1、实验生理科学 生理实验部分,朱文博 E-mail: ,实验安排,实验一：熟悉使用仪器（BL-420记录系统）坐骨神经-腓肠神经标本制备 实验二：神经干动作电位阈强度测定神经干动作电位传导速度测定 实验三：蛙心起博点的确定期前收缩与代偿间歇 实验四：兔呼吸运动的调节 实验五：兔动脉血压的调节 实验六：影响尿生成的因素,实验二,神经干动作电位阈强度和传导速度的测定,目的 1.熟悉坐骨神经-胫腓神经标本的制备方法； 2.熟练使用仪器（BL-420记录系统） ； 3.测定分离的坐骨神经干动作电位的阈强度和传导速度,静息电位： 细胞在静息末未受刺激时存在于膜两侧的电位差。 产生机制：K+平衡学说- K+
2、外流,K+外流,动作电位： 指可兴奋细胞受到阈上刺激或阈刺激时，其膜电位在静息电位的基础上产生一个迅速、可逆的、可传导的电位变化。 产生机制：Na+平衡学说- Na+内流,基本概念,阈强度： 引起组织发生兴奋的最小刺激强度。 产生机制：此强度以下的刺激引起的Na+内流被K+外流抵消，当阈强度的刺激使膜电位到达阈电位时，Na+通道大量开放引起Na+快速内流而导致动作电位,2. 阈强度的测定,阈强度,神经兴奋性的变化期： 绝对不应期：又叫有效不应期， Na离子通道全部失活 相对不应期：Na离子通道尚未恢复到备用状态 超常期：膜电位接近阈电位，低于阈强度的刺激可引发AP 低常期：膜电位较静息电位远离
3、阈电位，需要高于阈强度的刺激才可引发AP,+,-,+,-,测定原理细胞外膜电位测定 已兴奋部位带“负电”，未兴奋部位带“正电”，引导出此电位差。 复合电位。,粗端,细端,+,-,静息状态,兴奋状态,产生双相波形原因：由于动作电位传导到神经干两记录电极放置点的时间先后差异，神经干一端受到刺激时产生正向电流，传至另一端时前段已部分恢复或完全恢复，从而产生反向电流。,步骤一、制备坐骨神经-胫腓神经干标本 二、实验装置连接 三、实验观察与记录：1.动作电位的引导2.阈强度的测定3.传导速度的测定，V=S/t(m/s)S 记录电极之间（C1-C3）的神经干长度（米为单位）； t记录通道1与2的动作电位起
4、点的时间差 （秒为单位）。,一、制备坐骨神经-胫腓神经干标本,1、分离坐骨神经，到达腓肠肌处 2、找到坐骨神经分叉及胫、腓神经 3、顺神经走向，剪开膝关节囊 4、向下分离内侧的胫神经和外侧的腓神经至踝关节 5、结扎坐骨神经干的脊柱端及腓肠肌的足端 6、提起结扎线，将神经干标本放入任氏液中备用,注意：1、保证神经足够长度 2、注意不要损伤神经，避免金属器械碰触神经 3、保持神经湿润 4、尽量分离干净,二、实验装置连接,刺激电极,C1,C2,+,-,地,-,+,-,+,C3,C4,神经干粗端,神经干细端,CH1,CH2,计算机,网络打印机,生物信号采集系统,神经屏蔽盒,V=S/t(m/s)S C1
5、-C3的神经干长度（米）； tCH1与2的动作电位起点的时间差（秒为单位）,注意事项,1、放置神经干：方向、水平、悬空 2、盖上盖子！保持湿润！在神经干上滴上任氏液， 保持槽内留有一定量的任氏液 3、连接电极注意事项： 电极插头注意凹槽与插孔的对接，三角形标志对接，直接插入或拔出，切忌旋转插头！ 电极插头注意与插孔正确正负极对接，插入后注意轻轻旋转固定插头！,注意滤波。1.动作电位的引导2.阈强度的测定 设置：程控方向：增大；增量：0.005mV；程控：是；3.传导速度的测定，V=S/t(m/s)S 记录电极之间（C1-C3）的神经干长度（米为单位）； t记录通道1与2的动作电位起点的时间差（秒为单位） 数据处理：右击：比较显示；数据处理：区间测量（读右上角的时间间隔）,三、神经干动作电位诱导及记录,刺激伪迹,刺激伪迹是刺激电流通过神经干扩散至两引导电极而形成的电位差信号。 1、会随着刺激强度的变化而不断变化 2、调换刺激电极的正负极,刺激伪迹图形会颠倒 3、处于刺激信号相对应位置 4. 在棉线上沾湿任氏液，依然可以出现刺激伪迹。,红线,黑线,白线,红线,白线,双相波为什么是不等幅的？,动作电位两相幅度不相等主要原因： 1.兴奋传导至细端时粗端尚未完全复极，因此相对电位差较兴奋传至粗端时低； 2.神经纤维数目不等。,Thank you！,
