1、农业生物技7R学报J01蛐aI ofA鲥cIlltIll嘲Biolechnolo】科27,15增刊:5254捕蝇草培养基改良木杨玲-”,葛红:,黄绵佳,李秋香:(1华南热带农业大学儋州571737,2中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京lO81)研究论文摘要:以Ms培养基为基础,通过改变基本培养基营养成分及外源激素配比,研究不同培养基对捕蝇草试管苗生长的影响。结果表明。培养基中大量元素量减少l2,捕蝇草的生长与生根情况得到改善;减少至l5,捕蝇草生长好于l尼MS。在不改变其它元素的前提下,仅用O哪I)毒沁代替Ms中的大量元素NHIN03,捕蝇草生长与生根情况最好。关键词:捕蝇草;组织培养;培养基h
2、nprovement of历0naea musc妒ua Culn鹏MediumYang“ng 1”,Ge H91,H1珀ng Mi柚-jial,Li Qiu-xi锄矿asDu曲Qt妇U丑j呻o,办艰蒯A础lIftl蝴两恸。珥57J73乃2血渤绍o,yegg啪蛔卸d只DwofQ胁e鼯Ade吐lyn以gr耙nm瑚J S瓯mc鸭Bt面证培JoDD8J,C她叫舳靠_西:To丘nd a be仕er mcdium f研Dionaea muscipula,we compared seveml di行醯即t呻es of medi啪iIl its cultIl糟n w勰shown tlmt tlle gfowI
3、ll锄d r00恤g ofDia nmipula咖ld be bett盯雒the锄伽m ofmacroelements decre鹊ed(MS一忱MSl5Ms),狮d mebest锄ongmewhM4N03、vas substit瞻、】l,ith(NW2s04inMsnis suggestcdthatMs-s04is mekttcrmedi啪than讲d锄afy董br Diaea mllipula乎nwIh and rootiIlg脚硼啊妇m娜币IIIa;Tis哪砌n玳;CllltIlre础dium捕蝇草(D矗)na埘us啦uza)为茅膏菜科(哟sc!豫ceae)捕蝇草属小型食虫植物,是一种具
4、独特魅力的观赏植物,也是一种抗癌药物原料(wLTeng,1999)。捕蝇草原产于美国北卡罗来纳州和南卡罗来纳州,自然生长在酸性、沼泽、营养贫乏的土壤上,是多年生常绿草本植物。株形矮小,其叶轮生,叶端长有一对贝壳状叶片,叶缘有蜜腺,叶面生有许多紫红色小腺体,可分泌消化液将捕得的昆虫分解并吸收(胡松华,2002)。由于捕蝇草叶端这一对可开合的捕虫叶片珍奇有趣,加上其玲珑可爱的株型,已愈来愈受到我国消费者的青睐。常置于无强光直射的书桌、几案、窗台或阳台上观赏,也可在庭院内专辟栽植槽,群丛栽培,别具一格。捕蝇草一般通过种子、扦插或分株进行繁殖,偶尔也可通过花梗单性生殖。但传统的繁殖方法增殖速度慢,难以
5、满足大量商品化生产的需求。通过组织培养则可解决这一问题,而目前对捕蝇草分化增殖的研究报道较少。我们在捕蝇草的培养基过程中,发现采用0吁U:s04代替Ms中的卜m料O,在不添加任何激素的情况下就可获得生长良好、根系粗壮的捕蝇草苗,并且增殖速度快这一现象。为有效提高捕蝇草的繁殖系数,设计本实验,对捕蝇草培养基进行改良,与目前研究报道提到的效果较好的培养基,及生产中常用的几种不同配方的培养基相对比,以选择简单实用的培养基配方用于捕蝇草的快速繁殖。1材料和方法|1实验材料捕蝇草(删onaea musc咖uJa)来自中国农业科学院蔬菜花卉研究所花卉组培室的捕蝇草苗。12实验方法121无菌苗的获得将捕蝇草
6、苗先用清水洗净,然后用01的升汞溶液消毒8 min,再用无菌水冲洗3次,将苗切分后接种到培养基中。122培养基配方分别采用MS、l2MS(大量元素减半,其余成份同MS)、15MS(大量元素用量为基金项目:基金项目:国家863项目“特色花卉高效育种与快繁技术”(24A2412);国家十五科技攻关计划“园艺作物现代化生产关键技术研究与示范”(No2004BA52lB02)。 “”通讯作者。Allmor for c0小:spd如研究员,主要从事花卉育种及组培快繁研究。En喊l:增刊 杨玲等:捕蝇草培养基改良 53MS的l5,其余成份同Ms)为基础培养基,不添加任何激素;设置不同激素浓度及配比。同时,
7、不添加任何激素,采用(NH泌04代替Ms中的NHNO,【以下用Msl科呦:s04表示】;KC培养基(不含Nl娜3)。详见表l。各处理均加入20gL蔗糖、48虮,卡拉胶,pH 5658。表1不同培养基配方Table l Di伍:啪t alInlm m烈Ii衄处理编号培养基Nu m:b盱C!lIlnlle n吣di岫处理瓶数Plant8123培养条件培养室温度为日温282、夜温222,光照12枷,光照强度152500l】【。124结果观察每3 d观察一次,分别于接种后15 d、30 d统计其生长情况、生根率及根系长度。并拍照记录。2结果与分析21不同培养基与激素浓度对捕蝇草苗生长的影响在上述培养基
8、中可观察到接种后第15 d,接种在Ms、MS+6BA05 mgL +N蛆O2mgL、MS+6BAlO mgL+N气A02叫儿培养基上的外植体均生长不良。在l5MS、KC及MS-(NI均:S04培养基上生长较好,其中尤以MS:s04培养基上的植株叶色油绿、生长茂盛。在MS、抛MS及l5MS三种基础培养基处理中,随着大量元素的减少,捕蝇草有生长情况渐好的趋势。22不同培养基及不同激素浓度对捕蝇草苗生根的影响从表2可以看出,处理7、8、9以l,5MS为基础的三种培养基对于捕蝇草生根均有明显的促进作用,在接种后30 d生根率分别达到7333、5667及7667,以l5Ms为基础培养基的各处理的生根情况
9、均好于以MS及12MS为基础培养基的各处理。处理1l的生根率为9667,是所有处理中最好的。23 MS(NH4)2s04培养基对捕草生长影响的观察直接种在MS培养基上的捕蝇草从接种后第15 d就已观察到生长不良、外植体发红萎蔫、濒临死亡等现象。将在MS培养基中生长不良的捕蝇草苗分别转入新的MS培养基和MS(NlL):S04中继续培养,在新的MS培养基中的捕蝇草生长仍不良,培养30 d后逐渐衰弱死亡;而转入以(Nl王I垮04代替Ms中:s04的培养基后,培养15d时即观察到叶片逐渐变绿,直至分化幼苗全部正常、生长良好,并迅速增殖(图l6)。3讨论本实验结果表明,捕蝇草在所有以MS为基础培养基的处
10、理上生长不良,无法达到快速繁殖的目的。即在盐浓度相对较高的培养基上,捕蝇草生长不良乃至死亡,这一结果与陈贤兴(2001)的研究是一致的。在MS、抛MS及协MS为基础培养基的处理中,捕蝇草生长势有随大量元素的减少而提高的趋势;而在采用心H泌0“15 gL)代替MS培养基大量元素中裹2不同培养基及不同激素浓度对捕蝇蕈苗生长的影响T曲le2E仃ectofdi鼬舭蛳曲manddil钕哪嗽肭砸ofho皿伽e帆Di饥珊随嘲ipIIla掣owm接种后15d 15d an盯inI鼢llati蛐 接种后30d 3艏an盯iculali傩处理编号生根情况 生根率惕 根系长度 生根情况 生根率肋 根系长度NlImb
11、廿黜咖黜喇ra钯tleng:lh黜咖lt咖ralctl蛐g山生长情况:生长不良-;生长一般+;生长较好+;生长良好卅生根情况:一无生根;+根长O5 cm;+根长O5伽;卅根系生长旺盛且长度I锄盈麓罔1存耀培养罄fMsjl生睦小良 翻2在MsfNH如s()。培养基l牛妊旰啦 罔3转Ms培养基后()dHB J Bad矿。州h onMsmcdmm F唔2(;。州口”、h onMsrNH02s0。m甜m F19 3 or。叭h a船r 30 d onMsmcdlum嘲4转入M鼬:NL埔仇后30 dFig 4 Gmwm amr 30 d 0nMS一(NH如S01edIu”图5转Ms培养基后90dFlg
12、5 amwm疵r 90d 0nMSm耐lum的NH|NO,(33【)的处理中捕蝇草生、生根最好,此结果束见村同|;l遗但(NH如sO。,白利于捕蝇革1_l=_妊和生根这现象,妊由于培养基中N兀采音i建变参考文献cheIlxx(陈贤兴),chcTl Yf陈勇粕dl肌GK(刘光凯)s州l器on hpid P00pa刚ons ofDmau1pula(J)n,un曲ou T钿曲m(-峰(温州师范学院学撤J200l 22(3)4951(1n chmcm Engll“ah,hct)图6转Ms-(Nmso。后90 dn96 Omwm搬r 90d 0nMs一州H02so皿edlum化,或者NfL、NO、禽髓堂
13、化,还是sn的青变化所引起,还有待进步深人研究:Hu sH(胡橙华)Flowa吖叩j other叩ec螂(M)Bculngchm Foms廿y Publ JshgHon#,2003“nchmese)W L 1hg Soce,etloIatld onmtl佃of鼯pl蛐b a抵Immmgcne嘣lon of Vny-姐p(niopula J(J】P抽r“R唧慨1999,18:363368捕蝇草培养基改良作者: 杨玲, 葛红, 黄绵佳, 李秋香作者单位: 杨玲(华南热带农业大学 儋州 571737 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 北京 100081), 葛红,李秋香(中国农业科学院蔬菜花卉研究所 北
14、京 100081), 黄绵佳(华南热带农业大学 儋州 571737)本文读者也读过(8条)1. 于金平.夏冰.任全进.佟金凤.图跃强.何淑兰.YU Jin-ping.XIA Bing.REN Quan-jin.TONG Jin-feng.TU Yue-qiang.HE Shu-lan 捕蝇草组织培养苗栽培试验研究期刊论文-江苏林业科技2007,34(4)2. 于金平.任全进.夏冰.佟金凤 捕蝇草组织培养与快速繁殖研究期刊论文-江苏农业科学2008(1)3. 于金平.邓飞.任全进.夏冰 捕蝇草组培苗移栽技术期刊论文-现代农业科技2008(18)4. 余慧琳.胡月华.Yu Huilin.Hu Yu
15、ehua 维纳斯捕蝇草及其叶片离体快繁技术研究期刊论文-生物学通报2009,44(3)5. 陈贤兴.陈勇.刘光凯 捕蝇草的快速繁殖技术研究期刊论文-温州师范学院学报2001,22(3)6. 曾宋君.彭晓明.张京丽.赵逢畔.ZENG Song-Jun.PENG Xiao-ming.ZHANG Jing-Li.ZHAO Feng-Pan 捕蝇草的组织培养和快速繁殖期刊论文-植物生理学通讯2000,36(3)7. 王瑾怡.陈军峰.开国银.周根余.WANG Jin-yi.CHEN Jun-feng.KAI Guo-yin.ZHOU Gen-yu 捕蝇草叶的组织培养期刊论文-上海师范大学学报(自然科学版)2007,36(3)8. 方白玉.郑秋桦 食虫植物捕蝇草叶片的组织培养期刊论文-植物生理学通讯2002,38(6)引用本文格式:杨玲.葛红.黄绵佳.李秋香 捕蝇草培养基改良会议论文 2007