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实验6+柱色谱法和薄层色谱法.ppt

1、实验六 柱色谱法和薄层色谱法,(计划学时:3学时) 一、实验目的: 1学习柱色谱法和薄层色谱法的原理及其应用; 2熟练掌握柱色谱法和薄层色谱法的操作。 二、实验原理: 色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法,有着广泛的用途。常用的色谱法有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法和气相色谱法。 色谱法的分离原理是利用混合物中各组分在不同的两相中溶解和吸附的亲和作用差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复的多次受到上述作用力的作用而得到分离。色谱法按固定相使用的形式可分为柱色谱法、纸色谱法和薄层色谱法。,柱色谱法是色谱法的一种,属于固-液吸附色谱,它是利用混合物中各组分被吸附剂吸附能力的不同来进

2、行分离的。柱色谱通常是以一些表面积很大并经过活化的多孔性物质或粉状固体作为吸附剂,将其填装入一根玻璃管中,即为固定相,加入待分离混合样品,然后从柱顶加入洗脱剂洗脱。由于混合物各组分被吸附能力不同,即发生不同解吸,从而以不同速度下移,形成若干色带,若继续再用溶剂洗脱,则吸附能力最弱的组分首先被洗脱出来。整个色谱过程进行着反复的吸附-解吸-再吸附-再解吸。,1柱色谱法,薄层色谱法是一种微量、快速、简易、灵敏的色谱法,其基本原理为吸附色谱和分配色谱。吸附色谱是利用混合物中各组分被吸附能力的不同以及在流动相中的溶解度不同而使之分离;分配色谱则是利用混合物中各组分在固定相和流动相中的分配系数不同而使之分离。 通常用比移值(Rf)表示溶质(样品)移动和展开剂(流动相)移动的关系。,2薄层色谱法,化合物A的Rf值=a/c 化合物B的Rf值=b/c,

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