1、氨基酸螯合铁的制备及分析一、 实验原理：通过氨基酸与硫酸亚铁在一定的比例、温度、PH的条件下制备氨基酸螯合铁，并对合成物利用分光光度法测定螯合率。二、 实验药品：复合氨基酸、七水合硫酸亚铁、乙酸钠、邻二氮菲、盐酸羟胺、无水乙醇、氢氧化钠、D-异抗坏血酸钠三、 实验步骤1.1 氨基酸螯合铁的制备1. 称取 5.00g 氨基酸放于锥形瓶内，加入约 0.667g 的 D-异抗坏血酸钠作为抗氧化剂，并加入1.26g（0.00828947mol ）的硫酸亚铁，加入 6.67ml 蒸馏水溶解并用保鲜膜封紧瓶口反应 10min 左右。2. .氨基酸螯合铁的螯合率测定2.1 铁标准曲线的绘制以 0.1242g
2、 七水合硫酸亚铁（分析纯0.000446762mol）配置 0.1000mg/mL 的 Fe 标准溶液，从中用移液管取 10.00mL 溶液移至 100mL 容量瓶中，再加入 2.00mL2mol/LHCl，用水稀释至刻度，得到10g/mL 的 Fe 标准溶液。在 5 个 50mL 容量瓶中分别加入0.00mL，2.00mL，4.00mL ，6.00mL，8.00mL 浓度为10g/mL 的 Fe 标准溶液，再分别加入 1.00mL 盐酸羟胺（10%） ，2.00mL 邻二氮菲（0.15%） ，5mL 乙酸钠溶液（1mol/L） ，每加一种试剂后摇匀。最后用溶剂（蒸馏水和乙醇按一定比例（9:1
3、？）配置）稀释至刻度，摇匀，放置 10min。以空白试剂（未加铁的溶液）为参比，在 510nm 的波长下，测量各溶液的吸光度，以铁量为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线如下：线性方程为 A=0.0044+0.213c（2）测定游离铁离子的吸光度用移液管取 10mL 步骤一中的滤液，加入 90mL 无水乙醇，于超声仪中超声萃取 15min，然后离心分离，取清液转移至 250mL 容量瓶中，定容摇匀。分别从中取 10mL 加入两个 50mL 容量瓶中，编号 1,2,1 中加入1.00mL 盐酸羟胺（10%） ，2.00mL 邻二氮菲（0.15%） ，5mL 乙酸钠溶液（1mol/L） ；2 中加入 1.00mL 盐酸羟胺（10%） ，5mL 乙酸钠溶液（1mol/L） ，作为空白对照，设定吸光度为 510nm，测定溶液吸光度。（3）计算螯合率由线性方程及吸光度可计算得稀释后的溶液浓度c1=（A-0.0044 ）/0.213然后可计算出稀释前反应后溶液浓度 c2= c1125然后计算出反应后溶液中游离铁离子质量 m1= c2V又反应体系中铁离子总量 m2=（铁的摩尔质量/ 七水合硫酸亚铁的摩尔质量）称取的七水合硫酸亚铁盐的质量=（56/278.02）1.8020最后计算出螯合率 w=1- m1/ m2
