1、革兰氏菌自 然 界 存 在 多 种 多 样 病 菌 ， 如 何 将 这 些 病 菌 加 以 鉴 别 、 分 类 ， 并 选 择 有 效 药 物 进 行治 疗 这 是 很 重 要 的 问 题 。 革 兰 氏 染 色 法 ， 能 够 把 细 菌 分 为 两 大 类 ： 采 用 这 种 染 色 方 法 ，是 先 用 龙 胆 紫 （ 亦 称 结 晶 紫 ） 来 染 病 菌 ， 所 有 细 菌 都 染 成 了 紫 色 ， 然 后 再 涂 以 革 兰 氏 碘液 ， 来 加 强 染 料 与 菌 体 的 结 合 ， 再 用 95 的 酒 精 来 脱 色 20 30 秒 钟 ， 有 些 细 菌 不 被脱 色 ，
2、 仍 保 留 紫 色 ， 有 些 细 菌 被 脱 色 变 成 无 色 ， 最 后 再 用 复 红 或 沙 黄 复 染 1 分 钟 ，结 果 已 被 脱 色 的 细 菌 被 染 成 红 色 ， 未 脱 色 的 细 菌 仍 然 保 持 紫 色 ， 不 再 着 色 ， 这 样 ， 凡 被染 成 紫 色 的 细 菌 称 为 革 兰 氏 阳 性 菌 (G菌 )革 兰 氏 阳 性 菌 （ G菌 ） ； 染 成 红 色 的 称 为 革 兰 氏 阴 性 菌 （ G菌 ） 。 革 兰 氏 染 色 法 的意 义 就 在 于 鉴 别 细 菌 ， 把 众 多 的 细 菌 分 为 两 大 类 ， 革 兰 氏 阳 性 菌
3、 和 革 兰 氏 阴 性 菌 。 大 多数 化 脓 性 球 菌 都 属 于 革 兰 氏 阳 性 菌 ， 它 们 能 产 生 外 毒 素 使 人 致 病 ， 而 大 多 数 肠 道 菌 多 属于 革 兰 氏 阴 性 菌 ， 它 们 产 生 内 毒 素 ， 靠 内 毒 素 使 人 致 病 。 常 见 的 革 兰 氏 阳 性 菌 有 ： 葡 萄球 菌 、 链 球 菌 、 肺 炎 双 球 菌 、 炭 疽 杆 菌 、 白 喉 杆 菌 、 破 伤 风 杆 菌 等 ； 常 见 的 革 兰 氏 阴 性菌 有 痢 疾 杆 菌 、 伤 寒 杆 菌 、 大 肠 杆 菌 、 变 形 杆 菌 、 绿 脓 杆 菌 、 百
4、 日 咳 杆 菌 、 霍 乱 弧 菌 及脑 膜 炎 双 球 菌 等 。 1在 治 疗 上 ， 大 多 数 革 兰 氏 阳 性 菌 都 对 青 霉 素 敏 感 （ 结 核 杆 菌 对 青霉 素 不 敏 感 ） ； 而 革 兰 氏 阴 性 菌 则 对 青 霉 素 不 敏 感 （ 但 奈 瑟 氏 菌 中 的 流 行 性 脑 膜 炎 双 球菌 和 淋 病 双 球 菌 对 青 霉 素 敏 感 ） ， 而 对 链 霉 素 、 氯 霉 素 等 敏 感 。 所 以 首 先 区 分 病 原 菌 是革 兰 氏 阳 性 菌 还 是 阴 性 菌 ， 在 选 择 抗 生 素 方 面 意 义 重 大 。革 兰 氏 阴 性
5、 菌 (G菌 )。革 兰 氏 染 色 的 结 果 取 决 于 细 菌 细 胞 壁 的 结 构 即 革 兰 氏 染 色 原 理 为 ：G菌 ： 细 胞 壁 厚 ， 肽 聚 糖 网 状 分 子 形 成 一 种 透 性 障 ， 当 乙 醇 脱 色 时 ， 肽 聚 糖 脱 水而 孔 障 缩 小 ， 故 保 留 结 晶 紫 -碘 复 合 物 在 细 胞 膜 上 。 呈 紫 色 。G菌 ： 肽 聚 糖 层 薄 ， 交 联 松 散 ， 乙 醇 脱 色 不 能 使 其 结 构 收 缩 ， 其 脂 含 量 高 ,乙 醇将 脂 溶 解 ， 缝 隙 加 大 ， 结 晶 紫 -碘 复 合 物 溶 出 细 胞 壁 ，
6、沙 黄 复 染 后 呈 红 色 。革 兰 氏 阳 性 菌 细 胞 壁 厚 约 20-80nm， 有 15-50 层 肽 聚 糖 片 层 ， 含 20-40 的 磷壁 酸 。 革 兰 氏 阴 性 菌 细 胞 壁 厚 约 10nm， 仅 2-3 层 肽 聚 糖 ， 另 外 还 有 脂 多 糖 、 细 菌 外膜 和 脂 蛋 白 。革 兰 氏 染 色 原 理 目 前 有 三 种 观 点 ： 等 电 点 学 说 、 化 学 学 说 和 渗 透 学 说 。 1 等 电 点 学 说 ， 革 兰 氏 阳 性 菌 的 等 电 点 在 PH2-3， 比 阴 性 菌 （ PH4-5） 低 ， 加之 碘 为 弱 氧
7、化 剂 ， 可 降 低 革 兰 氏 阳 性 菌 的 等 电 点 ， 致 使 两 类 菌 的 等 电 点 差 异 扩 大 ， 因 此阳 性 菌 和 碱 性 染 料 的 结 合 力 比 阴 性 菌 更 强 。 2 化 学 学 说 ， 碘 液 在 菌 体 内 与 结 晶 紫 结 合 后 又 和 菌 体 内 核 糖 核 酸 镁 盐 -蛋 白 质 复合 物 结 合 ， 此 结 合 物 不 易 被 丙 酮 酒 精 脱 掉 ， 呈 革 兰 氏 染 色 阳 性 。 因 革 兰 氏 阴 性 菌 缺 乏 核糖 核 酸 镁 盐 ， 故 对 碘 与 结 晶 紫 结 合 物 摄 取 少 ， 且 不 牢 固 ， 易 被 丙 酮 酒 精 脱 色 而 呈 革 兰 氏染 色 阴 性 。 3 渗 透 学 说 ， 乙 醇 使 阳 性 菌 所 含 粘 肽 多 糖 脱 水 而 致 细 胞 壁 间 隙 缩 小 ， 通 透 性 降 低， 在 菌 体 内 保 留 了 染 料 -碘 复 合 物 ， 呈 紫 色 。 阴 性 菌 含 粘 肽 少 ， 细 胞 壁 变 化 不 大 ， 通 透性 不 受 影 响 ， 菌 体 内 的 染 料 -碘 复 合 物 较 易 透 出 ， 失 去 紫 色 ， 被 复 染 成 为 红 色 。
