1、实验四 植物染色体组型分析,一、实验目的,观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短臂比和随体等形态特征,学习染色体组型分析的方法。,二、实验原理,1、染色体组型: 各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。 每一细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。,2、染色体组型分析(核型分析): 就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各种染色体的形态特征,如对染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等观测,从而描述和阐明该生物的染色体组成,为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。,3、染色体组型分析大都采用植物根尖等分生组织中的细胞有丝分裂中期,因为此期染色体具有较典型的特征,且易于计数;
2、在进行核型分析时,染色体制片要求分裂相为当构体分散,互不重叠,能清楚显示着丝点位置。然后通过显微摄影,测量放大照片上的每个染色体的长度和其它形态特征,依次配对排列,编号,并对各对染色体的形态特征作出描述。,三、实验材料,芍药(Paeonia Laetiflora)根尖分生组织细胞有丝分裂中期相片(放大2000倍)2n=2X=10。,四、染色体照生的测量分析工作,经显微摄影、冲洗放大的染色体照片,按以下步骤进行分析:,1、测量 依次测量染色体长度,长臂和短臂的长度(分别量到着丝点中部),计算臂比时,长臂长度为分子,短臂长度为分母,随体计入臂长与否须注明。,臂比=长臂花/短臂,染色体长度表示方法有
3、两种:,2、配对 将放大照片上剪下的同源染色体进行配对,配对的根据是 随体的有无及大小、臂比是否相等。,3、排列:将配对好的同源染色体按下列原则进行排列,并正式编上序号。 1)染色体长的在前,具随体染色体、性染色体排在最后2)若有二对以上具随体染色体,则大随体染色体在前,小随体染色体在后3)异源的染色体要分别排列(如小麦的A、B、D染色体组),4、剪贴: 把上述已经排列的同源染色体按先后顺序粘贴在绘 图纸上。粘贴时,应使着丝点处于同一水平上,并一 律短臂在上,长臂在下。所得组型图。,5、分类: 臂比是反应着丝点在染色体上的位置。根据此可 确定染色体所属的形态类型。,染色体形态类型,6、填表:将
4、上述结果整理成“染色体形态测量数据表”,总长度 73.75 um(单倍的染色体实际总长),7、综合描述,说明供试材料的染色体总数,染色体组型的公式,如蚕豆的染色体组型公式2n=2m(SAT)+10t;染色体的大小,染色体组型的分类。,1)染色体大小描述:规定1um以下为极小染色体;14um为小染色体;412um为中染色体;长12um以上的为大染色体。,2)染色体组型的分类:即核型的分类、同一核型中染色体相对大小不一,一般可根据核型中染色体体臂比及其比值大小,以及它们所具有的数目比例而划分,由m染色体组成的,称为对称型的;大多数由m染色体组成的叫基本对称型;大多数由Sm和st组成的称为基本不对称组型;由St组成的称为不对称组型。,核型类型 1A为最对称型 4C为最不对称型,芍药:2n=2x=10=8m(2sat)+2Sm=6m+2Sat+2Sm 基本对称型,8、翻拍和绘图:将剪贴排列好的染色体组型图进行翻拍,用坐标纸或绘图纸绘成染色体模式图。(略),五、简要描述实验观测到的染色体组型结果,注 :1)染色体组型图:一般是将与模式照片同一细胞的染色体逐个剪下,参照染色体长度和臂比值,进行同源染色体配对,然后按表格中的染色体序号排列到为该细胞的核型图,一般仅代表5个细胞染色体的组型如何。2)染色体模式图则代表该种植物体细胞染色体的情况。,