1、1实验四 乙酸正丁酯中杂质的含量测定-内标法定量一、目的要求1.学习内标标准曲线法定量的基本原理和测定试样中杂质含量的方法。2.复习并巩固气相色谱分析原理及其操作步骤。二、实验原理对于试样中少量杂质的测定，或仅需要测定试样中某些组分时，可采用内标法定量。设在质量为 m 试样 的试样中加入内标物的质量为 ms，被测组分的质量为 mi，被测组分及内标物的峰面积分别为 As、A i，则有(1), (2)iissfiisfA以内标物为标准，f s= 1,则有：(4)s10iimfAw试 样 内标标准曲线法，配制一系列的标准溶液，测得相应的 Ai/As，m i/ms。以 Ai/As 对 mi/ms 作标
2、准曲线。这样就可以在无需预先测定 fi 的情况下，称取一定量的试样 m 试样 和内标物 ms，混合进样，根据 Ai/As 之值由标准曲线求得 mi/ms，再根据公式 (5)s10iiw试 样 求得被测组分的质量分数 wi。三、仪器与试药1.FL9500 气相色谱仪2.微量进样器（1 L ，0.5 L， 5 L）3.移液管（0.5 mL、1 mL、2 mL）4.高纯氮、高纯氢、低噪声空气净化源5.正庚烷( =0.68 g/cm3)、环己烷 (=0.779 g/cm3)、乙酸乙酯 (=0.901 g/cm3) 、乙酸正丁酯(=0.8824 g/cm3)均为分析纯。6.标准溶液按下表配制，分别置于
3、5 支 25 mL 的容量瓶中，用乙酸正丁酯定容，混匀备用。编号 m 正庚烷 /g m 环己烷 /g m 乙酸乙酯 /g1 1.00 0.25 0.252 1.00 0.50 0.503 1.00 0.75 0.754 1.00 1.00 1.005 1.00 1.25 1.257.未知试样 25 mL（含 1.00 g 正庚烷） 。si ii f试 样 试 样 100 (3)2四、实验条件1. 固定液：二甲基聚硅氧烷（非极性） ；色谱柱：毛细管 0.3230 mm/m2. 柱温：70 oC；气化室（辅助 I）温度：150 oC；检测器温度：150 oC3. 载气：氮气； 检测器：氢火焰离子化
4、检测器（FID）4. 进样量：标准溶液 1 L； 未知试样 0.5 L；纯物质： 0.2 L。五、实验内容及步骤1. 根据实验条件，按仪器操作步骤将色谱仪调节至可进样状态，待仪器的电路和气路系统达到平衡，色谱工作站的基线平直时，即可进样。2. 吸取各纯物质 0.2 L 进样，记录 各纯物质的保留时间。3. 吸取标准溶液 1 L 进样，记录各组分的保留时间和色谱峰面积。4. 在同样条件下，吸取未知试液 0.5 L 进样，记录各组分的保留时间和色谱峰面积。六、数据记录及处理1. 记录纯物质的保留时间乙酸乙酯 正庚烷 环己烷 乙酸正丁酯保留时间（min）2. 记录标准溶液及未知试样各色谱图上各组分色
5、谱峰面积编号 A 乙酸乙酯（mV .s）A 环己烷（mV .s）A 正庚烷（mV .s）12345未知以正庚烷为内标物质，计算 mi/ms，A i/As 值以 Ai/As 对 mi/ms 作图（Origin 软件） ，绘制各组分的标准曲线，得到线性回归方程和线性相关系数。5. 根据未知试样 Ai/As 的值，由标准曲线计算出相应的 mi/ms 的值。6. 计算未知试样中甲醇、异丙醇、乙酸乙酯、环己烷的质量分数。七、注意事项进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净，清洗干净的微量注射器应该专用，不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用。3八、思考题1. 简要说出气相色谱的主要仪器部件。2. 实验
6、中是否需要严格控制进样量，实验条件若有变化是否会影响测定结果，为什么？3. 内标标准曲线法中，是否需要校正因子，为什么？4. 根据纯物质的保留时间，确定各物质的沸点大小，并说明理由。附录： FL9500 气相色谱仪操作步骤1 . 开 N2 钢瓶：1 逆时针转动减压阀手柄至放松位置，此时减压阀处于关闭状态.2 逆时针打开钢瓶上的总阀门，并记录瓶中余气压力.3 顺时针旋紧减压阀，直至分压值达所需压力 0.5 Mpa.2. 接通电源，开净化器，三个全打开.3. 调节毛细管柱前压(主机顶上表压力 )为 0.06 Mpa，开色谱仪上的两电源 .4. 设置参数，选择优化条件：1.柱温(柱箱键).2. 汽化
7、室(辅助 I).3. FID(检测器).5. 待所设参数达到设置条件时(显示键查看) ，开 H2 钢瓶.H2 钢瓶的开法：1.逆时针转动减压阀手柄至放松位置.2.逆时针打开钢瓶上的总阀门.3.逆时针打开减压阀左边的小通道（使用阀）.4. 顺时针旋紧减压阀直至分压值达所需压力 0.2 Mpa.6. 调色谱仪主板上 H2 表的压力为 0.1 Mpa.7. 开低噪声空气净化源， 调色谱仪主板上空气压力为 0.03 Mpa.8. 点火，若点火困难，可先调高氢气至 0.15 Mpa，点火后调回至 0.1 Mpa.9. 打开电脑，点桌面上的 FL9500 色谱工作站图标进入系统，点通道 1 或 2。10.
8、 待基线平直后，即可进样，进样后按工作站的通道 A 或 B 上的按时器或在工作界面上点击开始按钮即进行进样分析。 （注意：进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净，清洗干净的微量注射器应该专用，不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用）.11. 采样结束后点停止，若想处理色谱图点进样后处理，点转入再处理，打印结果，待所有样品采样结束后，关色谱程序窗，关电脑.12. 关 H2，先关总阀(顺)减压阀( 逆)使用阀(顺) 稳压阀.13. 关低噪声空气净化源.414. 设置气化室，FID，柱箱温度为 50，到达后关主机.15. 关 N2， 先关总阀(顺)减压阀( 逆)稳压阀，关净化器，随后关掉一切电源 .
