,28(3):181-184.9DamettoFR,FerrazCC,deAlmeidaGomesBP,etal.InvitroassessmentoftheimmediateandprolongedantimicrobialactionofchlorhexidinegelasanendodonticirrigantagainstEnterococcusfaecalisJ.OralSurgOr

10、alMedOralPatholOralRadiolEndod,2005,99(6):768-772.10ViannaME,GomesBP,BerberVB,etal.InvitroevaluationoftheantimicrobialactivityofchlorhexidineandsodiumhypochloriteJ.OralSurgOralMedOralPatholOralRadiolEndod,2004,97(1):79-84.11MatteiMG,RoeckelN,OlsenBR,etal.Genesofthemembrane-typematrixmetalloproteinas

11、e(MT-MMP)genefamily,MMP14,MMP15,andMMP16,localizetohumanchromosomes14,16,and8,respectivelyJ.Genomics,1997,40(1):168-169.12CootaucoCJ,RauschenbergerCR,NaumanRK.Immunocyto-chemicaldistributionofhumanPMNelastaseandcathepsin-GindentalpulpJ.JDentRes,1993,72(11):1485-1490.13RakitaRM,VanekNN,Jacques-PalazK,etal.EnterococcusfaecalisbearingaggregationsubstanceisresistanttokillingbyhumanneutrophilsdespitephagocytosisandneutrophilactivationJ.InfectImmun,1999,67(11):6067-6075.记录激动时刻,赢取超级大奖!点击链接,和我一起参加“2010:我的世界杯Blog日志“活动!

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