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高中生物实验备考---物质鉴定实验.ppt

1、高中生物实验备考,高中生物的学生活动及实验分类,学生实验,技能性实验,探索性实验,验证性实验,:动作技能训练,:获得新知,:检验已知,研究性课题,调查研究,文献资料分析,演示实验,2007年实验备考内容,实验备考的目标要求,能独立完成“生物知识内容表”所列实验,包括理解实验目的、原理、方法和步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合的运用; 具备验证简单生物学事实(原理)的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理; 具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括确认变量、作出假设和预期、设计可行的研究方案、处理和解释数据、根据数据作出合理的判断等; 能对一些简单的实验

2、方案作出恰当评价和修改,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,、可溶性还原糖 试剂 、脂肪苏丹III 脂肪苏丹IV 3、蛋白质 ,橘黄色,红色,双缩脲试剂,紫色反应,砖红色沉淀,一、实验原理:,紫蓝色,蓝色,深紫色,略带金属光泽,高中生物还学习过那些利用颜色反应鉴定物质的?用到了那些化学试剂?由此产生了那些特定的颜色呢?,染色(质)体+ 醋酸洋红(或龙胆紫),淀粉+碘液,DNA+二苯胺试剂(水浴加热),大肠杆菌+伊红-美蓝,红色(或紫色),实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,深入原理1.可溶性还原糖的鉴定原理:生物组织

3、中常见的可溶性糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖。_、_、 _分子中都含有游离的具有还原性的醛基,因此叫还原性糖;而 的分子中没有,因此叫非还原性糖。斐林试剂(淡蓝色的Cu(OH) 2)与可溶性还原糖在加热的条件下,生成砖红色的_沉淀。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,深入原理2.脂肪的鉴定原理: 苏丹染料大量进入脂肪类物质的结构内,呈现出 色或 色。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,深入原理3.蛋白质的鉴定原理: 在_溶液中,蛋白质能与Cu2作用,可形成紫色或紫红色的络合物。,碱性,实验一生物组织中可溶性还原糖

4、、脂肪、蛋白质的鉴定,1、可溶性还原糖 含 较高,颜色较浅或近于 的植物组织。以_、_最好。,2、脂肪的鉴定 富含 的种子。如花生、核桃、蓖麻等的种子 。花生干种子,在实验前需要浸泡_。浸泡时间过长,则组织太软,影响切片效果。,二、实验材料选用:,34h,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,(1)植物组织样液:大豆种子(浸泡12天), 或用豆浆 (2)动物组织样液:蛋清稀释液 蛋清:水_稀释。,二、实验材料选用:,1:10,3、蛋白质的鉴定,1、注意材料的易得性:还原性糖和脂肪从植物中获得实验材料比较容易,而蛋白质在动植物中都有比较容易获得的材料。,2、注意实验前材料的处理:梨在

5、实验前应该洗净、去皮,保证研磨比较充分;鉴定脂肪用的花生种子必须提前浸泡,而且应注意浸泡的时间,时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形,时间过短,则不容易切成片;同样鉴定蛋白质用的大豆也要提前浸泡,这样容易研磨成浆。如果用鸡蛋卵白的话,应该进行稀释。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,二、实验材料选用:,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,1、斐林试剂 A液 质量浓度为0.1g/mL的 溶液B液 质量浓度为0.05g/ mL的 溶液 2、双缩脲试剂A液 质量浓度0.1g/mL的 溶液B液 质量浓度0.01g/mL的 溶液 3、苏丹III 0.1g苏丹III干粉,

6、溶于100mL体积分数为95%的酒精中,待全部溶解后再使用。,三、试剂 :,制备组织样液:苹果切块、研磨、_。 鉴定组织样液:,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,取1 支试管:加2mL_加2mL_,振荡试管,(溶液_色?)。_2min左右,观察溶液颜色变化。 (_色棕色_色),纱布过滤,1. 可溶性还原糖的鉴定,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,2.脂肪的鉴定 (1)切片制作:用花生子叶制作徒手切片。 (2)染色:花生子叶切片+ 2-3滴_染液, _min后吸去染液+ 2滴50%_溶液去浮色; 吸去子叶周围酒精后+ 2滴_,盖盖玻片。

7、 (3)镜检鉴定:先用_镜观察,找到子叶最薄处,再用_镜观察。 (圆形的脂肪颗粒为_色)。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,2-3,蒸馏水,酒精,低倍,高倍,橘黄,3. 蛋白质的鉴定 (1) 制备样液:大豆切片、_、_。 (2) 鉴定:1 支试管+2mL黄豆组织样液加2mL_,振荡试管(溶液_色),加3-4滴_,_试管,观察溶液颜色变化。 (_色_色_色)。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,纱布过滤,研磨,双缩脲试剂A,无,双缩脲试剂B,振荡摇匀,无,浅蓝,紫,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,1、常见还原性糖与非

8、还原性糖有哪些?,考点提示:,2、还原性糖植物组织取材条件?,葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖; 淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。,含糖量较高、颜色为白色或近于白色。 如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等,4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法?为何要现混现用?,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,3、研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?,加入石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,致使鉴定时,溶液颜色变化不明显,因斐林试剂很不稳定,容易生成蓝色的Cu(OH)2沉淀,所以应将甲液与乙液分别配制储存,使用时再临时配制,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪

9、、蛋白质的鉴定,5、还原性糖中加入斐林试剂后水浴加热,溶液颜色变化的顺序为?,开始时加入的刚配制的Cu(OH)2部分被还原成砖红色的Cu2O沉淀,二者混合呈现棕色,随着反应的继续进行, Cu(OH)2被全部还原成Cu2O,故出现砖红色沉淀。,颜色变化:浅蓝色棕色砖红色(沉淀),浅蓝色 棕色 砖红色(沉淀),开始时加入的刚配制的Cu(OH)2部分被还原成砖红色的Cu2O沉淀,二者混合呈现棕色,随着反应的继续进行, Cu(OH)2被全部还原成Cu2O,故出现砖红色沉淀。,答:虽然是验证性实验,但也要注意对照。在鉴定可溶性还原性糖和蛋白质时留出一部分样液,可以和鉴定后的样液的颜色变化作对照,增强说服

10、力,6、 在做还原性糖与蛋白质鉴定的实验时,在鉴定前,为什么要留出一部分样液?,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,8、转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,7、花生种子切片为何要薄?,只有很薄的切片,才能透光,才能用于显微镜的观察。,切片的厚薄不均匀,9、脂肪鉴定中乙醇作用?,洗去浮色,先加入试剂A是为了造成碱性环境,因为在碱性环境中,蛋白质容易与Cu2+发生颜色反应。因为若加入过量的双缩脲试剂B,CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2沉淀,会遮蔽实验中所产生的紫色,影响

11、观察,10、 在使用双缩脲试剂时,为什么要先加入试剂A,后加入试剂B?加入试剂A后,为什么只能加入34滴双缩脲试剂B,而不能加过量?,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,溶液浓度不同:斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成,双缩脲试剂的成分是质量浓度的0.1g/mL的NaOH溶液与质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液。,11. 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,两者有何不同?,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,使用原理不同:斐林试剂实质是新配制的一定浓度的Cu(OH)2溶液,在加热

12、条件下,与加入的可溶性还原性糖能够生成砖红色的Cu2O沉淀。双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲(H2NOCNHCONH2)作用,形成的紫色或紫红色的络合物。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,11. 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,两者有何不同?,使用方法不同:斐林试剂在使用时,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。双缩脲试剂使用时,先加NaOH溶液,振荡均匀再加CuSO4溶液,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,11. 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,两者有何不同?,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,答:制备蛋白质稀释液,主要是为了防止蛋白质与双缩脲试剂反应后粘在试管壁上,使反应不彻底,也不易刷洗试管,12. 蛋清为什么要稀释?,

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