1、二氧化硫残留量测定法本法系用酸碱滴定法、气相色谱法、离子色谱法分别作为第一法、第二法、第三法测定经硫黄熏蒸处理过的药材或饮片中二氧化硫的残留量。可根据具体品种情况选择适宜方法进行二氧化硫残留量测定。第一法(酸碱滴定法)本方法系将中药材以蒸馏法进行处理，样品中的亚硫酸盐系列物质加酸处理后转化为二氧化硫后，随氮气流带入到含有双氧水的吸收瓶中，双氧水将其氧化为硫酸根离子，采用酸碱滴定法测定，计算药材及饮片中的二氧化硫残留量。仪器装置 如图 1。A 为 1000ml 两颈圆底烧瓶；B 为竖式回流冷凝管；C为（带刻度)分液漏斗；D 为连接氮气流入口；E 为二氧化硫气体导出口。另配磁力搅拌器、电热套、氮气
2、源及气体流量计。测定法 取药材或饮片细粉约 10g(如二氧化硫残留量较髙，超过1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于 5g)，精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水 300400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端 E 口处连接一橡胶导气管置于 100ml 锥形瓶底部。锥形瓶内加入 3%过氧化氢溶液 50ml 作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下） 。使用前，在吸收液中加入 3 滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml)，并用 0.01mol/L 氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液） 。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约 0.2L/min
3、；打开分液漏斗 C 的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml 流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾 1.5 小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L)滴定，至黄色持续时间 20 秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。照下式计算：供试品中一氧化硫残留量(g/g)= WcBA61032.（式中 A 为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积， ml；B 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml；c 为氢氧化钠滴定液摩尔浓度，mol/L；0.032 为 lml 氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g；W 为
4、供试品的重量， g。第二法（气相色谱法）本法系用气相色谱法（通则 0521)测定药材及饮片中的二氧化硫残留量。色谱条件与系统适用性试验采用 GS-GasPro 键合硅胶多孔层开口管色谱柱（如 GS-GasPro，柱长 30m，柱内径 0.32mm)或等效柱，热导检测器，检测器温度为 250。程序升温：初始 50C，保持 2 分钟，以每分钟 20：升至 200C，保持 2 分钟。进样口温度为 200，载气为氦气，流速为每分钟 2.0ml。顶空进样，采用气密针模式（气密针温度为 105C)的顶空进样，顶空瓶的平衡温度为 80C，平衡时间均为 10 分钟。系统适用性试验应符合气相色谱法要求。对照品溶
5、液的制备 精密称取亚硫酸钠对照品 500mg，置 10ml 量瓶中，加入含 0.5%甘露醇和 0.1%乙二胺四乙酸二钠的混合溶液溶解，并稀释至刻度，摇匀，制成每 lml 含亚硫酸钠 50.0mg 的对照品贮备溶液。分别精密量取对照品贮备溶液 0.1ml、0.2ml、0.4ml、lml、2ml，置 10ml 量瓶中，用含 0.5%甘露醇和 0.1%乙二胺四乙酸二钠的溶液分别稀释成每 lml 含亚硫酸钠0.5mg、lmg、2mg、5mg、10mg 的对照品溶液。分别准确称取 lg 氯化钠和 lg固体石蜡（熔点 5256C)于 20ml 顶空进样瓶中，精密加人 2mol/L 盐酸溶液2ml，将顶空瓶
6、置于 60水浴中，待固体石蜡全部溶解后取出，放冷至室温使固体石蜡凝固密封于酸液层之上（必要时用空气吹去瓶壁上冷凝的酸雾） ；分别精密量取上述 0.5mg/ml、lmg/ml、2mg/ml、5mg/ml 、10mg/ml 的对照品溶液各100l 置于石蜡层上方，密封，即得。供试品溶液的制备 分别准确称取 lg 氯化钠和 lg 固体石蜡（熔点 5256C)于 20ml 顶空进样瓶中，精密加人 2mol/L 盐酸溶液 2ml，将顶空瓶置于 60C水浴中，待固体石蜡全部溶解后取出，放冷至室温使固体石蜡重新凝固，取样品细粉约 0.2g，精密称定，置于石蜡层上方，加人含 0.5%甘露醇和 0.1%乙二胺四
7、乙酸二钠的混合溶液 100l，密封，即得。测定法 分别精密吸取经平衡后的对照品溶液和供试品溶液顶空瓶气体lml，注人气相色谱仪，记录色谱图。按外标工作曲线法定量，计算样品中亚硫酸根含量，测得结果乘以 0.5079，即为二氧化硫含量。第三法(离子色谱法) 本方法将中药材以水蒸气蒸馏法进行处理，样品中的亚硫酸盐系列物质加酸处理后转化为二氧化硫，随水蒸气蒸熵，并被双氧水吸收、氧化为硫酸根离子后，采用离子色谱法(通则 0513)检测，并计算药材及饮片中的二氧化硫残留量。仪器装置 离子色谱法水蒸气蒸馏装置如图 2。蒸馏部分装置需订做，另配电热套。色谱条件与系统适用性试验 采用离子色谱法。色谱柱采用以烷醇
8、季铵为功能基的乙基乙烯基苯-二乙烯基苯聚合物树脂作为填料的阴离子交换柱（如AS11-HC，250mmX4mm)或等效柱，保护柱使用相向填料的阴离子交换柱（如AG11-HC，50mmX4mm)，洗脱液为 20mmol/L 氢氧化钾溶液（由自动洗脱液发生器产生若无自动洗脱液发生器，洗脱液采用终浓度为3.2mmol/LNa2CO3，1.0mmol/LNaHCO 3 的混合溶液；流速为 lml/min，柱温为30。阴离子抑制器和电导检测器。系统适用性试验应符合离子色谱法要求。对照品溶液的制备 取硫酸根标准溶液，加水制成每 lml 分别含硫酸根lg/ml、5g/ml、20g/ml、50g/ml，100g
9、/ml、200g/ml 的溶液，各进样10l，绘制标准曲线。供试品溶液的制备 取供试品粗粉 510g(不少于 5g)，精密称定，置瓶A(两颈烧瓶）中，加水 50ml，振摇，使分散均勻，接通水蒸气蒸馏瓶 C。吸收瓶 B(100ml 纳氏比色管或量瓶）中加入 3%过氧化氢溶液 20ml 作为吸收液，吸收管下端插入吸收液液面以下。A 瓶中沿瓶壁加人 5ml 盐酸，迅速密塞，开始蒸馏，保持 C 瓶沸腾并调整蒸馏火力，使吸收管端的馏出液的流出速率约为2ml/min。蒸馏至瓶 B 中溶液总体积约为 95ml 时间 3040 分钟） ，用水洗涤尾接管并将其转移至吸收瓶中，并稀释至刻度，摇匀，放置 1 小时后，以微孔滤膜滤过，即得。测定法 分别精密吸取相应的对照品溶液和供试品溶液各 10ml，进样，测定，计算样品中硫酸根含量，按照（SO 2/ =0.6669)计算样品中二氧化硫的4SO含量。
