1、1猪传染性胸膜肺炎的血清学调查摘要:为了解本地生猪传染性胸膜肺炎感染情况,作者应用 ELISA 试 验 对 本 市 15 个 规 模猪 场 共 计 300 份血清样品进行猪传染性胸膜肺炎抗体监测,结果显示: 被检样品猪传染性胸膜肺炎抗体阳性率为 0-30%,平均为 14.33,表明本地规模猪场有猪 传染性胸膜肺炎感染,情况不容乐观。关键词:猪,传染性胸膜肺炎,血清学调查猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌( aetinobacillus pleuropneumoniae, APP)引起的以出血性纤维素性胸膜炎为病理特征的一种严重的呼吸道传染病,能引起猪急性纤维素性胸膜肺炎或慢性局部坏死性肺炎
2、1。该病是由英国 Paffion在 1957 年首次发现并报道,以前称为副猪嗜血杆菌病(Hpp) 2。在我国,哈尔滨兽医研究所于 1987 年发现临诊病例,杨旭夫于 1990 年对此进行了首次报道 2。1990 年我国首次确诊,现已成为集约化猪场常见病之一,大多数养猪国家和地区中均有不同程度的发生和流行,我国已有 2O 多个省市报道有该病的存在。本病一旦发生则很难根除,且易与其他疫病(如伪狂犬病)混合感染,可给养猪业造成巨大经济损失 3,此病已引起业界的高度关注。为了解本病在江苏省淮安市的感染情况,以便确定预防和控制该病的有效方案,笔者在该地区进行了猪传染性胸膜肺炎的血清学调查,现将结果报告如
3、下: 材料与方法1.1 材料1.1.1 诊断试剂 猪传染性胸膜肺炎 Apx-ELISA 抗体检测试剂盒,武汉科前动物生物制品有限责任公司生产,批号:120401,购自江苏力通生物技术有限公司。1.1.2 被检血清 猪血清 300 份,采自淮安市清浦区、淮安区、淮阴区、涟水、洪泽、盱眙、金湖 7 个县(区) ,被检猪场均没有注射该病疫苗;前腔静脉采血后自然凝固,分离血清,各血清样品清亮,无溶血,置冰箱保存备用。1.1.3 试验仪器酶标检测仪,洗涤器,50l、100l 精确微量移液器,一次性移液器吸头,稀释样品的U 型 96 孔稀释板等。1.2 监测方法1.2.1 配制洗涤液 将浓缩的洗涤液恢复至
4、室温(25左右) ,并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水作20 倍稀释。1.2.2 待检血清和对照稀释 待检血清在血清稀释板中按 1:40 的比例稀释,对照血清在血清稀释板中按 1:4 的比例稀释。1.2.3 操作步骤 1.2.3.1 取抗原包被板,将稀释好的待检血清、阴性对照和阳性对照各取 100l加入到抗原包被板中,阴、阳性对照各设 2 孔。轻轻振匀孔中样品,置 37下温育 30 分钟。1.2.3.2 甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗板 5 次,200l/孔,每次静置 3 分钟后倒掉液体,并在干净吸水纸上拍干。21.2.3.3 每孔加羊抗猪酶标二抗 100l,置 37下温育 30 分钟。1.2.
5、3.4 洗涤 5 次,方法同 1.2.3.2。1.2.3.5 每孔加底物液 A、底物液 B 各 1 滴(约 50l) ,混匀,置室温下(2025)避光显色 10 分钟。1.2.3.6 每孔加终止液 1 滴(约 50l) ,10 分钟内测定结果。1.3 判定 在酶标仪上测各孔 OD630nm 值。试验成立的条件是:阳性对照孔 OD630nm 值均0.6,且小于 1.6;阴性对照孔 OD630nm 值均0.3。如果 S(样品孔 OD630nm 值) P(阳性对照孔平均 OD630nm 值)0.25,判为阳性;如果SP0.25 ,则判为阴性。 监测结果监测结果详见表 1表猪传染性胸膜肺炎 Apx-E
6、LISA 抗体检测结果场名 监测数 阳性数 血清抗体阳性率(%)楚复 20 3 15楚徐 20 4 20洪富 20 2 10洪种 20 2 10淮种 20 0 0金绿 20 2 10金天 20 2 10金总 20 3 15涟宏 20 4 20涟寿 20 5 25涟野 20 4 20浦黄 20 0 0浦盐 20 0 0盱古 20 6 30盱穆 20 6 30合计 300 43 14.333 讨论本文作者首次对江苏淮安地区猪场的猪传染性胸膜肺炎进行血清调查,证实了淮安市规模猪场中存在猪传染性胸膜肺炎感染,被检猪场该病的阳性率平均为 14.33%,15 个被检猪场,有 12 个检出阳性,猪场阳性率
7、80%(12/15)。据 任荣清, 蔡一鸣, 杨莉等报道,贵州猪传染性胸膜肺炎感染率为 10%90%,平均阳性率为 38.5% 4,周锦萍、孙泉云、沈悦鞠等对上海地区 13 个种猪场传染性胸膜肺炎的血清学调查表明,有 11 个猪场存在猪传染性胸膜肺炎的感染,阳性猪场高达 84.6,各场阳性率从 0至 90不等,平均阳性率为30.3 5,淮安的阳性率明显低于贵州和上海的平均水平。本次监测结果表明,淮安市部分猪场感染率较高,达到 30%,部分猪场没有检出阳性猪,说明部分猪场防疫工作搞得较好,部分猪场防疫工作相对薄弱,尚需进一步加强。淮安市是全国养猪重点地区,尽管感染率相对比较低,但是外界形势不容乐
8、观,仍然应该对该病给予足够重视。要加强对种猪的管理,杜绝本病随种猪蔓延。强化检疫管理,3从外界引进种猪和仔猪时,必须严格检疫,谨防从外界引进病原。搞好猪场各项综合防控工作,严 格 消 毒 管 理 , 建 立 完 善 的 生 物 安 全 体 系 , 尊敬的读者,如果您申报职称,需要发明专利证书或实用新型专利证书 ,请联系 qq 908972841,手机 13905236606 可以为您提供帮助.科 学 免 疫 , 合 理 用 药 , 加 强 疫 病 监 测 , 及 时 诊 断 治 疗 , 及 时 隔 离 淘 汰 疑 似病 例 , 防止该病在本地猪场扩散蔓延。参 考 文 献 :1 杨旭夫,彭发泉胸膜肺炎嗜血杆菌的分离和鉴定中国畜禽传染病,1990,(4):1-32 王 伟.猪传染性胸膜肺炎的检测与诊断方法.上海畜牧兽医通讯,2009,(2):26-283 曾超.猪传染性胸膜肺炎的诊断与防治.中国动物检疫,2009, 26(4):64-674 猪传染性胸膜肺炎的血情学抽样调查. 任荣清, 蔡一鸣, 杨莉等,贵州畜牧兽医,2008,32(1):13-145周锦萍,孙泉云,沈悦鞠等,上海地区种猪场传染性胸膜肺炎的血清学调查.上海畜牧兽医通讯,2004,(6):20