1、附件 1玉米种子产地检疫技术规程（征求意见稿）1 范围本标准规定了玉米种子产地检疫的定义、植物检疫性有害生物、危险性有害生物田间危害症状鉴别及受检材料、健康种子繁育及检验、田间管理、场院检疫、疫情处理及签证等技术标准。本规程适用于辽宁省境内繁育玉米种子的产地检疫。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1 产地检疫 Produced-area quarantine指玉米种子繁育过程中的全部检疫工作。包括选地（址） 、选种、玉米种子生产期间的田间检疫和必要的室内检验等。2.2 健康种子 Healthy Seed指按本规程所列检验方法进行检验，未发现检疫性有害生物、危险性病害的玉米种子。2.
2、3 踏查法 on-site survey指按玉米田块大小和形状在田里逐行清查，观察有无检疫性有害生物和危险性病害的可疑症状及发生危害程度，同时了解田块的地形地貌特点，田间植株长相表现等。2.4 棋盘式调查法 checkerboard investigation 指将玉米田块划成等距离等面积的方格，每隔一个方格在中央取一个样点，相邻行错开取样的调查方式。3 检疫性有害生物、危险性病害田间症状鉴别及受检材料3.1 检疫性有害生物（田间为害症状鉴别见附录 A）玉米霜霉病 Peronosclerospora spp Weston et Uppal玉米干腐病 Diplodia zeae (Schw.)L
3、ev.3.2 危险性病害 （田间为害症状鉴别见附录 A）玉米疯顶病 Sclerophthora macrospora (Sacc.)Thirum.,Shaw et Naras玉米褪绿斑驳病毒 Maize chlorotic mottle virus3.3 受检材料玉米种子、植株（幼苗、成株） 、玉米穗4 健康种子繁育及检验4.1 选地（址）4.1.1 繁种基地应选择无检疫性有害生物、无危险性病害区域。4.1.2 如在检疫性有害生物零星发生区，必须选择有自然隔离条件、无检疫性有害生物的地块。14.2 选种 4.2.1 种子亲本应由本单位繁育或从非疫区（发生区）调入。4.2.2 对调入的种子亲本要
4、查验植物检疫证书，必要时进行复检，发现疫情必须进行严格除害处理，同时注意对可能感染疫情的运输工具、包装材料等进行检疫。4.3 田间检疫及室内检验4.3.1 田间检疫4.3.1.1 分别在检疫性有害生物、危险性病害症状表现明显的苗期（5-8 片叶） 、抽雄期、乳熟期，进行三次检疫。4.3.1.2 苗期采取逐块、逐行踏查法。4.3.1.3 抽雄期、乳熟期在全面目测的基础上，采取棋盘式调查法。地块面积在 0.3hm2以下的至少取 5 点，0.3-1.3 hm2取 10 点，1.3-3.3 hm2取 15 点，3.3 hm2以上取 20 点，每点 10-20 株。对可疑的点、片进行针对性的调查。4.3
5、.2 调查结果记录根据田间检疫情况，填写农业植物检疫田间调查记录表（参见附录B），有条件的，拍摄田间检疫的典型症状、疑似病株等影像资料。4.3.3 室内检验田检发现可疑植株，现场不能确认的，采集疑似样品带回室内检验，同时保存样品，并填写农业植物检疫现场检查抽样记录表（参见附录C），检验方法参见附录D。4.3.4 检验结果记录实验室内检测鉴定采集的疑似样品，填写农业植物检疫实验室检验报告单 （参见附录 E） 。5 田间管理对田块内的玉米秸秆及落叶等应彻底清除、烧毁，避免串田灌溉，并及时防治其他有害生物。6 场院检疫对制种单位收购的玉米棒进行检疫，重点检查感病品种及亲本。看穗轴及籽粒，是否有病穗、
6、病粒，及时甩出杂棒、病穗、病粒，识别纯质种子。7 疫情处理及签证7.1 玉米苗 5-8 片叶时，结合定、间苗拔除可疑病苗。7.2 抽雄期、扬花期结合田检及去雄、去杂工作，拔除病株。拔除的病株用塑料袋装好，带出田外深埋或销毁。7.3 乳熟期及收获、打场时，结合田检、场院检疫等及时检出可疑病穗，并且要单收单贮。7.4 发现检疫性有害生物或危险性有害生物，应在检疫人员监督下，立即封锁，所繁育的种子不能做种用。7.5 发现发生玉米霜霉病、玉米干腐病等重大检疫性有害生物时，可采取销毁措施。7.6 在田间检疫和室内检验，未发现检疫性有害生物、危险性病害的地块，发给产地检疫合格证（参见附录 F） 。调运时凭
7、产地检疫合格证换取植物检疫证书 。2附录 A（资料性附录）二种检疫性有害生物和二种危险性病害田间为害特征鉴别A1 玉米霜霉病菌 Peronosclerospora spp：主要介绍三种类型A1.1 高粱霜指霉（蜀黍霜指霉）Peronosclerospora sorghi(W.Weston & Uppal)C.G.Shaw苗期-成株期：矮化，叶片往往有条纹，叶片包括基部失绿，较窄、直。雄穗可叶化，果穗柄可变长。霜霉病可出现在病叶的两面，如果产生卵孢子，多出现在果穗的苞叶及叶片的条纹之间。A1.2 玉蜀黍霜指霉(爪哇霜指霉）Peronosclerospora maydis(Racib.)Shaw（
8、异名 P.Javanica Palm）苗期：全株呈淡绿色，心叶黄化，上部叶片扭曲，分蘖增多（3-5 个） ，逐渐变黄枯死。成株期：多从中部叶片的基部发病，向上蔓延，初为淡绿色长条纹，以后互相融合，使叶的下半部或全部变为淡绿色至淡黄色，以致枯死，病株矮化。雄穗部分或全部变形、增生，形成一堆叶状结构，雌穗多不能抽出，结粒很少。在潮湿条件下，病叶的褪绿斑上长出霉状物。A1.3 菲律宾霜霉病 Peronosclerospora Philippinensis(West).Shaw苗期（2 或 3 叶）-成株期：叶片有褪绿的长条斑，叶背（偶尔在叶正面）生白色霉层。雄穗可能畸形、花粉少，雌穗可能局部或全部不
9、育，发病早的植株矮化，可能死亡。A2 玉米干腐病 Diplodia zeae (Schw.)Lev.苗期:胚受害不发芽，幼芽、根受害发生褐色干缩病斑，有时因此枯死或茎腐、叶腐等。成株期：在植株近茎部 4-5 节或果穗着生处附近生黑褐色病斑，后期中心变灰白色，病叶鞘和病茎秆间密生白色菌丝；重病茎秆枯朽、易折断。组织死亡后产生大量小黑点，叶片受害叶背形成51-2cm 长形病斑；病株果穗多提前成熟，病穗与苞叶之间充满白色菌丝，苞叶包裹特别紧密，不易剥离；病穗僵化变轻，籽粒干缩、暗褐色、污浊状、无光泽，籽粒间罩有灰白霉（菌丝体） ；病害发生后期的苞叶上、籽粒基部甚至全部籽粒、穗轴内侧和护颖产生小黑点。
10、A3 玉米疯顶病 Sclerophthora macrospora (Sacc.)Thirum.,Shaw et Naras苗期：苗高 20-30cm 时，可形成分蘖，有时一株有 6-10 个分蘖。成株期：重病株矮化高度不足 1m，叶片变窄，质地坚韧，叶鞘表面呈疣状；与矮化相反，病株徙长也很常见，并伴随果穗柄的伸长（可达 1m） ，病株有时可长出多达 12 个果穗枝；有的病株上部叶片心叶紧卷、扭曲、不伸展，呈“龙头拐”或“牛尾”状；最典型的症状是雄穗叶化，即正常的花序全部或部分成变态的小叶，小叶丛生使雄穗呈鸡毛帚状或龙头状等大头状；雌穗粗长，不伸花丝，果穗内部全为苞叶相卷而成，苞叶尖变态为小叶
11、状并呈 45角丛生，穗轴呈多节茎状，不结籽粒，较轻的病株可产生少量秕瘦的种子，偶尔有个别病株正常结苞。A4 玉米褪绿斑驳病毒 Maize chlorotic mottle virus苗期-成株期：病株叶片褪绿条斑，平行叶脉发展，节间变短，生长矮化，条斑接合产生长形褪绿的大斑，最后导致叶片坏死。在严重侵染的感病品种上，叶片坏死导致植株死亡。雄花具有硬3的圆锥花序，短的花轴和少的花穗；果穗变少、畸形。受害玉米越幼小、矮化，其症状越严重。附录 B（资料性附录）农业植物检疫田间调查记录表编号： 名 称受检单位（个人） 联 系 人 联系电话植物名称 产出用途品种名称 种苗来源生 育 期 种植面积预计产量
12、 调查日期调查地点中文名称 抽样面积(m 2) 发生面积(m 2) 抽样株数(株) 发生株数（株）目标有害生物调查方法不需要实验室检验：调查结论 需要实验室检验：备 注当事人（签名）检疫员（签名）检疫机构（盖章）年 月 日4农业植物检疫田间调查记录表附件田间调查记录表编号： 植物名称：序号 品种名称 种苗来源 种植面积 预计产量12345678910合计当事人（签名）日期:检疫员（签名）日期:5附录 C（资料性附录）农业植物检疫现场检查抽样记录表编号： 名称受检单位（个人） 联系人 联系电话名称抽样单位联系人 联系电话植物名称 抽样日期抽样地点目标有害生物品种名称 原产地 抽样方位 检查代表货
13、物数量为害状描述：发生与处理情况及原因：样品类型用途、抽样方法和抽样比例：备注：当事人（签名）检疫员（签名）检疫机构（盖章）年 月 日6附录 D（资料性附录）有害生物检验方法D1 玉米霜霉病有霉层的病株，可挑取叶化雄穗与雌穗苞叶内的霉状物镜检。对无霉层的病株，可保湿培养，待发生霉状物后进行镜检，孢子囊近球形，长椭球形，大小平均为 2317.5m。D2 玉米干腐病取病部小黑点镜检，鉴别分生孢子器，扁球形、球形、梨形等不规则形；黑褐色，孔口突出，呈长乳突状，器壁碳质，较厚，直径为 192-352m 。D3 玉米疯顶病将雄穗小叶、雌穗丛生叶片用 10氢氧化钠溶液泡 24h，然后在显微镜下镜检，看到游
14、动孢子囊。将叶片组织透明、染色、制片，用显微镜镜检，有大量的藏卵器和卵孢子，卵孢子黄色，近圆形、光滑、其大小为 74.4-50.472.0-50.4m，平均 64.262.0m。D4 玉米褪绿斑驳病毒电镜下观察，病毒粒子为等轴对称二十面体(T=3)，用磷钨酸负染色直径约 30nm，用醋酸铀负染色直径约 33nm，无包膜，粒子外形呈六边形，有的被负染色剂渗透，有 180 个蛋白结构亚基。7附录 E（资料性附录）农业植物检疫实验室检验报告单编号：名 称受检单位（个人） 联 系 人 联系电话名 称送样单位 联 系 人 联系电话植物名称 抽样日期收 样 人 收样日期抽样地点目标有害生物检验方法：检验结果：备 注：检验人（签名）： 审核人（签名）： 检验机构（盖章）年 月 日8注：本单一式三份，检验单位、受检单位和检疫机构各一份。附录 F（资料性附录）产地检疫合格证 二维码位置编号： 名 称地 址生产单位（个人）联 系 人 联系电话植物名称 产出用途品种名称 种植面积总 产 量种植地点产地检疫结果：检疫员（签字）： 年 月 日植物检疫机构审定意见：签发检疫机构(植物检疫专用章)年 月 日9注：本证有效期 1 年，请妥善保存，不得转让，需调运该植物或产品时，凭此证向植物检疫机构办理植物检疫证书 ；品种名称由生产单位（个人）提供并对其真实性负责，多个品种另附清单。
