1、发酵工程课程设计报告书题目 年产 2000 吨色氨酸的工厂设计分工安排： 生物工程 102 班第一组专 业： 生物工程 指导教师： 金大勇 完成日期： 2013.06.20 分组安排：第一组 1009082046-47（摘要、前言、工艺论证）第二组 1009082050-55（物料衡算、热量衡算、水平衡计算）第三组 1009082040-45（设备选型及计算）第四组 1009082048-49（CAD 绘图）第五组 1009082056-59（整理总结）南通大学课程设计I摘 要色氨酸是人和动物生命活动中八种必需氨基酸之一,对人和动物的生长发育、新陈代谢起着重要作用。色氨酸的生产方法有多种,其中
2、以微生物直接发酵法最具发展前途。随着色氨酸的需求量日益增加，决定设计一个年产 2000 吨色氨酸的工厂。本设计以大肠杆菌为生产菌株，利用微生物直接发酵法制备色氨酸，采用深层发酵的方式，采用过滤、三效浓缩、冷却结晶、离心烘干的方法，最终获得 99%的色氨酸。本设计对工艺流程进行了物料衡算，并对主要生产设备进行了选型。 关键词：色氨酸，发酵法，工艺，设备选型 南通大学课程设计IIABSTRACTTryptophan is one of eight kinds of essential amino acids in human and animal life activity, It is usef
3、ul for growth of people and animal. There are many methods to product tryptophan, and among them the microbial fermentation is the most promising.With the increasing demand of tryptophan , we decided to design an annual output of 2000 tons of tryptophan factory. We design the product with Escherichi
4、a coli strains, using microbial fermentation , the method of deep fermentation, filtration, three-efficient concentration, cooling crystallization, centrifugal and drying, and eventually get 99% degrees of purity of tryptophan. The design perform the material balance based on the technological proce
5、sses, and select the main production equipment.Key words: tryptophan, fermentation, process, selection of equipment,目 录摘 要 南通大学课程设计IIIABSTRACT 前言.11 工艺论证 .21.1 无菌空气系统 .21.2 淀粉的液化和糖 .31.3 发酵工艺 .41.4 提取工艺 .51.5 总工艺流程图.62 物料衡算 .72.1 生产过程的总物料衡算 .72.2 制糖工序物料衡算 82.3 连续灭菌和发酵工艺物料衡算 .92.4 提取工序物料衡算 113 热量衡算 .
6、133.1 液化工序热量衡算 133.2 糖化工序热量衡算 143.3 连续灭菌和发酵工序热量衡算 153.4 浓缩结晶过程热量衡算 173.5 干燥过程热量衡算 183.6 生产过程耗用蒸汽汇总表 194 水平衡 .204.1 糖化工序用水量 .204.2 连续灭菌用水量 .204.3 发酵工序用水量 .204.4 提取工序用水量 .204.5 用水量汇总表 .215 设备计算与选型 .225.1 糖化罐 .215.2 发酵罐 .225.3 种子罐 .275.4 无菌空气制备 .305.5 三效浓缩罐.315.6 结晶罐.336. 参考文献30南通大学课程设计1前言L-色氨酸是含有吲哚基的中
7、性芳香族氨基酸,为白色或略带黄色叶片状结晶或粉末，在水中溶解度1014 g（25），溶于稀酸或稀碱，在碱液中较稳定，强酸中分解。微溶于乙醇，不溶于氯仿、乙醚。它是人体和动物生命活动中必需氨基酸之一，对人和动物的生长发育、新陈代谢起着重要作用，被称为第二必需氨基酸，在生物体内，从L-色氨酸出发可以合成5-羟基色胺的激素以及色素、生物碱、辅酶、植物激素等生理活性物质，可以预防和治疗糙皮病，同时具有消除精神紧张、改善睡眠等功效。另外，由于色氨酸是一些植物蛋白中比较缺乏的氨基酸，用他强化食品和做饲料添加剂对提高植物蛋白质的利用率具有重要的作业，它是继蛋氨酸和赖氨酸之后的第三大饲料添加氨基酸。目前世界
8、L-色氨酸的年产约为 10000 多吨，市场增长率超过 10%，作为饲料添加剂使用的色氨酸有数百吨，中国主要是高价格限制了她的应用。世界上主要生产厂家是日本的昭和电工、协和发酵和三井化学公司采用发酵方法生产色氨酸，赢创德固赛则兼有发酵法和合成法生产色氨酸。L-色氨酸的最早生产是靠化学合成法和蛋白质水解法，随着对微生物法生产 L-色氨酸研究的不断深入，这种方法已经处于主导地位。微生物法大体上可以分为直接发酵法、微生物转化法和酶法。目前微生物直接发酵法成为色氨酸工业化生产的主流方式。南通大学课程设计21工艺论证1.1 无菌空气系统微生物在繁殖和耗氧发酵过程中都需要氧气，通常以空气作为氧源。空气中含
9、有各式各样的微生物，这些微生物随着空气进入培养液，在适宜的条件下，它们会大量繁殖，消耗大量的营养物质，以及产生各种代谢产物，干扰甚至破坏预定发酵的正常进行，使发酵产品的效价降低，产量下降，甚至造成发酵彻底失败等严重事故。为保证纯种培养，必须将空气中的微生物除去或杀死。此外还要求一定的相对湿度和具有一定的温度。供给发酵用的无菌空气因需克服过滤介质的阻力、发酵液的静压力和管道阻力，所以常用空气压缩机加压后供给。过滤除菌是目前生物工业生产中最常用、适用的空气除菌方法。生物加工过程中最常用的获得大量无菌空气的常规方法 ：一类是介质间孔隙大于微生物直径，故必须有一定厚度的介质滤层才能达到过滤除菌的目的，
10、称为介质过滤或相对过滤或深层过滤。这类过滤介质有棉花、活性炭、玻璃纤维、有机合成纤维、烧结材料（烧结金属、烧结陶瓷、烧结塑料） ；而另一类介质的孔隙小于细菌，含细菌等微生物的空气通过介质，微生物就被截留于介质上而实现过滤除菌，有时称之为绝对过滤。但常用介质过滤法。此外，空气经过压缩和在管道输送及经过滤器时的压力和温度的变化，会引起空气相对湿度改变，一旦发生凝露析水，就会使过滤介质（如棉花）吸湿，使过滤介质除菌效率大为降低。因此，应把压缩空气中可能析出的水，在接近过滤介质之前除去。空气过滤除菌流程：图 1 选用两级冷却、分离、加热的空气除菌流程注： 第一级冷却：可使大部分水、油结成较大雾粒（通常
11、冷却到 3035 ） ；冷却器冷却水加热器 分离器空气过滤器空气分离器冷却器冷却水压缩机粗过滤器南通大学课程设计3第二级冷却：可使空气析出较小的雾粒（通常冷却到 2025 ） ； 第一次分离：分离直径较大，浓度较大的雾粒（直径在 10 um 以上） ；第二次分离：分离直径较小的雾粒（直径在 5 um 以下） ；其优点：a. 比较完善的空气除菌流程，可适应各种气候条件，尤其适用潮湿的地区，其他地区可根据当地的情况，对流程中的设备作适当的增减。能充分地分离油水，使空气达到低的相对湿度下进入过滤器，以提高过滤效率。b. 特点：两次冷却、两次分离、适当加热。2 次冷却：可以减少油膜污染对传热的影响，能
12、提高传热系数，节约冷却用水2 次分离：可使油、水、雾分离得比较完全。适当加热：可使除水后的空气相对湿度由 100%降到 50%60%。c .首先将进入空气压缩机的空气粗滤。滤去尘灰等固体微粒，这对空气压缩机正常运行、介质除菌有很大帮助。d. 为防止往复压缩机产生脉动，在流程中需要设置一个或数个贮气罐。e. 无菌过滤，空气除菌系统一般常用两台总过滤器（便于交叉使用）和分过滤器（每个发酵罐一台）相结合的二级过滤装置，以确保空气的“无菌” 。1.2 淀粉的液化和糖化：色氨酸发酵过程中用的是葡萄糖，而所采用的发酵菌种没有分解淀粉的功能，所以在微生物发酵之前必须将淀粉分解成葡萄糖。目前采用的是喷射液化法
13、和双酶法葡萄糖生产工艺。工艺流程包括调浆、液化、糖化和过滤。1.2.1 调浆：搅拌速度为 10 20 r/min，加入工艺水和淀粉原料到淀粉浓度为 25%，升温到 50-55 ，调节 pH 保持在 6.0-6.5 之间，加入耐高温的 -淀粉酶，用量为 10 U/(g 淀粉） 。1.2.2 液化：通入蒸汽到喷射器和维持柱中，预热到 90-95 后，将淀粉乳泵入喷射器，调节物料与蒸汽的压力，保持平衡。保持出口的温度在 100-105 之间，液化的淀粉乳由喷射器下方卸出，引入维持罐。维持过程的温始终要控制在 95-98 之间，持续时间南通大学课程设计4为 30 分钟，最终淀粉乳的碘反应呈棕红色，且能
14、迅速扩散。1.2.3 糖化：淀粉乳经糖化后，通过螺旋版换热器降温，降至 60-62 ，然后进入糖化罐，用10%的硫酸调节来 pH 至 4.2-4.5，再加入糖化酶，其用量为 100 U/(g 淀粉） 。糖化时间约为 24-48 小时，终点前 DE 值达到最高，提前 15-20 min 升温至 85 ，灭酶 5-10 min.1.2.4 过滤：由于糖化过程中的条件比较温和，所以脂肪、蛋白质基本没发生变化，可以用板框压滤机配上 12-16 涤纶过滤布加以过滤。1.3 发酵工艺色氨酸发酵采用大肠杆菌深层发酵的方式1.3.1 工艺流程斜面培养 三角瓶麸曲孢子悬浮液种子罐发酵罐升温絮凝蛋白发酵液贮罐1.
15、3.2 培养基成份原料a : 斜面培养基（g/l） 牛肉膏 3g , 蛋白胨 10g , Nacl 10g , 琼脂 1520g , PH7.47.6 b : 麸曲培养基 麸曲：水 = 1：1c: 种子培养基（g/l) (NH4)2SO4 50, 淀粉糖 50，玉米浆 4ml，豆饼水解液2ml，MgSO 47H2O 4, KH2PO4 0.1 ,，FeSO 47H2O 0.01，MnSO 4.H2O 0.01， PH 7.07.2d : 发酵培养基 （g/l) 淀粉糖 50 ，玉米浆 22ml，(NH 4)2SO4 40 ，Phe 0.15 ，Tyr 0.15，MgSO 47H2O 0.4，MnSO 4H2O 0.01，FeSO47H2O 0.01，VB 1 100g1.3.3 工艺条件：制备孢子悬液：在1000 ml三角瓶内装入麸皮40 g和水40 ml，混匀，121 灭菌30 min。然后接种，再放入30 培菌室内进行培养3-4 d，前2天每天混匀2次，孢子完全成熟时就不用混匀。
