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划痕实验步骤.doc

划痕实验一.准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和 marker 笔在操作前紫外照射 30min(超净台内)二.流程:1.先用 marker 笔在 6 孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔 0.51cm 一道,横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。2.在孔中加入约 5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。4.用 PBS 洗细胞 3 次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。5.放入 37 度 5%CO2培养箱,培养。按 0,6,12,24 小时取样,拍照

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