1、梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（ 酶联免疫法 ）Meiduluoxuanti Kangti Zhenduanshijihe（Meilianmianyifa ）Diagnostic Kit for Antibody to Treponema Pallidum (ELISA)本品系用梅毒螺旋体抗原包被的微孔板和酶标记抗原或酶标记抗人 IgG 及其他试剂制成,应用 双抗原夹心 或间接酶联免疫法原理检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体。1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。2 制造2.1 专用原材料2.1.1 梅毒螺旋体抗原选用重组抗原, 抗原的分子量、活性、纯度
2、应符合要求。2.1.2 抗人 IgG 间接法可使用抗人 IgG 单克隆抗体或多克隆抗体。抗体的纯度和活性应符合要求。2.1.3 辣根过氧化物酶（或其他适于标记的酶）辣根过氧化物酶的 RZ 值应不低于 3.0，其他酶的纯度应符合相应的要求。2.1.4 阳性对照用血清或血浆梅毒螺旋体抗体检测为阳性的人血清或血浆。2.1.5 阴性对照用血清或血浆梅毒螺旋体抗体检测为阴性的人血清或血浆。2.1.6 微孔板CV(%)应不高于 10%。2.2 制备程序2.2.1 抗原纯化采用适宜的方法纯化抗原。纯化后的抗原的分子量、纯度和活性应符合要求。纯化后的抗原保存于适宜温度。2.2.2 纯化抗人 IgG 间接法采用
3、适宜的方法纯化抗体。纯化后的抗体纯度和活性应符合要求。纯化后的抗体保存于适宜温度。2.2.3 酶标记物的制备采用常规过碘酸钠乙二醇或其他适宜方法对纯化抗原或抗人 IgG 进行辣根过氧化物酶或其他酶标记，酶标记抗原或抗人 IgG 的活性应符合要求，加入适当的保护剂于适宜温度保存。2.2.4 包被抗原浓度和酶标记物浓度的选定采用方阵滴定法选择最佳包被抗原浓度和酶标记抗原或酶标记抗人 IgG 的工作浓度。2.2.5 包被抗原板的制备采用最佳包被浓度的抗体包被微孔板孔，经封闭、干燥和密封等处理后，保存于28。对包被抗原板须抽样进行检定，应符合 3.1.13.1.4 项和 3.1.7 项要求。2.2.6
4、 阳性对照选用梅毒螺旋体抗体检测为阳性的 5 份以上人血清或血浆混合，经 60 加温 l 小时处理,除菌过滤后低温保存。2.2.7 阴性对照选用梅毒螺旋体抗体检测为阴性的 5 份以上人血清或血浆混合，经 60加温 l 小时处理,除菌过滤后低温保存。2.2.8 反应时间的设置检测过程中加入样本后反应时间应不低于 60 分钟，加入酶结合物后反应时间应不低于 30 分钟，加入显色液后反应时间应不低于 30 分钟。2.3 半成品检定按 3.1 项进行。2.4 成品 2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定。2.4.2 分装与冻干应符合“生物制品分装和冻干规程” ，分装或冻干后保存于 28。2.4
5、.3 规格应为经批准的规格。2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。3 检定3.1 半成品检定3.1.1 阳性参考品符合率用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。3.1.2 阴性参考品符合率用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。3.1.3 精密性 用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，CV(%)应不大于 15%（n=10） 。3.1.4 最低检出限用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。3.1.5 无菌检查依法检查（附录 XII A）含有蛋白成分的液体组分，半成品加防腐剂分装后留样做无菌检查，采用直接接种法，应符合
6、规定。3.1.6 水分冻干组分水分应不高于 3.0% （附录 VII D） 。3.1.7 稳定性试验试剂各组份放置 37至少 3 天（有效期为 6 个月） ，应符合 3.1.13.1.4 项要求。3.2 成品检定3.2.1 物理检查3.2.1.1 外观液体组分应澄清。冻干组分应呈白色或棕色疏松体3.2.1.2 溶解时间冻干组分应在 3 分钟内溶解。3.2.2 阳性参考品符合率同 3.1.1 项。 3.2.3 阴性参考品符合率同 3.1.2 项。3.2.4 精密性同 3.1.3 项。3.2.5 最低检出限同 3.1.4 项。3.2.6 稳定性试验出厂前进行，方法同 3.1.7 项。4 保存、运输
7、及有效期于 28避光保存，有效期 自组装之日起 计算，按批准的有效期执行。5 使用说明使用说明书应包括以下主要内容【制品名称】通用名称：梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)汉语拼音：Meidu Luoxuanti Kangti Zhenduanshijihe(Meilianmianyifa)英文名称：Diagnostic kit for antibody to Treponema Pallidum (ELISA)【定义】双抗原夹心法：本品系用纯化梅毒螺旋体基因工程抗原包被的微孔板和酶标记特异性抗原及其他试剂制成,应用双抗原夹心酶联免疫法原理检测人血清或血浆样品中的梅毒螺旋体特异性抗体。间接法
8、：本品系用纯化梅毒螺旋体基因工程抗原包被的微孔板和酶标记抗人 IgG 及其他试剂制成,应用间接酶联免疫法原理检测人血清或血浆样品中的梅毒螺旋体特异性抗体。【试剂盒组成】 本试剂盒应包括下列主要成分：(1) 包被抗原的微孔板(2) 酶标记抗原或酶标记抗人 IgG(3) 样品稀释液(4) 底物及其稀释液(5) 洗涤液(6) 阳性对照和阴性对照(7) 终止液【使用方法】 (1) 每次实验每板设阳性对照、阴性对照和空白对照，其余孔加入规定量的样品稀释液，再加入规定量的待测样品，在规定温度下，放置规定时间后，用洗涤液充分洗涤，拍干。(2) 每孔分别加入规定量的酶标记抗原（双抗原夹心法）或酶标记抗人 IgG（间接法），空白孔不加，置规定温度放置规定时间后，用洗涤液充分洗涤，拍干。(3) 各孔加入底物溶液，在规定时间显色后，加入终止液终止反应。【结果判定】 采用酶标仪，按规定波长测定各孔吸光值（A 值） 。各生产单位应对其试剂盒 Cutoff值的计算、阳性、阴性对照 A 值范围，提出明确的判断标准。【注意事项】 (1) 不同批试剂组分不得混用。(2) 试剂盒应按含有传染性材料对待。【保存及有效期】 于 28避光保存，在有效期内使用。【执行标准】【批准文号】 【生产企业】 企业名称生产地址邮政编码电话号码传真号码网址
