1、病理，仅供参考11. 分子病理学（molecular pathology）在蛋白质和核酸水平上，应用流式细胞术、原位杂交技术等分子生物学技术研究疾病发生发展过程的病理学分支学科。分子病理学揭示了由于基因组错误引起的分子化学结构缺陷和指导氨基酸合成的碱基序列的错误等疾病基础。利用原位杂交技术，在组织切片和细胞培养液中，可以看到一些特殊基因和他们的 mRNA 的存在。极小量的核酸可用对研究基因特异性的寡核苷酸引物聚合酶链反应（PCR）进行扩增。2.细胞黏附分子（cell adhesion molecules ，CAM ）细胞黏附分子是由细胞产生、存在于细胞表面、介导细胞与细胞间或细胞与细胞外基质间
2、相互接触和结合的一类分子。CAM 大多为糖蛋白，少数为糖脂，分布于细胞表面或细胞外基质间中。CAM 是维持细胞生物体正常发育、生长、形体及组织器官正常结构与生命活动的一类重要分子。3.肿瘤干细胞(Tumor stem cells)存在于肿瘤组织中的一小部分细胞，具有自我更新能力、不定向分化潜能、高致瘤性和耐药性。4.小干扰核酸（small interfering RNA，siRNA）长双链 RNA 被细胞源性的双链 RNA 特异的核酸内切酶切成 2123 个碱基对的短双链 RNA，称为 siRNA。5.肿瘤血管生成（angiogenesis）是指肿瘤细胞诱导的微血管生长以及肿瘤中血循环建立的过
3、程。肿瘤血管形成是肿瘤发生、生长和浸润与转移的重要条件。6.肿瘤血管生成拟态（vasculogenic mimicry ）肿瘤细胞(黑色素瘤细胞)通过自身变形并与细胞外基质相互作用模仿血管壁结构，形成可输送血液的管道系统，从而重建肿瘤的微循环，并在某个环节与宿主血管相连使肿瘤获得血液供应，并将这个过程命名为肿瘤血管生成拟态。7.基质金属蛋白酶（Matrix metalloprotinases ，MMPs)）基质金属蛋白酶是四类蛋白水解酶中较为重要的一类，他们几乎能降解 ECM 中所有成分；是一组锌离子依赖性内肽酶，至少都含有信号肽、前肽、催化区 3 个结构；病理，仅供参考2表达和活性受酶原合成
4、、酶原活化和抑制剂抑制 3 个水平的调控。组织金属蛋白酶抑制剂（TIMP）可以通过抑制 MMPs 内源性物质而抑制 MMPs 的活性。8.基因芯片（DNA chips）该技术是指将大量探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。9.生长因子（growth factor）是指活细胞产生的，通过靶细胞上特异受体传递信息，调节细胞生长、增殖和分化的多肽。10.上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）指上皮细胞在形态学上发生向成纤维细胞或间质细胞表型的转移并获得迁移的能力，上皮间
5、质转换是胚胎发育中的一个基本过程，它使在特殊部位产生的上皮细胞从上皮组织分离并迁移到其他位置，是正常发育、伤口愈合以及恶性上皮肿瘤发生的基础。上皮细胞在生理和病理因素的作用下，通过特定程序使细胞极性、细胞紧密连接和黏附连接渐渐丧失，获得侵袭性和迁移运动的能力，伴有细胞外基质成分分泌的增多，转化成具有间质表型细胞的生物学过程。间质上皮转化（mesenchymal-epithelial transition，MET）癌症种子变回上皮细胞从而能够与组织接触并整合进新器官。间质细胞特异性的细胞可以重新转化成上皮细胞，重建细胞间连接和细胞骨架，引起远处的转移灶。11.前哨淋巴结（sentinel lym
6、phnode，SLN）原发肿瘤引流区域淋巴结发生转移必经的第一个淋巴结，肿瘤从此进一步转移至远处淋巴结。SLN 作为有效的屏障，可以暂时阻止肿瘤细胞在淋巴道的进一步扩散，如前哨淋巴结无肿瘤转移，理论上讲原发肿瘤引流区域的其他淋巴结就不会发生肿瘤转移。12.端粒（telomere）端粒是真核细胞线性染色体末端特殊结构，由端粒 DNA 和端粒相关蛋白组成。端粒 DNA 为不含功能基因的简单、高度重复序列，在生物进化过程中具有高度保守性，人类及其他脊柱动物端粒的结构是 5TTAGGG3重复序列，长约 15kb，其功能在于维持染色体的稳定性和完整性。13 端粒酶（telomerase）端粒酶在结构上为
7、一核糖核蛋白复合体，由 RNA 和结合的蛋白质组成，是 RNA 依赖的 DNA 聚合酶。它是病理，仅供参考3一种特殊的能合成端粒 DNA 的酶，能维持端粒长度的稳定性。添加富含 TTAGGG 的端粒 DNA，它实际上是一种特殊的反转录酶，由 3 个亚单位构成：端粒酶 RNA、端粒酶反转录酶、端粒酶结合蛋白。大题：1 临床医生做活检的取材原则及注意事项。取材要取最可疑的病灶；应在病变与正常组织的交界处取材；避免坏死组织及明显的并发感染区；不要沿病灶做水平切取，而应垂直切取且有一定的深度；活检取材应避免挤压或无齿镊钳夹；大的标本宜对解剖位置标记；淋巴结活检应切除完整的淋巴结送检。2.端粒酶的结构及
8、功能由 3 个亚单位构成：端粒酶 RNA、端粒酶反转录酶和端粒酶结合蛋白。端粒酶是在染色体末端不断合成端粒序列的酶，它可以维持端粒的长度，维持细胞增殖潜能。端粒酶由 RNA 和蛋白质两部分组成。以自身 RNA 为模板合成端粒酶重复序列，具有反转录酶活性，它的活性不依赖于 DNA 聚合酶，对 RNA 酶、蛋白酶和高温均敏感。端粒酶活性表达能稳定端粒的长度，抑制细胞的衰老，在生殖细胞和干细胞中可检测到高水平的端粒酶活性。端粒的结构及功能：结构：端粒是真核细胞线性染色体末端特殊结构，由端粒 DNA 和端粒相关蛋白组成。端粒 DNA 为不含功能基因的简单、高度重复序列，在生物进化过程中具有高度保守性。
9、人类及其他脊柱动物端粒的结构是 5TTAGGG3重复序列，长约 15kb。功能：可维持染色体末端的稳定，保持染色体及内部基因的完整性，从而使遗传物质得以完整复制。缺少端粒的染色体不能稳定存在，这是因为：端粒 DNA 与结构蛋白形成的复合物如同染色体的一顶“帽子” ，既可保护染色体不被降解，又避免了端粒对端融合以及染色体的丧失，同时端粒能帮助细胞识别完整染色体和受损染色体。病理，仅供参考4在生理情况下，端粒作为细胞“分裂时钟”能缩短，最终导致细胞脱离细胞周期。3.信号生成系统的重要因素（转导过程）受体细胞内受体，位于细胞质和细胞核中，全部为 DNA 结合蛋白，可介导亲脂性信号分子的信息传递，如胞
10、内的甾体类激素受体。细胞表面受体，存在于细胞质膜上，绝大部分为镶嵌蛋白，可介导亲水性信号分子的信息传递。膜表面受体三类：离子通道型受体，蛋白耦联型受体，酶耦联型受体。蛋白激酶是一类磷酸转移酶，其作用是将 ATP 的 磷酸基转移到底物特定的氨基酸残基上，使蛋白质磷酸化。作用是通过磷酸化调节蛋白的活性；蛋白质的逐级磷酸化，使信号逐渐放大，引起细胞反应。将信号转变和放大的 G 蛋白是位于膜内侧的耦联蛋白，通过与膜受体胞质区结合，将膜受体与配体结合的刺激特异给下游的效应分子。细胞内的第二信使生长因子或诱导物，即第一信使必须被放大并穿过细胞膜传送到细胞里面，在细胞内被转换成第二信使，这些第二信使被导入细
11、胞的不同细胞器内，完成跨膜信号转换，最终导致细胞反应。4. 肿瘤细胞发生浸润与转移的主要步骤有哪些？肿瘤细胞同质型黏附降低，从原发灶脱离。肿瘤细胞与细胞外基质发生异质型黏附增加。细胞外基质降解；肿瘤细胞与 ECM 中大分子作用，分泌蛋白降解酶类降解 ECM 成分，形成肿瘤细胞移动的通道，并以此为诱导血管生成的基础。肿瘤细胞运动性增强，在黏附降解的过程中移动，穿透 ECM，并穿透血管壁的基膜，进入循环。在循环中运行，并逃避免疫系统识别与破坏。到达继发部位后，在有新生血管形成的前提下增殖，从而形成转移灶。概括起来为黏附、降解、移动和血管生成。5有关肿瘤形成的基本理论：从遗传学的角度来说肿瘤是一种基
12、因病。肿瘤的形成是肿瘤细胞单克隆性扩增的结果。原癌基因的激活和(或)肿瘤抑制基因的失活。病理，仅供参考5肿瘤细胞的恶性转化是一个长期的、分阶段的、多种基因突变积累的过程。肿瘤的发生是免疫监视功能丧失的结果。6.术中快速病理诊断的作用与局限性：（论述）冷冻切片的用途：a、决定病变的性质b、确定病灶切除是否完全c、确定组织起源d、确定有无淋巴转移癌冷冻切片诊断的局限性：a、冷冻切片技术的缺陷是切片质量差b、采取活检组织时易造成肿瘤种植c、不适用于骨组织和脂肪组织（骨组织和脂肪组织不适于冷冻切片诊断）d、疑难病例和交界性病例勉强诊断易发生误诊。e、冷冻切片取材局限。诊断要求有一定经验的病理医生承担。
13、7.细胞周期调控的主要元素：（论述）细胞周期蛋白(cyclin)一类随着细胞不同时相发生变化的蛋白质。根据 Cyclin 调控细胞周期时相不同分为 G1 期和 M 期两大类。G1 期 cyclinC、D、EM 期 cyclinA、B细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)是调节细胞周期另一个重要蛋白质，是一类重要的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，包括 CDK1-CDK7 种，CDK 主要生物学作用是启动 DNA 的复制和诱导细胞的有丝分裂，以复合物形式出现。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CKIs)是 CDK 抑制蛋白，通过竞争性地抑制 cyclin 或 cyclin-CDK 复合物，导致 Cyclin 生物学
14、功能丧失，对 cell生长起负调控作用。G1 期 CDK 的负调节因子有 2 个蛋白家族：INKs 和 GIP/KIPs。INKs 家族，包括 p15、p16、p18、p19，是 CDK4 与 CDK6 的特异性抑制物。GIP/KIPs 家族，包括 p21、p27、p57 等，能抑制 Cyclin-CDK 复合物，阻止 CDK 激酶的激活或阻止活化的CDK 激酶活性。病理，仅供参考68.肿瘤中表观遗传学（epigenetics）改变表观遗传学是指基因组 DNA 未发生变化时也可以引起基因表达改变的重要化学修饰。表观遗传学改变就是基因组特定位点的表观修饰变化，是可逆性改变。主要包括：DNA 修饰
15、（甲基化及羟甲基化） 、组蛋白翻译后修饰（甲基化及乙酰化等）以及染色质重塑；这三部分互相交叠共同调控着基因的表达。表观遗传学与肿瘤发生密切相关，其在数量上远远多于遗传学改变，常发生于肿瘤早期，可作为肿瘤早期诊断的标记，并为肿瘤治疗提供了多种动态和可逆的治疗靶点。9.简述前哨淋巴结（sentinellymphnode，SLN）的概念、检测 SLN 的临床意义和可能出现检测假阴性的情况。概念：原发肿瘤引流区域淋巴结发生转移必经的第一个淋巴结，肿瘤从此进一步转移至远处淋巴结。SLN作为有效的屏障，可以暂时阻止肿瘤细胞在淋巴道的进一步扩散，如前哨淋巴结无肿瘤转移，理论上讲原发肿瘤引流区域的其他淋结巴就
16、不会发生肿瘤转移。临床意义：引入 SLN 概念，避免手术范围扩大化，使肿瘤分期更加准确，根据有无淋巴结转移开展个体化治疗来改善病人术后的生活质量。同时肿瘤未发生转移的淋巴结仍有正常的免疫功能，在肿瘤局部进行最有效的抗肿瘤免疫，其淋巴结链具有阻滞细胞扩散的作用，必须加以保护。假阴性情况：如果染料注射剂量不足或淋巴管阻塞、患者既往接受过手术或放疗而改变了局部的淋巴走向，均可能导致 SLN 的假阴性率增高。论述题1.术中病理诊断的作用与局限性冷冻切片的用途：b、决定病变的性质b、确定病灶切除是否完全c、确定组织起源d、确定有无淋巴转移癌冷冻切片诊断的局限性：b、冷冻切片技术的缺陷是切片质量差b、采取
17、活检组织时易造成肿瘤种植c、不适用于骨组织和脂肪组织（骨组织和脂肪组织不适于冷冻切片诊断）d、疑难病例和交界性病例勉强诊断易发生误诊。病理，仅供参考7e、冷冻切片取材局限。2.细胞周期调控的重要蛋白质细胞周期蛋白/细胞周期素（cyclin） 、细胞周期素依赖激酶(CDK)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（CKIS）细胞周期蛋白（cyclin）：一类随着 cell 不同时相发生变化的蛋白质。根据 Cyclin 调控细胞周期时相不同分为 G1 期（Cyclin C、D、E）和 M 期（Cyclin A、B） 。细胞周期素依赖激酶(CDK):调节细胞周期另一个重要蛋白质，是一类重要的丝/苏氨酸蛋白激酶
18、，包括CDK1-CDK7 种，CDK 主要生物学作用是启动 DNA 的复制和诱导细胞的有丝分裂，以复合物形式出现。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（CKIS）：是 CDK 抑制蛋白，通过竞争性抑制 cyclin 或 cyclin-CDK 复合物,导致 Cyclin 生物学功能丧失，对细胞生长起负调控作用，G1 期 CDK 的负调节因子有 2 个蛋白家族:INKs 和 GIP/KIPs。INKs 家族包括 P15、16、18、19，是 CDK4 与 CDK6 的特异性抑制物；KIPs 家族包括P21、27、57 等，能抑制 Cyclin-CDK 复合物，阻止 CDK 激酶的激活或阻止活化的 CDK
19、激酶活性。3.细胞周期检测点的功能细胞周期检测点（Check point）：细胞在长期进化过程中发展出了一套保证细胞周期中 DNA 复制和染色体的分配质量的检查机制，称为，这是一类负反馈调节机制。当细胞周期进程中出现异常事件，如 DNA损伤或 DNA 复制受阻，这类调控机制就被激活，及时中断细胞周期的进行，待细胞修复或排除故障后，细胞周期才能恢复运转。细胞周期检测点根据细胞周期的时相主要有 G1-S 期检测点、S 期检测点、G2 期检测点和 M 期检测点。检测点的组成：发现/传感、制动/扣留、修复、继续分裂/死亡（检测点功能缺陷会导致基因突变和染色体结构异常细胞增殖，导致肿瘤发生）细胞周期检测
20、点构成了 DNA 修复的完整元件。检测点通过延缓细胞周期的进展，为 DNA 复制前的修复、基因组的复制、有丝分裂及基因组的分离提供更多的时间。检测点功能的丢失或减弱可能通过降低 DNA 复制效率来增加和诱导基因突变和染色体畸变。（1） G1-S 期检测点：是最重要的检测点。细胞在该检测点对各类生长因子、分裂原以及 DNA 损伤等复杂的细胞内外信号进行整合和传递，决定细胞是否进行分裂、发生凋亡或是进入 G0 期。其中最重要的控制点是 G1 晚期的 START，START 调节失灵，将导致细胞越过正常的程序限制进入 S 期，并允许细胞复制未修复的突变 DNA，从而积累形成肿瘤表型的基因改变。G1-
21、S 期检测点缺陷导致肿瘤的原因主要是 P53 缺失和 cyclin 上调。（2）S 期检测点：控制进入 S 期的检测点-G1 期检测点可防止 DNA 受损的细胞进入 S 期。病理，仅供参考8（3）G2 期检测点：控制进入 M 期的检测点-G2 期检测点可防止受损的 DNA 和未完成复制的 DNA 进入有丝分裂。P53 是 DNA 损伤诱导 G2 期阻滞的关键机制，因此 P53 缺失导致的 G2 期检测点缺陷与许多肿瘤的发生有关。（4）M 期检测点：又叫纺锤体组装检测点。主要是阻止细胞分裂、阻止细胞两极形成纺锤体、阻止染色体附着到纺锤体上。4.抗血管形成靶向治疗的优点与局限性优点：（1）除对某些
22、生理及创伤情况下的血管形成具有一定程度的抑制作用外，可有效避免骨髓抑制、胃肠道反应及心脏损害等毒性反应。（2）主要通过细胞因子、受体及信号转导过程发挥作用，从而避免了传统方法主要作用于遗传物质导致基因突变所可能引起的继发性癌症。（3）该方法作用于具有遗传稳定性的内皮细胞，不易发生耐药。（4）血管生成与肿瘤的生长、浸润、转移密切相关，抗血管生成治疗具有广谱作用。（5）抗血管生成治疗可与化疗/放疗联合应用，具有协同作用，并减轻后者的毒副反应。局限性：（1）肿瘤能够抵抗 VEGF 的治疗（2）有些药物在动物模型上看到引人瞩目的结果，但在临床试验中结果不一。临床批准用于肿瘤的血管生成抑制剂，其中大部分是阻断血管内皮细胞生长因子的单一治疗方法，然而，随着时间的推移，突变的肿瘤细胞可能会产生过多的血管生成因子，从而对那些阻断单一血管生成因子产生抗性。
