1、 中国医科大学博士学位论文ABCE1基因对小细胞肺癌增殖、侵袭、迁移能力影响的研究姓名：黄波申请学位级别：博士专业：胸外科指导教师：田大力20090401能力影响的研究的细胞凋亡过程，并可能在促进蛋白质合成及细胞增殖分化过程中发挥着作用。因膜细胞数较未转染的和转染甋组细胞明显减少，而转染甋的细胞和对照组细胞。流式细胞仪检测显示转染结论使其增殖能力下降，降低其侵袭、迁移能力并诱导细胞凋亡。晒菇薃基因沉默的稳定转染小细胞肺癌细胞系，这将为今后应关键词產 瓵 ， 疦， ，籗 吼 伽狝， 琤 ；申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究
2、生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容苣谌莩以采用影印、缩印或其他手段保存论文。指导教师签名：星盔左日物细胞胞浆内编码一种名为核糖核酸酶的蛋白。细胞内丫巯佘账，琑含量主要试剂聚丙烯酰胺凝胶大连公司美国公司德国公司二、方法细胞培养将瓾赴诤G宓嘌珻孵箱中培养，标本处理，冰箱保存。超速离心，撼逡合茨。显色，漂洗并干燥后避光保存。结果：以膜上出现清晰
3、的棕褐色条带为阳性，应用凝胶统计学处理采用一、免疫组织化学结果粜员泶锫式细分别为，苑巫橹 蠥表达率较低肺癌组织，但二者差异无显著性赴伟赴晗赴蠥表黧瓣图珹在小细胞癌转移 岷喜种破浠钚浴盚病毒感染时，直怀莆猂种埔蜃印镜丁芯恐怠苡胂赴赗特异结论迁移能力的影响，二者的治疗和预后截然不同。小细胞肺癌约占全部肺癌，其恶性程度高、发展迅速、早期可有远处广泛的转移，确诊时病人已有临床或亚临床的淋巴或血行转移，自然病程短。小细胞肺癌对放、化疗敏感，近期疗效好，缓解率可达，但以上的患者治疗后出现复发和转移，而肿瘤的转移和侵袭是治疗失败患者死亡的主要原因【，因此寻找新的途径治疗小 细胞肺癌尤显重要。研究表明，小细胞
4、肺癌的发生是一个多基因参与的，通过不同基因、在不同时相差异表达进行调控的复杂过程【。由于目前发现的与小细胞肺癌发生、发展密切相关的基因较为罕见，寻找新的小细胞肺癌差异表达基因，并确定其在小细胞肺癌中的作用，对于小细胞肺癌的诊断、预防和治疗均具有重要的意义。本研究在应用差异显示方法筛选出小细胞肺癌差异表达产物片段是近年来研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术， 赟璉起的生物细胞内同源基它利用了由小干扰有红褐色荧光的一、菌株和质粒及引物瓻质粒图谱均购于大连宝生物公司。引物璉物 ：珿” 门籘鏚籘玎灶烈质粒提纯试剂盒 大连宝生物公司大连宝生物公司大连宝生物公司大连宝生物公司大连公司 美国公司，英
5、国公司方法提取瓾赴躌上 抑制酶 性片段并测序。使用殛苴旦投鸵飌狣进 介导的细胞转染蠹尤雔称取奂粒臱烧杯中，加琾在磁力搅拌器上搅拌的微孔滤器除菌，分装荩保存。 波长的酶标仪，测定各孔的吸光度值。转染后细胞侵袭能力的检测鲋刈榛啄窒笛将转染甋、甋及甋细胞和未转染的细胞共四组进行如下操作：小室为一杯状结构，杯底为孔径的聚碳酸脂微孔滤膜封闭。转染后细胞迁移能力的检测赴凼笛瓾赴臀醋H镜腘，细胞共四组进行如下操作卜二流式细胞仪分析转染后细胞凋亡队蚻，内上流式细胞仪检测。以瓾赴腡大小厥誅进 窿一一图珹片段电泳结果，为腜产物电泳结果，8视湍溃磷图厥盏腁电泳结果将镉雙连接后，热转化、涂布平板过夜培养菌体，挑选序列一致，表明甌质粒构建成功。
