1、实习四 茶叶中铅含量的测定铅是重金属污染中数量最大的一种，是一种具蓄积性，多亲和性的毒物，能毒害神经系统和造血系统，引起痉挛、精神迟钝、贫血等疾病; 而饮茶是中国的一种传统习惯，茶叶在其生长、采集、制作过程中均易受到铅的污染，故作为茶叶重要卫生指标之一，对其测定具重大意义。常用的铅的检测方法包括食品中铅的测定方法有原子吸收光谱法、电感耦合等离子体光谱法、电感耦合等离子体质谱法、双硫腙分光光度法和原子荧光光谱法等。双硫腙分光光度法为传统的化学分析方法，操作繁琐，试剂消耗量大，基本上被原子光谱法替代。在原子光谱法中，原子吸收光谱法与电感耦合等离子体光谱法使用的仪器设备昂贵，食品检测过程中干扰严重。
2、原子荧光光谱法因仪器设备廉价、操作简便、检测过程受介质干扰少、取样量少及检出限低，是适合基层实验室开展食品痕量铅检测的优选方法。【实验目的】1. 掌握食品样品微波消解技术，原子荧光光谱法测定食品中铅含量的原理、结果计算与评价。2. 掌握原子荧光光谱仪的操作程序、试验注意事项。【实验原理】样品经过硝酸-过氧化氢体系微波消解后，铅以离子形式存在，将其导入到原子荧光光谱仪中，在酸性介质中，食品中的铅与硼氢化钠( N aBH4 ) 或硼氢化钾( KBH4 ) 反应生成挥发性的氢化物( PbH4 ) 。以氩气为载气, 将氢化物导入电热石英原子化器中原子化, 在特制铅空心阴极灯照射下, 基态铅原子被激发至
3、高能态; 在去活化回到基态时发射出特征波长的荧光, 其荧光强度与铅含量成正比, 根据制备好的铅标准曲线系列进行定量。【实验器材和试剂】要求使用去离子水，优级纯或高级纯试剂。（1） 原子荧光光度计。（2） 微波消解仪。（3） 混合酸消化液：每个样品需加入 5ml 硝酸，1ml 双氧水。（4） 盐酸（20=1.19g/ml ）,优级纯。（5） 氢氧化钾，优级纯。（6） 载流液：2%盐酸、1%草酸混合液，需要 500ml。（7） 还原剂: 称取 10 g 硼氢化钾和 5 g 铁氰化钾溶于 500 ml 2%氢氧化钾溶液中，配制顺序不可颠倒，临用现配。（8） 草酸溶液（100g/L） 。（9） 铅标准
4、使用液（0.1g/ml）用去离子水逐级稀释 1000g/ml 的铅标准溶液。【实验步骤】1. 样品制备与消化将干茶叶于研钵中研碎，准确称取 0.5 g（准确至 0.0001 g）粉碎样品于聚四氟乙烯消解罐中加入 5 ml 硝酸 100预消解 30 min（最好静置过夜） ，再加入 1 ml 过氧化氢，盖好密封盖移入微波消解仪，选择样品消解最佳分析条件，至消解完全。冷却后取出置于电热板120待硝酸近干，用前述载流液仔细转移至 25 ml 容量瓶定容至刻度摇匀备用。同时同样步骤做空白试验。微波消解过程中程序性升温过程如下表所示：步骤 温度 升温时间 温度保持时间1 120 5 52 150 2 5
5、3 185 10 54 冷却 - 25注意：微波消解仪共有 8 个消解罐，同时需要做两个空白对照，因此所有学生需要分为六组，分别进行试验。2. 铅标准曲线制作根据提供的铅标准溶液，分布制作标准曲线，每组同学做一条标准曲线。标准曲线制作如下表所示。取 50ml 容量瓶 6 个，分布进行以下试验铅标准系列 0 2.0 5.0 10.0 15.0 20.0加入标液（1g/ml，基体 10%盐酸）体积（ml） 0.00 0.20 0.50 1.00 1.50 2.004%草酸体积（ml） 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.0010%盐酸 10.00 9.80 9.50 9.00 8
6、.50 8.00定容体积 50.003. 测定（1） 测定条件：光电倍增管负高压: 250 V，灯电流: 75 mA，载气流量: 300 ml /min，屏蔽气流量: 800 ml /min，原子化器高度 : 12 mm，注入样品量: 0.5 ml，读数时间: 10 s，延迟时间: 1 s，测量方式: 标准曲线法读数方式: 峰面积。（2） 上机测定: 设定好仪器条件 , 点火并使稳定 20 m in 后开始测量, 连续用标准系列的零管进样, 待读数稳定后, 转入标准系列的测量, 绘制标准曲线, 转入试样测量。【结果计算】X=（C-C 0）Vf100(m1000)X-样品中铅的含量 mg/100gC-测定样品中铅的浓度（由标准曲线查出） （g/ml）V-样品定容体积（ml）f-稀释倍数C0-试剂中铅的浓度（标准曲线中查出）【注意事项】1. 除非另有注明，本实验所用试剂均为优级纯。2. 所有的玻璃仪器均以重铬酸钾硫酸洗液浸泡数小时（或用 10%硝酸浸泡 6 小时以上） ，再用洗衣服充分洗刷后，反复用水冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。3. 样品制备过程中应该特别注意防止各种污染，所用设备必须是不锈钢制品，所用容器必须是玻璃或聚乙烯制品。4. 干燥样品在加酸消化之前需要加入少量水湿润，防止加酸后马上碳化结块而延迟消化时间。
