1、歌谐辞青一、分子生物学是从分子水平上研究基因的结构和功能，包括遗传信息的传递、表达和调控的学科。其发展先后经历传递遗传学和分子遗传学等阶段。生物遗传的两条基本定律，即基因分离定律和基因自的由组合定律。孟德尔将一些显而易见的遗传性状称为表现型或表型。表型也指生物的一整套显而易见的遗传性状，是生物内在遗传因子的外在表现。基因型是指生物的遗传型，即控制性状的基因组合类型。是生物体从它的亲本获得全部基因的总和。在一对同源染色体上同一位置，控制相对性状的不同形态的基因称为等位基因。并在减数第一次分裂的四倍体时期中彼此联会，最后分开到不同的生殖细胞的一对染色体。同源染色体在二倍体生物中，形态、结构基本相同
2、的染色体，半保留复制：一个亲代 DNA 分子通过复制产生了两个相同的子代 DNA 分子，每个子代 DNA 分子中的一条链来自亲代 DNA，一条链来自新合成的 DNA，这种方式被称为半保留复制。中心法则：RNA 聚合酶以 DNA 中的一条链为模板合成互补的一条 RNA 单链，将 DNA 中所蕴含的遗传信息以mRNA 的形式带到核糖体中，在核糖体中作为多肽链合成的直连模版指导蛋白质的合成。mRNA 上三个连续的碱基组成一个编码单位，称为密码子。二、遗传物质的三个特点：稳定性、精确复制并传递、可变异。蛋白酶 蛋白质被破坏 转入 R性细菌 S 型细菌（转化）RNA 酶 RNA被破坏 转入 R性细菌 S
3、 型细菌（转化）DNA 酶 DNA被破坏 转入 R性细菌 S 型细菌（未转化）超速离心 去除脂类 转入 R性细菌 S 型细菌（转化）活得 R型细菌 +热灭活的S 型细菌成分纯化的转化成分物理和化学分析 表明 DNA 是主要遗传物质肺炎双球菌转化实验歌谐辞青噬菌体感染细菌实验朊病毒是极微小的蛋白质微粒，类似于病毒，但不含核酸。人类阮病毒现已发现以下四种：库鲁病、克雅氏综合症、格斯特曼综合症和致死的家族失眠症。核酸就是由很多单核苷酸聚合形成的多聚核苷酸，包括 RNA 和 DNA 两大类。构成核酸的基本单位是核苷酸，分为核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸。单个核苷酸是有含氮碱基、戊糖和磷酸三部分组成。组成
4、RNA 的碱基为 G、A、 U、C，而组成 DNA 的碱基为 G、A 、T、C 。核酸的一级结构是指构成一个核酸分子的各个核苷酸结构单元的排列次序。RNA 和 DNA 分别由四种核糖核苷单磷酸和四种脱氧核糖核苷单磷酸通过 3，5-磷酸二酯键连接而成。书写一般由 3到 5的方向书写。末端终止法：是指在反应混合物中加入一种脱氧核苷酸类似物即 2-3-双脱氧核苷酸（ddNTP） ，由于它的脱氧核糖上缺少 3-OH，当它掺入到 DNA 链上后，反应在掺入处提前终止。DNA 的最典型的二级结构形式是双螺旋结构。A 与 T 之间形成两个氢键，G 和 C 之间形成三个氢键。影响 DNA 双螺旋结构稳定性的因
5、素有以下四种力：氢键、碱基堆积力、带负电荷的磷酸基团的静电排斥力和碱基的分子内能。自然界的 RNA 通常只有一条链组成，但是它们仍然表现出相当程度的双螺旋性质。这是因为 RNA 链经常自我折叠，在不同区段的互补序列之间形成局部的 A-型双螺旋，而不能配对的序列以突起、简单环或发夹环的形式游离在双螺旋之外。正超螺旋：双链或环状 DNA 分子依 DNA 双螺旋的相同方向进一步缠绕而形成的超螺旋结构。负超螺旋：双链或环状 DNA 依 DNA 双螺旋的相反方向进一步缠绕而形成的超螺旋。核酸的变性：是指核酸在化学或物理因素的影响下，维系核酸双螺旋结构的氢键好碱基堆积力受到破坏，分子稳定的双螺旋结构松懈为
6、无规则线性结构甚至甚至解旋成单链的现象。增色效应：变性时 DNA 的双链解开，有序的碱基排列被打乱，增加了对光的吸收，因此变性后 DNA溶液的紫外吸收作用增强，称为增色效应。 （吸收峰值在 260nm，范围 250nm-280nm 波长）常用的 DNA 变性方法主要是热变性和碱变性。热变性使 DNA 分子双链解开一半所需要的温度称为熔解温度 Tm。变性 DNA 在适当条件下，两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。热变性的DNA 一般经缓慢冷却后即可复性，这个过程也称“退火 ”。分子杂交是指不同来源的核酸分子按照碱基配对原则形成稳定的杂交双链分子。三、基因组是指生物体的细胞中一
7、套完整的遗传信息，包括所有的基因和基因间区域。歌谐辞青移动基因:又称转座因子。由于它可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置，甚至在不同染色体之间跳跃，因此也称跳跃基因。断裂基因:含有内含子的基因称为不连续基因或断裂基因。假基因：有些基因核苷酸序列与相应的正常功能基因基本相同，但却不能合成出功能蛋白质，这些失活基因称为假基因，通常用 表示。重叠基因：具有独立性但使用部分共同序列的基因称为重叠基因。基因的种类：基因按其功能主要分为结构基因、调控基因和 RNA 基因。结构基因是能决定某些多肽链（蛋白质）或酶分子一级结构的基因。结构基因的突变可导致特定蛋白质(或酶）的一级结构的改变。调控基因是
8、具有调节控制结构基因表达功能的基因。调控基因的突变可以影响一个或多个结构基因的表达，蛋白质(或酶）量或活性的改变。RNA 基因：有的基因只转录不翻译，如核糖体 RNA 基因，产物分别为 rRNA 和 tRNA。开放阅读框是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子，一个由能翻译成氨基酸序列的三联体构成的阅读框称为开放阅读框（OCR) 。真核基因的典型结构（ P41）基因家族是真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因。基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定为于染色体的特殊区域。重复序列：除了基
9、因家族外，染色体上还有大量无转录活性的重复 DNA 序列家族，主要是基因以外的DNA 序列。有两种组织形式窜连重复 DNA 和散布的重复 DNA。用作载体的质粒必须拥有的三个特点：1.能在受体细胞中复制并稳定保存 2.具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入 3.具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。染色体功能实现的三要素：复制起始点、着丝粒 DNA 序列、端粒 DNA 序列。由 mRNA 逆转录而来的互补 DNA 称为 cDNA。四、歌谐辞青生物体合成 DNA 的手段有两种：DNA 复制、逆转录。DNA 复制是以 DNA 为模板合成相同 DNA 分子的过程，其主要特征有：半保留
10、复制、需要引物、复制方向总是 53、一般为双向复制、半不连续性和具有高度忠实性等。作为 DNA 复制引物的主要是短的 RNA，少数为蛋白质。所有的复制系统具有的一些特征：（1）以原来的 DNA 母链为模板，四种脱氧核苷三磷酸（dATP 、dGTP、dCTP 和 dTTP）为前体，还需要二价金属离子 Mg 离子，根据碱基互补配对规则，复制产生新的子链。 （2）做为模板的双链 DNA 分子需要解链以暴露隐藏在双螺旋结构内的碱基序列，然后才能做为模板。 （3）复制方式是半保留复制。 （4）需要引物。 （5）复制的方向总是 53。 （6）复制起始于特定的区域，但终止的位置通常不固定。 （7）一般为双向
11、复制。 （8）半不连续复制。 （9）具有高度的忠实性。复制起始区一般具有三个共同点特征：一是有多个短的重复序列组成；二是通常富含有利于 DNA 双螺旋解链的 AT 碱基对；三是能够被特定的复制起始区结合蛋白质识别。DNA 复制中主要的酶和蛋白质有 DNA 聚合酶（pol） 、DNA 解链酶、单链结合蛋白、DNA 引发酶、DNA 拓扑异构酶、DNA 连接酶和端粒酶。DNA pol 由 pol A 基因编码，是一种多功能酶，除了具有 53的聚合酶活性以外，还具有 5-核酸外切酶和 3-核酸外切酶的活性。DNA pol 2 也具有聚合酶活性和 3-核酸外切酶活性，但无 5-核酸外切酶活性。DNA p
12、ol 3 含有多个亚基，虽然也具有 53的聚合酶活性和 35外切酶活性，但却由不同的亚基承担。被认为是参与 E.coli 染色体 DNA 复制的主要酶。亚基：四级结构蛋白质分子中，有一条多肽链折叠成的三级结构的球蛋白，组成蛋白质四级结构最小的共价单位，亚基只有聚合成完整的四级结构才具有生物活性。 （蛋白质的最小共价单位。由一条多肽链或以共价键连接在一起的几条多肽链组成。 ）解链酶：是一类催化双螺旋进行解链的酶，一般由两个亚基或六个亚基组成。：是一种专门与单链区域结合的蛋白质，它本身并无任何酶的活性，但通过与单链区段的结合，在复制、修复和重组中发挥一下作用：）暂时维持 DNA 的单链状态；2）防
13、止 DNA 的单链区域自发形成连内二级结构，以消除它们对聚合酶进行性的影响；3）包括 DNA 的单链区域，防止核酸酶对单链区域的水解；4）刺激某些酶的活性。DNA 拓扑异构酶：是一类通过催化 DNA 链的断裂、旋转和再连接而直接改变 DNA 拓扑学性质的酶。DNA 引发酶：是一类特殊的催化 RNA 引物合成的 RNA 聚合酶。切除引物得酶：切除 RNA 引物。DNA 连接酶：不仅参与 DNA 复制、修复和重组，而且是基因工程中最常见的工具酶之一。端粒酶：也称为聚端酶或端粒末端转移酶，是真核细胞所特有，其作用是维持染色体端粒结构的完整性。端粒的主要功能是保护染色体，防止染色体降解和相互间发生不正
14、常的融合或重组。DNA 复制的基本单位是复制子。任何一个复制子都含有一个复制起始区，有些复制子还可能含有特定的终止区。所有的 DNA 复制都可以分为起始（ 包括对其复制起始区 OriC 的识别，以及引发体的形成 ） 、延伸（复 制体的形成；前导链合成；后随链合成；后随链合成与前导链合成之间的协调 ） 、终止和分离三个阶段。DNA 复制的高度忠实性有五种互为补充的机制在起作用：1）四种脱氧核苷三磷酸浓度的平衡；2）DNA pol 的高度选择性；3） DNA pol 的自我校对；4）错配修复； 5）使用 RNA 作为引物。五、DNA 损伤的因素：细胞内在的因素（自发突变） 、环境中的因素（诱发突变
15、） 。细胞内在的因素：DNA 结构本身的不稳定；DNA 复制过程中自然发生的错误，主要是碱基错配；细胞内活性氧带来的破坏作用。歌谐辞青环境中的因素：化学因素、物理因素。一般根据受伤的部位，DNA 损伤可分为碱基损伤和 DNA 链的损伤。碱基损伤有五个亚类：碱基丢失；碱基转换；碱基修饰；碱基交联；碱基错配。DNA 链损伤分为三个亚类：链的断裂，有单、双链断链；DNA 链的交联；DNA 与蛋白质之间的交联。根据修复的机理，DNA 修复一般可分为直接修复、切除修复、双链断裂修复、易错修复、和重组修复。直接修复：指将受损伤的核苷酸连同周围的一些正常的核苷酸“不分青红皂白”地一起切除，然后，以另一条互补
16、链上正常的核苷酸序列作为模板，从新合成核苷酸，以取代原来异常的核苷酸。切除修复：指先切除损伤的碱基或核苷酸，然后，重新合成正常的核苷酸，最后，再经连接酶重新连接，前后经识别、切除、重新合成和重新连接四大步。AP 内切酶：剪掉 DNA5-端脱嘌呤和脱嘧啶位点的酶。突变：发生在 DNA 分子上可遗传的永久性结构变化通称为突变。DNA 突变的本质就是其碱基序列发生的任何变化。根据其变化方式可分为：点突变、移码突变。点突变：也称简单突变或单一位点突变。其最主要的形式为碱基对置换，专指 DNA 分子单一位点上所发生的碱基对改变，分为转换和颠倒两种形式。点突变有三种不同的结果：沉默突变 TGTTGC Cy
17、sCys；错义突变 TGTTGG CysTrp；无义突变 TGT TGA Cys终止。移码突变：又称为移框突变，是指一个蛋白质基因的编码区发生的一个或多个核苷酸（非 3 的整数倍）的缺失或插入。 （显性突变和隐性突变）正向突变是指改变了野生型性状的突变，回复突变则在起始突变位点上发生第二次突变，致使原来的野生表现型得到恢复。六、DNA 重组是指发生在 DNA 分子内或 DNA 分子之间核苷酸序列 的交换、重排和转移现象，是已有遗传物质的重新组合过程。主要有同源重组、位点特异性重组和转座重组三种形式。同源重组：也称一般性重组，是在两个 DNA 分子的同源序列之间直接进行交换的一种重组形式。同源重
18、组不依赖于序列的特异性，只依赖于序列的同源性。同源重组必须满足的条件：1）在进行重组的交换区域含有完全相同或几乎相同的核苷酸序列；2）两个双链 DNA 分子之间需要相互靠近，并发生互补配对；3）需要特定的重组酶的催化，但重组酶对碱基序列无特异性；4）形成异源双链；5）发生联会。参加同源重组的主要蛋白质的结构与功能：RecA 蛋白：是同源重组中最重要的蛋白质，主要作用是促进同源序列配对和链交换。分三步：联会前阶段；联会阶段；连交换阶段。RecBCD 蛋白：参与细胞内的 RecBCD 同源重组途径，其功能是产生 3-单链末端，为链入侵做准备。RuvA 蛋白的功能是识别 Holliday 连接，协助
19、 RuvB 蛋白催化分叉的迁移。RuvB 蛋白本质上是一种解链酶，功能是催化重组中分叉的迁移。RuvC 蛋白是一种特殊的核酸内切酶，在重组中作用是促进 Holliday 连接的分离。位点特异性重组：是指发生在 DNA 特异性位点上的重组。需要专门的蛋白质识别好结合。转座重组：是指 DNA 上的核苷酸序列从一个位置转移到另外一个位置的的现象。发生转位的 DNA 片段被称为转座子。 （与前两种重组不同的是，转座子的靶点与转座子之间不需要序列的同源性。 ）七、转录与翻译：以 DNA 为模板合成 RNA 的过程成为转录；以 RNA 为模板合成蛋白质的过程称为翻译。歌谐辞青转录的一般特征：1）转录发生在
20、 DNA 分子上某些特定的区域；2）以四种核苷三磷酸即ATP、GTP、CTP 和 UTP 作为底物，并需要 Mg 离子的激活；3）需要模版，需要 DNA 的解链，但不需要引物；4）第一个被转录的核苷酸通常是嘌呤核苷酸；5）与 DNA 复制一样，转录方向总是 53；6）转录具有高度忠实性；7）转录是受到严格调控的，调控的位点主要发生在转录的起始阶段。DNA 分子上作为模版的那一条链被称为模版链（无义链） ，与模版链互补的那一条链被称为编码链（有义链） 。转录是一种很复杂的酶促反应，主要有 RNA 聚合酶催化。RNA 聚合酶与 DNA 聚合酶的差别：1） 只有的聚合酶活性，没有核酸外切酶和 35核
21、酸外切酶的活性；2）真细菌的 RNA pol 具有解链酶的活性，本身能够促进双链解链；3）RNA pol 能直接催化 RNA 的从头合成，不需要引物；4）RNA pol 的底物是核苷三磷酸，而不是脱氧核苷三磷酸；5）RNA pol 使用 UTP 代替 dTTP；6） 启动转录需要识别启动子。单顺反子：在多数真核生物中，编码蛋白质的基因的初级转录物，被加工成一种信使核糖核酸(mRNA)，一般翻译出一条多肽链。只编码一条多肽链的顺反子。多顺反子：受同一个控制区调控的一组基因。它们前后排列，并一起被转录和翻译而得到一组功能相关的蛋白质或酶。多见于原核生物。编码多条多肽链的顺反子。八、三种主要的即、和
22、。把的遗传信息准确无误地转录下来，然后再由的碱基序列决定蛋白质的氨基酸序列，完成基因表达过程中的遗传信息传递过程。其功能是作为 mRNA 的支架，使 mRNA 分子在其上展开，实现蛋白质的合成。把氨基酸搬运到核糖体上，它能根据的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸连接起来形成多肽。（）前体的后加工：）剪切和修剪；）核苷酸的修饰；前体的后加工：1）端加帽，帽子有型、型、型，型的 mRNA 前两个被转录的核苷酸的 2-核糖羟基上都没有被甲基化，1 型甲基化一个，2 型都被甲基化。帽子的功能：1、有助于某些 mRNA 前体的正确拼接；2、有助于成熟 mRNA 转运出细胞核；3、保护 mRNA，避免你核
23、酸酶降解；4、增强 mRNA 的可翻译性性。2）3-端“加尾” 。3）内部甲基化。4）拼接。5）编辑。九、参加蛋白质合成的主要成分有核糖体、mRNA、各种氨酰-tRNA、氨酰-tRNA 合成酶和若干辅助性蛋白质因子。核糖体：是催化氨基酸之间形成肽键的分子机器，在翻译过程中，它与 mRNA 可逆的结合，并按照mRNA 的指令，合成具有特定一级结构的多肽链。核糖体的三维结构及其功能定位：1）A 部位，即氨酰 tRNA 结合部位，也称受体部位；2）P 部位，即肽酰 tRNA 结合部位，也称供体部位；3）E 部位，即空载 tRNA 在离开核糖体之前与核糖体临时结合的部位。mRNA 是翻译的模版，由它直
24、接指导蛋白质的合成。tRNA 在翻译中的功能有两项：一是将氨基酸转运到核糖体上，二是通过其反密码子与 mRNA 上的密码子之间的相互作用对遗传密码进行解码，将其最终转化成多肽链上的氨基酸序列。tRNA 的二级结构三叶草结构。氨基酸在参入多肽链之前必须被活化，而氨酰-tRAN 是它的活化形式。翻译的一般性质：翻译的四个阶段；翻译具有极性；三联体密码；反密码子决定特异性；摆动规则。歌谐辞青翻译的极性有两次意思：一是指阅读模版时的方向性。翻译时阅读 mRNAd 的方向都是 5-端3-端；二是指多肽链延伸的方向总是从 N-端C-端。三连密码：由 3 个核苷酸决定 1 种氨基酸的编码形式被称为三联体密码
25、。摆动规则的意义在于:翻译时， tRNA 和 mRNA 因为有一对碱基不是严格配对，氢键较弱而更容易分离，从而加快翻译的速度。翻译的机制：氨基酸的活化、起始、延伸、终止和释放及折叠与后加工。翻译的起始：起始密码子的识别；起始复合物的形成。翻译的延伸：进位；转肽；移位。十、1翻译后加工的主要方式有：多肽链的修剪 、剪切、或拼接、N-端添加氨基酸、氨基酸残基的修饰、二硫键的形成、添加辅助因子（金属离子、辅酶或辅基） 、多肽链的折叠和四级结构的形成2. 分子伴侣是体内许多蛋白质的成功折叠、组装、运输和降解所必需的。3.蛋白质翻译后的定向与分拣：一个活细胞每时每刻都在同时合成多种不同的蛋白质，合成的主
26、要场所是细胞质，然而不同的蛋白质在合成以后最后在细胞中的定位不一定相同，例如：组蛋白进入细胞核、细胞素 c 进入线粒体，蛋白质合成以后所经历的这种转移和定位的过程。4.信号肽：为一段在一级结构上连续的氨基酸序列，通常有 15 个-60 个氨基酸残基，它们有的在 N-端，有的在 C-端，有的在多肽链的内部。引导蛋白质从细胞液进入内质网、高尔基体、胞外、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体的分拣信号属于信号肽序列5.信号斑：存在于已折叠的蛋白质中，是蛋白质完成折叠后的在其表面形成的由来自不同区域的氨基酸序列组合在一起的三维分拣信号。十一1.基因表达的调控模式可根据调控的效果分为正调控和负调控。正调控：在没
27、有调节蛋白或调节蛋白失活的情况下，基因正常表达。一旦存在调节蛋白或调节蛋白被激活，则基因不能表达即基因的表达受阻。负调控：在没有调节蛋白或调节蛋白失活的情况下，基因不表达或表达量不足，一旦存在调节蛋白或调节蛋白被激活，基因才能表达或者大量表达。2.负调控中的调节蛋白被称为阻遏蛋白（或与操纵基因结合后能减弱或阻止其所调控基因转录的调控蛋白） ；正调控中的调节蛋白被称为激活蛋白（或与操纵基因结合后能增强或启动其所调控基因转录的调控蛋白） 。3.许多调节蛋白属于别构蛋白；细胞中某些特定的物质能与别构蛋白结合，使调节的蛋白的构象发生变化，从而改变它们与操纵基因的结合活性，影响到基因的转录的活性，这些特
28、定物质统称为别构效应物。4.组成操纵子的最基本的元件包括四个部分：启动子、操纵基因、结构基因和相关的调节基因（1）启动子：能被 RNA pol 识别、结合并启动基因转录的一段 DNA 序列（2）结构基因：操纵子中被调控的编码蛋白质的基因。每个结构基因是一个连续的开放阅读框（3）操纵基因：能被调节蛋白特异性结合的一段 DNA 序列，常与启动子相邻或与启动子序列重叠，当调节蛋白质结合在操纵子序列上，会影响其下游基因的转录。（4）调节基因：调节基因编码能与操纵基因结合的调节蛋白。5.操纵子一般可以分为诱导型操纵子和阻遏型操纵子。（1）诱导型操纵子：一般控制与分解代谢有关酶的基因表达，其需要诱导物与阻
29、遏蛋白结合或者诱导物与激活蛋白的结合（2）阻遏型操纵子：通常控制与合成代谢有关的基因表达，需要辅阻遏物与阻遏蛋白解离或者辅阻遏物与激活蛋白的解离。6.乳糖操纵子的负调控： （表达调控的基本原则）歌谐辞青十二1. 原核生物基因转录的调节蛋白比较少，而且以负调节为主（阻遏蛋白） ，真核生物基因转录的调节蛋白很多，而且以正调节为主，称为转录激活因子。2. 每一个 DNA 结合结构域都含有一个 DNA 结合模体，模体是结构域的一部分，具有特定的形状以保证和特定 DNA 序列特异结合。DNA 结合模体有：含锌模块、同源结构域、bZIP 及 bHLH 模体。3. 锌指结构：由一个锌离子和两个半胱氨酸及两个
30、组氨酸残基共同形成的指状结构域。C2H2 锌指模体：2 个 Cys、2 个 His 以及一个锌离子组成的锌指结构4. RNA pol与启动子结合一般需要三种蛋白质的作用：基础转录因子或者称通用转录因子；与 DNA结合的转录激活因子和辅激活因子5. 转录激活因子的远距离作用：原核生物和真核生物的曾强子即使距离所调控的启动子很远也可以刺激转录,在原核生物中两个远离的位点之间的 DNA 形成环状突起而使所结合的 DNA 结合蛋白相互作用。6. 绝缘子：是“阻断邻近元件的影响的天然屏障” 。可以保护基因，免受邻近增强子和沉默子的激活作用或抑制作用。补充：1 转基因的基本过程：目的基因的获取，基因表达载
31、体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和表达。2 载体的三个性质：具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入. 能在受体细胞中复制并稳定保存 . 具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择3 cDNA：逆转录 DNA, 以 mRNA 为模板，在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合成 cDNA(基因)4 原核与真核基因克隆最大的区别：真核生物有内含子5 真核与原核基因的区别：真核生物有内含子；真核转录的产物多为单顺反子，而原核基因的大多数为多顺反子；真核的启动子以外的序列参与调节基因的转录6 筛选转化子的几种方法：1）DNA 杂交筛选 2）通过抗体对蛋白产物免疫反应筛选 3）通过酶活性筛选歌谐辞青7.PCR 的基本原理 :8.基因扩增的方法：逆转录法、化学合成法、PCR9.内切酶：10.连接酶：
