1、Comment d1: 大标题用二号，黑体，行距 1Comment d2: 人名用小四号，楷体，人名之间用逗号隔开，单名的姓和名之间空 2格Comment d3: 单位用小五号，宋体，行距 1*2（字）Comment d4: 黑体加粗,中间空 2格Comment l5: 摘要用小五号、宋体，摘要中（目的） 、 （方法） 、 （结果） 、（结论）等字样必须写，便于编辑审查是否遗漏写作要素，排版前会删除这些字样。但作者必须使删除后全段行文通顺，流畅。Comment d6: 用英文字母，与数字空一格，类似的还有min、kg、g、mL、h 等Comment d7: 斜体，大写Comment 刘刘刘8:
2、 3-8个关键词，分号隔开Comment d9: 英文题目用小四号，黑正，行距 1，实词第 1个字母大写，介词、连词、冠词等虚词均用小写，但句首除外1论文格式规范山羊线粒体 DNA D-loop区部分序列变异位点分析 某某某 1，某某某 1*，某某某 1 ，某 某 2(1. 某某大学饲料科学研究所 动物分子营养学教育部重点实验室，杭州 310029；2. 中国农业大学动物医学院，北京 100193)摘 要：(目的)本研究旨在观察一水肌酸(creatine monohydration, CMH)对肥育猪生长性能、胴体组成和系水力的影响及其机理探讨(目的研究、研制、调查等的前提、目的和任务，所涉及
3、的主题范围。)。(方法)选用体重70 kg左右的杜长大三元杂交猪48头，按试验要求随机分为2组，每组设3个重复，每个重复8头猪，分别饲喂含CMH为0或0.25%的日粮，饲养试验时间为30 d(方法所用的原理、理论、条件、对象、材料、工艺、结构、手段、装备、程序等。)。(结果)结果表明，CMH对猪日增重无显著影响（ P0.05） ；CMH显著提高了肥育猪的眼肌面积（ P0.05） ；CMH还使试验组猪的背最长肌率显著提高（ P0.05） ；CMH使肥育猪宰后24 h背最长肌和半膜肌的滴水损失明显降低（ P0.05). CMH raised the loin eye area (LEA) sign
4、ificantly (P0.05). CMH increased longissmus dorsi ratio significantly (P0.05） 。下表同。Note:Different letters in the same row means significant difference between the treatments（P0.05 ）. The same as below.图 5 1/5 LD50组小鼠肝脏病理切片（400） Fig.5 Pathological section of liver from 1/5 LD50 group mice a.上皮细胞胞质部分溶
5、解；b.线粒体嵴缺损，部分模糊消失；c.液泡a.Plasmarrhexis of epithelial cells; b.Impairment of mitochondrial cristae; c. Vacuole图 8 1/5 LD50组肾脏近曲小管电镜图Fig.8 The electron microscope picture of kidney proximal convoluted tubule from 1/5 LD50 group10000 6000abbccComment 刘刘刘28: 大于 999的整数和多于三位数的小数，一律用半个阿拉伯数字符的小间隔分开，不用千位撇。对于纯
6、小数应将 0列于小数点之前。示例：应该写成 18 666.0518 567；0.518 628设备型号、序列等不用空格。42 结果2.1 系统进化树及网络关系分析我们对 1 182条序列在 BioEdit7.0 软件进行比对后，用 MEGA3.0以 Kimura 2-parameter 模型，建立 NJ树，并对拓扑图进行了自展检验(bootstrap) ,重复抽样次数为 1 000 次。所建的系统进化树见图 1，这 10个山羊品种很明显的分成了 4个支系 A、B、C 和 D。用 Network 4.2进行网络关系分析也证实了这一点。其中 A、B、C 和 D支系分别含有 1 001、134、24
7、 和 13条序列。2.2各支系变异分析对 A、B、C 和 D 4个支系利用 BioEdit软件，以已经发表的山羊线粒体全序列（AF533441）15 73516 187片段为参考序列进行比对，4 个支系所特有的变异位点，可以清晰的显示出来，如图 2是随机选取了这 4个支系的部分序列。我们共发现能区分 4个支系的 48个位点，每个支系有自己特有的碱基变异位点，其中 A支系的特有变异位点为：71、270、283 和 291，B 支系特有变异位点为：157、229、241、246、301 和 347，C 支系的特有变异位点为：8、27、61、86、126、130、134、173、248、258、26
8、7、286、290、301、318、348、383 和 414，D支系特有变异位点为：35、74、137、153、175、242 和 313。这些位点均表示在我们截取的 453 bp长度的位置，在线粒体全序列的位置及具体的碱基替换情况见表 1，所有的变异都是转换。另外，以前有报道 B支系是由 2个呈星状辐射的单倍群所构成。所以，为了更清楚的了解这 2个单倍群的碱基变异特点，我们把这 2个单倍群进行了分类比对，分别称为 B1和 B2，从图 2可以看出，这 2个单倍群有各自不同的特点，如在 11和 97位点，当然，它们也拥有 B支系所共有的碱基变异特征。除了各个支系特有的变异外，我们还发现有几个支
9、系共有的变异，其中 A和 D共有的是 107、239 和 274，A 和B1共有的是 237和 247，B2 和 C共有的是 128、238 和 275，C 和 D则在 302位点。3 讨论线粒体 DNA由于其自身的特点而广泛的应用于山羊的起源进化及系统发育研究，尤其线粒体 D-loop区，随着研究的深入，越来越多的序列提交到 GenBank数据库，主要分成 5个支系，其中 A支系占的比例最大，依次为 B、C 和 D。为了进一步了解各个支系的碱基变异特点，本研究选取了来自不同国家的 1 182条序列进行分析，发现 A、B、C 和 D这 4个支系有各自特有的碱基变异特点。利用本研究得出的各个支系
10、特有的碱基变异位点，就可以通过直接测定这些特有变异位点来大概区分各个支系，而省去了测定整个要研究序列进行聚类分析来区分支系的繁琐。在我们分析的各个支系中，C 支系的特有变异位点最多，A 最少，也就说明 A支系是最普遍的支系，而 C则是稀有支系。 Sultana等用PCR-RFLP分析巴基斯坦山羊线粒体 D-loop全序列时得出：377 位点是 B、C、D 特有的，653 位点是 B特有的，及相当于我们分析的 71、347 位点。通过序列比对，并没有发现不同国家间有特异性的变异，表明山羊品种间分化并不明显，表现出较弱的地理结构，这与以前 Luikart 等报道的是一致的，在我8000 8000C
11、omment d29: 按1, 2, 3等依次排列,请注意严格模仿以下文献的所有编写格式，特别注意英文字与字(或字母)之间、标点符号与字之间、标点符号与数字之间的空格，参考文献用 5号宋体Comment 刘刘刘30: 英文姓置前，全大写，名保留首字母，大写。注意区分姓与名。5国李祥龙等研究了国内几个地方山羊品种的线粒体 DNA多态性,也显示了我国地方山羊品种较低的分化程度。张红平等通过对中国 16个地方品种的山羊线粒体 D-loop区的分子等级差异分析，品种内的方差组分则占了 75.78%，也表明了山羊品种间弱的地理结构。造成这样的原因可能是古代山羊经过不同地区间的大量运输，从而表现出现有家养
12、山羊不明显的地理分化，山羊这种弱的地理结构也正反映了人类迁徙和商贸活动的历史。参考文献：1马月辉，徐桂芳，王端云，等.中国畜禽遗传资源信息动态研究 J.中国农业科学，2002，35(5) ：89-92.2马月辉，吴常信.畜禽遗传资源受威胁程度评价 J.家畜生态，2001，22（2）：8-13.3FELIGINE M，PARMA P. The complete nucleotide sequence of goat(capra hircus) mitochondrial genome J. DNA Sequence， 2003，14:199-203.4GUO J， DU L X， MA Y H，
13、 et al. A novel maternal lineage revealed in sheep (Ovis aries) J. Animal Genetics，2005，36： 331-336.5吴仲贤. 统计遗传学M.北京：科学出版社， 1977.6BOLDMAN K G, KRIESE L A, VAN VLECK L D, et al. A manual for use of MTDFREMLM. A set of programs to obtain estimates of variances and covariances. US Agric Depart, Agric Res Ser, 1997.7李钟淑.奶牛繁殖性状的遗传参数及育种值估计的研究D.北京：中国农业大学，1992.8雒鸣峰.奶牛主要经济性状遗传参数的估测及遗传分析C第七次全国畜禽遗传育种学术讨论会论文集.1993:297-302.
