1、XE-2100 操作程序1 仪器简介XE-2100 是日本 Sysmex 公司生产的全血细胞分析仪，是目前世界上速度最快的血液分析仪器，每小时可检测 150 个样品。它不仅能够满足检测大批量样品的需求，还可以为临床提供更多的检测信息，应用最先进的检测原理核酸荧光染色，分析并输出血液样品中包括有核红细胞（NRBC） 、造血祖细胞（HPC） 、未成熟粒细胞（IG）等 32 个参数和 4个参数的研究数据。为了得到更准确可靠的结果，专门设立了 IMI 通道对幼稚细胞进行检测，使幼稚细胞的筛选更为灵敏、准确；白细胞采用双通道计数，对于溶血不良的样品，可在嗜碱通道中用高浓度的溶血素进行检测，排除了未溶红细
2、胞对白细胞检测的干扰。另外 XE-2100 创造性地配备了两个血小板检测通道，分别用阻抗法和光学法进行检测，进一步保证了病理状态下血小板检测结果的准确性。.2 分析原理XE2100 血细胞分析仪采用了细胞化学染色；半导体激光的流式细胞技术原理；射频/阻抗分析术原理；鞘流阻抗分析技术，独特的 SLS 血红蛋白分析进行血液检测。2.1 半导体激光流式细胞技术原理XE2100 采用一束半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分，即前向散射光，侧向散射光和侧向荧光。前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物，如核和颗粒，侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）含
3、量。2.2 DIFF 通道STROMATOLYSER-4DL 试剂的表面活性剂可溶解和破坏红细胞和血小板，并在白细胞膜上打出小孔。STROMATOLYSER-4DS 试剂的聚次甲基染料可进入破损白细胞，与核酸和细胞器结合，经波长 633nm 的激光照射，所产生荧光强度与细胞核酸含量成正比。采用半导体激光器用流式细胞计数法，根据对侧向散射光和侧向荧光信号的检测，从而将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、 单核细胞和嗜酸性粒细胞。2.3 WBC/BASO 通道酸性试剂可引起除嗜碱性粒细胞外的红细胞（影红细胞），血小板（影血小板）溶解，白细胞（裸核）皱缩。因而此通道可检测白细胞数和嗜碱性粒细胞数。在 S
4、TROMATOLYSER-FB 试剂中的表面活性剂作用细胞可形成影红细胞，影血小板和除嗜碱性粒细胞外的裸核白细胞。采用半导体激光器用流式细胞计数法，根据前向散射光和侧向散射光信号，使嗜碱性粒细胞和其他细胞因容积差异而区分。嗜碱性粒细胞和裸核数之和代表白细胞总数。结合 DIFF 通道的结果，将白细胞进行完整分类。2.4 NRBC 通道在 NRBC 通道中，STROMATOLYSER-NR 试剂中表面活性剂可溶解红细胞膜，仅留下有核红细胞核，白细胞、膜不被溶解，胞质完整。在 STROMATOLYSER-NR 试剂中的聚次甲基荧光染料，可渗入白细胞胞膜，使细胞器染上颜色。采用半导体激光器用流式细胞计
5、数法，根据对前向散射光和侧向荧光信号的检测计数有核红细胞。2.5 SLS 血红蛋白测定通道SLS-Hb 检测血红蛋白方法应用十二烷基硫酸钠作为反应剂。其反应机制包括：红细胞溶血破坏、球蛋白的构象发生改变、Fe 2+的氧化、形成 SLS-Hb。SLS-Hb 在用光度计检测时，其最大吸收峰在 535nm，肩峰在 560nm。2.6 RET/PLT-O 检测通道采用半导体激光器用流式细胞计数法对经 RET SEARCHIIDYE 稀释液稀释后，由 RET SEARCHIIDYE 染色液染色的样本进行检测，根据对前向散射光和侧向荧光信号的检测，计数出网织红细胞和血小板。根据荧光强度的不同将网织红细胞分
6、为三个亚型：低荧光强度网织红细胞比率、中荧光强度网织红细胞比率、高荧光强度网织红细胞比率。中荧光强度网织红细胞比率和高荧光强度网织红细胞比率即为未成熟网织红细胞比率。激光法对 PLT的形态鉴别能力强，异常标本中的小 RBC、WBC 碎片、大 PLT 或 PLT 数目较少时，激光法能更准确地将 PLT 鉴别出来。2.7 IMI 检测通道幼稚细胞检测通道。采用 RF/DC 检测方法，STROMATOLYSER-IM 溶解红细胞、血小板、成熟白细胞，粒系幼稚细胞保持原状，射频技术用于测量细胞内容物(颗粒量，粒度粗细，形状等)，阻抗技术用于分析细胞大小，从而给出未成熟细胞的信息。2.8 RBC/PLT
7、 通道应用双鞘流阻抗技术，保证血样从微孔的正中通过，消除重合通过产生的异常波形，保证结果(RBC,Hct,PLT)的准确性、重复性。根据 RBC,PLT 通过计数小孔时，脉冲的多少和高低，来计数 RBC,PLT 数。2.9 红细胞、血小板各指数的计算由 RBC、HGB 和 HCT 计算红细胞的常数（平均红细胞体积，平均红细胞内血红蛋白含量和红细胞内血红蛋白的浓度） 平均红细胞体积（MCV）使用下列方程，由 RBC 和 HCT 计算 MCVHCT（%） MCV（fl）=10RBC（106/微升）平均红细胞内血红蛋白含量（MCH）使用下列方程，由 RBC 和 HGB 计算 MCH：HGB（克/分升
8、）MCH（pg）=10RBC（106/微升）红细胞内血红蛋白的平均浓度（MCHC）使用下列方程，由 RBC 和 HGB 计算 MCHC：HGB（克/分升）MCHC（克/分升）=100HCT（%）平均血小板体积（MPV）PCT（%） MPV（fl）=10PLT（103/微升）2.10 检测参数网织红细胞百分比：网织红细胞去区内的细胞计数RET%=100（成熟 RBC 区中的细胞计数+网织红细胞区的细胞计数）网织红细胞计数：RET%RBCRET#= 100 低荧光强度百分比：LFR=100-HFR-MFR中荧光强度百分比：MFR 区的细胞计数MFR=100网织红细胞区的细胞计数高荧光强度百分比：H
9、FR 区的细胞计数HFR=100网织红细胞区的细胞计数未成熟网织红细胞比率：IRF=MFR+HFRLFR：低荧光强度百分比MFR：中荧光强度百分比HFR：高荧光强度百分比IRF：未成熟网织红细胞比率3、基本资料与性能参数3.1 仪器基本性能资料生产商：日本 Sysmex 公司分类：五分类标本量：进样器模式和手动密闭管模式大约 200 微升,手动模式大约 130 微升，末梢血模式大约 40 微升。基本原理：细胞化学染色；半导体激光的流式细胞技术；射频/阻抗分析术；鞘流阻抗分析技术；独特的 SLS 血红蛋白分析；专门试剂、通道及散点图技术。进样方式：手动模式、末梢血模式、使用进样器装置的进样器模式
10、和手动密闭管模式。测试速度：CBC 每小时大约 150 个样品CBC+WBC5diff 每小时大约 150 个样品CBC+WBC5diff+NRBC 每小时大约 150 个样品CBC+WBC5diff+NRBC+RET 每小时大约 113 个样品CBC+WBC5diff+RET 每小时大约 113 个样品CBC+RET 每小时大约 113 个样品3.2 仪器工作环境要求温度范围：15-30C相对湿度：45-85%电压范围：200-240VAC 频率：50/60Hz3.3 线性范围和不精确度（表 1）全血模式WBC：在+-2.0%或+-0.2103/毫升范围内（0-100.0103/毫升）RBC
11、：在+-2.0%或+-0.03106/毫升范围内（0-8.00106/毫升）HGB：在+-2.0%或+-0.2 克/分升范围内（0.0-25.0 克/分升）HCT：在+-2.0%或+-1.0HCT%范围内（0.0-60.0HCT%）PLT：在+-5.0%或在+-10103/毫升范围内（0-1000103/毫升）（取决于 RBC 的浓度，该值可能不在上述范围内）RET：在+-20%或+-0.3RET%范围内（0.0-15%）（取决于 RBC 的浓度，该值可能不在上述范围内。）3.4 分析参数XE 2100 装置用于分析血液样品的下列 32 个参数。另外，还分析了用于研究的 4 个参数。分析参数
12、缩写 分析参数 缩写白血细胞计数 单核细胞计数 MONO#红血细胞计数 RBC 嗜酸细胞计数 EO#血红蛋白 HGB 嗜碱细胞计数 BASO#红细胞压积 HCT 有核红细胞计数 NRBC#平均红细胞体积 MCV 红细胞分布宽度-SD 值 RDW SD平均血红蛋白含量 MCH 红细胞分布宽度-CV 值 RDW CV平均血红蛋白浓度 MCHC 血小板分布宽度 PDW血小板计数 PLT 平均血小板体积 MPV中性粒细胞百分比 NEUT% 大血小板比率 P LCR淋巴细胞百分比 LYMPH% 血小板压积 PCT单核细胞百分比 MONO% 网织红细胞百分比 RET%嗜酸细胞百分比 EO% 网织红细胞计数
13、 RET#嗜碱细胞百分比 BASO% 未成熟网织红细胞比值 IRF有核细胞百分比 NRBC% 低荧光强度网织红细胞比值 LFR中性粒细胞计数 NEUT# 中荧光强度网织红细胞比值 MFR淋巴细胞计数 LYMPH# 高荧光强度网织红细胞比值 HFR根据鞘流 DC 检测方法和流式细胞计数方法（使用一个半导体激光器） ，XE - 2100 对 PLT 进行分析，并且提供较高质量的分析结果（在随机任选分析时选择 RET 分析） 。用于研究的参数 缩写未成熟粒性细胞百分比 IG%未成熟粒性白细胞计数 IG#造血祖细胞百分比 HPC%造血祖细胞计数 HPC#3.5 测定干扰因素严重脂血、黄疸和溶血对血红蛋
14、白有一定程度的干扰。4、试剂试剂 缩写 分析的样品数目 每个试剂瓶的容积CELLPACK EPK 大约 650 个样品 20 升CELLSHEATH ESE 大约 8600 个样品 20 升STROMATOLYSER FB FBA 大约 2700 个样品 5 升STROMATOLYSER 4DL FFD 大约 2700 个样品 5 升STROMATOLYSER 4DS FFS 大约 2000 个样品 42 毫升STROMATOLYSER NR（溶血素） 大约 550 个样品 1 升STROMATOLYSER NR（染料溶液）SNR大约 550 个样品 12 毫升SULFOLYSER SLS 大
15、约 10000 个样品 5 升STROMATOLYSER IM SIM 大约 1800 个样品 5.7 升RET SEARCH （II ） （稀释剂） 大约 550 个样品 1 升RET SEARCH （II ） （染料溶液）RED大约 550 个样品 12 毫升分析的样品数表示在 CBC + WBC 5diff + NRBC + RET 分析模式可以分析的样品数目，该样品数目随分析模式而改变。试剂组成：稀释液、清洗液、溶血剂、酶清洗液贮存条件：除酶清洗液贮存于 2-8C 外，其余均室温贮存。5.授权操作人检验科培训合格人员6.仪器的常规操作6.1 开机程序6.1.1 首先打开信息处理装置（I
16、PU）的电源。6.1.2 当显示 IPU 程序的登录（logon）屏幕以后，输入登录名称和口令，按确认键进入。6.1.3 然后再开主机电源。在液晶屏幕上将显示信息“请稍候”后，仪器进行微处理器检查，机械部件检查，温度检查和空白检查。如果背景值小于或等于表中显示的值，该空白检查可接受。6.1.4 完成空白检查以后，即显示登录屏幕，输入登录名称和口令，按确认键进入。6.1.5 主机上的准备就绪发光二极管处于发光状态时，表示仪器处于等待分析状态。6.2 执行质量控制分析。6.2.1 将质控物从冰箱取出，在机器上混匀 15 分钟，直至沉积的血细胞完全均匀分散开。6.2.2 在系统处于准备就绪状态时，由
17、主菜单屏幕上，选择功能菜单上的“质量控制（QC） ”，即显示质量控制菜单屏幕。6.2.3 由质量控制菜单屏幕上，选择功能菜单上的“执行质量控制（Exec QC） ”。6.2.4 质量控制选择屏幕，显示出一份质量控制文件清单。选择您想输入分析结果的文件编号，并在功能菜单上选择“选择（Select） ”。6.2.5 按常规标本手动开管模式进行分析即可。6.2.6 质控分析完毕，质控标本必须及时放回冰箱原位。每日开机测定一次质控物，结果在允许范围内方可进行日常血常规标本的测定。6.2.7 同时在常规测定进程中每 20 个测定标本中插入一正常新鲜血标本作为参考标本，与常规样本共同测定，每个标本测定次数
18、在 5-8 次之间，总测定时间不超过 5h。测定期间参考标本始终保存在室温条件下。6.2.8 用多次定点插入和测定参考标本的方式监控仪器多时间点上的工作状态和稳定性。引入用于表达精密度方法中的相对偏差的概念，用于观察参考标本作为一日内室内质控参考标本的可行性，动态观察仪器每个时段的工作情况。6.3 常规标本的上机检测6.3.1 手动模式6.3.1.1 在系统处于准备就绪状态时，按主机键盘面板上的手动（MANUAL）键。6.3.1.2 使用数字键输入与测定管相同的样品识别号，然后下移光标选择“manual”分析模式，再下移光标选择项目组合，最后按主机面板上的“enter”键确认。6.3.1.3
19、颠倒试管，将样品管彻底混合。6.3.1.4 打开试管盖，将样品管置于取样针中；然后按开始（START）开关（当准备就绪（READY）发光二极管闪烁时，切勿取下样品管；此时正在吸出样品）。6.3.1.5 当准备就绪发光二极管熄灭，并且连续俩次发出短促的蜂鸣，既可取下样品管，进样完成，仪器自动进行分析测定。6.3.2 自动进样器模式6.3.2.1 在系统处于准备就绪状态时，按主机键盘面板上的进样器（sampler键。6.3.2.2 使用数字键输入与测定管相同的样品识别号，然后下移光标输入样品架编号和管位置编号，再下移光标选择项目组合。6.3.2.3 将样品放在样品架中，将样品架置于进样器后侧的进样
20、槽中。一次最多可装入 10个样品架。注意：如果一个样品在一种稳定状态下停留 4 个小时以上，其中的血细胞和血清就会分开，由于混合不够可能导致得到的分析结果不正确，所以。分析这些样品时，应保证将样品彻底混合，再装入进样器中。6.3.2.4 在进样器的样品编号设置屏幕中的功能菜单上选择启动 START 键或再按一次进样器（sampler键，即开始进行样品分析。6.4 结果的传送标本检测完毕后，结果自动将传入打印报告的计算机上。当需要重新传送结果时，须在 IPU 的主屏幕上，先选择所需传送的样本号，然后点击（REPORT）工具条，再点击(HC)即可。6.5 试剂更换程序当分析过程中试剂耗尽，仪器就自
21、动停止运行，并在屏幕上显示下列错误信息用新试剂更换指定的试剂。错误信息 新的试剂更换 EPK 容器 CELLPACK更换 ESE 容器 CELLSHEATH更换 FBA 容器 STROMATOLYSER - FB更换 FFD 容器 STROMATOLYSER 4DL更换 FFS 容器 STROMATOLYSER 4DS更换 SNR 容器 STROMATOLYSER NR（溶血素，染料溶液）更换 RED 容器 RET SEARCH（II） （稀释剂，染料溶液）更换 SLS 容器 SULFOLYSER更换 SIM 容器 STROMATOLYSER - IM表 3 - 1、用于试剂更换的错误显示信息
22、6.5.1 准备一个新的试剂并确认没有超过有效期。6.5.2 根据信息换上新试剂后，按主机键盘面板上的帮助（HELP）键，即显示帮助屏幕。6.5.3 如果在帮助屏幕的功能菜单上选择“OK”按钮，就会吸出新的试剂，并将主机内的试剂换掉。6.6 关机程序执行对仪器进行关机时，即对检测器和稀释液管路进行清洗。在每天分析结束时，都需执行关机程序。当仪器连续使用时，至少每运行 24 小时或分析 500 个样品就应将仪器关掉。6.6.1 在主机键盘面板上按关机（SHUTDOWN ）键。6.6.2 主机液晶屏幕上将显示下属信息：It will take approx. 10 minutesSet SELLC
23、LEAN to the pipetteAnd press Start Switch6.6.3 将 CELLCLEAN 放在手动吸液针上；然后在该状态按起动开关。当准备就绪（READY）发光二极管闪烁，同时蜂鸣器发出蜂鸣声时，正在进行吸液。使 CELLCLEAN 保持在当前状态。6.6.4 当准备就绪（READY）发光二极管熄灭，并且蜂鸣声停止时，取出 CELLEAN。6.6.5 然后，开始关机程序6.6.6 完成关机程序以后，显示信息“关闭主机” ，此时即可按下主机电源开关，关闭主机。6.6.7 关闭主机电源后，才能关闭 IPU7、仪器的保养7.1 日常保养7.1.1 清洗检测器室和稀释管路（
24、关机）。执行关机程序时，检测器室和稀释管路将会清空。每分析 500 个样品或每天工作结束时，就执行关机程序7.1.2 清洗旋转阀如果已分析的样品数达到 30000 个样品,请清洗旋转阀.操作步骤按操作手册进行。7.2 需要时进行的维护清洗冲洗块，清洗旋转阀托盘，清洗穿刺取样器托盘，取出凝块(排除堵孔程序) ，清洗 IMI 检测器孔，清洗 RBC 检测器孔，去除光检测器盒中流动池内的空气泡，清洗光检测器盒中的流动池，操作步骤按操作手册进行。8、测定的干扰因素： 8.1 白细胞假性增高：有核红细胞会干扰白细胞计数，需校正，公式为：校正后白细胞数/L=校正前白细胞数/L100/（100+Y） （Y
25、为白细胞计数时，100 个白细胞中有核红细胞的数量） ；抵抗溶血红细胞（尿毒症、胎儿和新生儿标本） ；冷球蛋白血症和冷纤维蛋白血症、血小板聚集、多量巨大血小板、异常血红蛋白、肝病、MDS、巨幼细胞性贫血、脾切除、纤维蛋白丝、高脂血症、疟原虫，不稳定血红蛋白等假性减低：因抗体或细胞膜改变引起白细胞之间或白细胞与血小板聚集、血液放置时间过长引起细胞溶解、冷凝集素。8.2 红细胞假性增高：冷球蛋白血症和冷纤维蛋白血症、血小板聚集、多量巨大血小板、高白细胞、高脂血症等假性减低：血液放置时间过长或其他原因引起细胞溶解、冷凝集素、EDTA 诱导的血小板聚集、极小红细胞落在红细胞阈值外8.3 血小板假性增高
26、：冷球蛋白、高脂血症、红白细胞碎片、小红细胞、血红蛋白 H 病、微生物污染等假性减低：部分凝集、肝素和 EDTA 诱导的血小板聚集、血小板卫星、巨大血小板落在血小板阈值外9、结果判定的注意事项9.1 血小板直方图：空白测试时，血小板直方图上应看不到峰形。当仪器管道不清洁、稀释液不合要求、仪器有不恰当的地线连接而引起的或其它外源性脉冲干扰时，会看到有一截距，这时要进行排查。检验标本时，如峰变的很大，基本呈正态分布，且血小板数量增多，要考虑骨髓增殖性疾病的可能；如有拖尾上翘现象，则可能是小红细胞的影响。出现这些情况都要观察血涂片进行验证。9.2 红细胞直方图：正常红细胞直方图为体积 80-100f
27、l 的单峰，峰的右侧有一低矮小峰，为小淋巴细胞影响所致。峰值左移，说明红细胞体积偏小，此时显示屏上红细胞与血小板的前方往往有#号显示，而同时血小板的直方图，往往有拖尾上翘现象，红细胞与血小板的数量也往往增多；峰值右移，说明红细胞体积偏大。这些情况出现，都要观察血涂片，注意红细胞的特点。10报警符号的处理10.1 报警出现 LYM RO 或 RM:检查是否有凝块，并推片确认白细胞的计数。10.2 报警出现 LRI：出现在血小板结果后，通常是非生物因素的干扰，应重做一次，如仍然出现，则推片检查找出干扰原因，手工复查血小板。10.3 报警出现 URI: 出现在血小板结果后，通常是生物因素的干扰，可能
28、有血小板的凝块，且血小板直方图成柱状，应手工复查血小板。10.4 报警出现 MID R3 或 RM:可能有嗜酸、嗜碱细胞或浆细胞等，推片确认。10.5 报警出现 GRAN R3 或 R4 或 RM:可能是中性细胞异常，如粒细胞白血病等，推片确认。如没有显示平均血小板体积结果报告，血小板柱状图不符合标准，可能有不正常的血小板形态或血小板聚集，手工复查。11校正程序:用校正液自动校正11.1 校正参数项目:白血球,红血球,血红素,平均血球体积,血不板,平均血小板体积11.2 做校正规定:11.2.1 我室按校准规则半年做一次校正。11.2.2 如果更换主要零部件会影响校正值时,应做校正确认。11.2.3 仪器日常一般维修后,应测试质控血,进行鉴定,如果质控结果合格。仪器不需要校正;如果不合格,则需要校正。11.3 仪器校准操作步骤按操作手册进行。12记录表格仪器日常使用登记表仪器维护保养登记表13参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编全国临床检验操作规程（第三版） 南京：东南大学出版社，200611XE-2100 中文操作手册引用文件：ISO 15189 校准
