1、59.060.10 B 16 DB 51四 川 省 地 方 标 准DB 51/T 12052011棉花黄萎病抗性鉴定技术规程2011 - 01 - 25 发布 2011 - 03 - 01 实施四 川 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB51/T 12052011I目 次前言 II1 范围 12 规范性引用文件 13 术语和定义 14 供试菌种制备 15 田间抗性鉴定方法 26 调查及计算方法 27 抗病性评价 3附录 A（资料性附录） 病害分级标准及相关计算公式 .4DB51/T 12052011II前 言本标准由四川省农业厅提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。本标准起草单位
2、：四川省农科院经作所、四川省农业厅本标准主要起草人：曾华兰、刘宇、叶鹏盛、何炼、刘朝辉、韦树谷DB51/T 120520111棉花黄萎病抗性鉴定技术规程1 范围本标准规定了转基因棉花、杂交棉花和常规棉花黄萎病抗性鉴定方法和抗病性评价标准。本标准适用于棉花育种、棉花生产和植保单位对转基因棉花、杂交棉花和常规棉花黄萎病抗性鉴定和抗病评价。本标准适用于四川省棉区。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 1103 棉花 细绒棉GB 4407.1 经济作物种子 纤
3、维类DB51/336-2003 无公害农产品（或原料）产地环境条件DB51/337-2003 无公害农产品农药使用准则DB51/338-2003 无公害农产品肥料使用准则3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 感病对照品种 the sensitive standard variety感病对照品种为生产上常年黄萎病病情指数达到50左右的品种。3.2 校正系数(K) correction factor(K)校正系数（K）为50除以鉴定试验中感病对照品种的实际病情指数。在实际中K值在0.751.25时，鉴定结果方为有效。3.3 相对病情指数 relative disease index相对
4、病情指数为供试品种的实际病情指数与校正系数（K）的乘积。4 供试菌种制备供试菌种为试验前一年从田间采集的棉花黄萎病病株分离纯化培养获得的黄萎病菌种。用PDA培养DB51/T 120520112基培养斜面菌种，接种在改良的米饭培养基（取大米3g、蔗糖5g，装入500ml三角瓶中，加水200ml，于15磅灭菌30min，自然冷却至室温即成）中，于2528下进行扩大培养7d后，按1:10的比例接种在灭菌的棉籽上，置2528培养15d后，在室内自然晾干即成棉籽载菌体。在接菌前，将棉籽载菌体用水洗下棉花黄萎病菌孢子，用消毒的双层纱布过滤，在显微镜下用血球计数器计数，配制成孢子含量达到210 7 spor
5、es/g的孢子悬浮液 作田间接种用。5 田间抗性鉴定方法5.1 鉴定田块选择及田间管理5.1.1 土壤条件选择土壤耕层深厚，疏松肥沃，有机质含量丰富，中性或酸性的土壤。土壤环境质量应符合DB51/336-2003的要求。5.1.2 灌溉条件鉴定田块有水源保证，排灌设施健全，灌溉水符合DB51/336-2003的要求。5.1.3 空气质量空气环境质量应符合DB51/336-2003的要求。5.1.4 田间管理田间施肥应符合DB51/338-2003 的要求。本条文没有说明的栽培技术，仍按常规技术措施实施。5.2 抗性鉴定方法5.2.1 接菌方法采用伤根接菌法。5.2.2 接菌时间和接菌量棉花黄萎
6、病抗性鉴定在棉苗移栽时，利用自然伤根接菌。在棉苗移栽时，按每株10ml的量灌根接种棉黄萎病菌孢子悬浮液。接菌后覆土盖膜，保持田间湿度。5.2.3 田间设计每品种在田间随机排列，每重复种植25株以上，3次重复。鉴定田块四周设保护行。棉花苗期和成株期不防治病害，可施用杀虫剂、杀螨剂防治棉蚜、棉铃虫、棉叶螨等害虫，施药应符合DB51/337-2003的要求。6 调查及计算方法在棉花蕾期和花铃期观察记载发病情况，当感病对照的病情指数达到50左右时，对全部棉株进行病情调查，记载各棉株的发病程度。发病程度的分级标准见附录A1。根据各品种棉株的发病程度级别，计算病情指数、相对病情指数。计算方法见附录A2。D
7、B51/T 1205201137 抗病性评价根据各品种的相对病情指数，按照表1标准评价各品种的抗病性。表 1 棉花枯萎病抗性鉴定评价标准抗性型 病指（X）范围免疫（I） X =0.00高抗（HR） 0.00X10.00抗（R） 10.00X20.00中抗（MR） 20.00X35.00感（S） 35.00X50.00高感（HS） X50.00DB51/T 120520114A A附 录 A（资料性附录）病害分级标准及相关计算公式A.1 棉株发病程度的分级标准根据棉株的发病程度，分为 0、1、2、3、4 级共 5 个级别，其分级标准如下：0 级：健株，叶片无病状；1 级：有 25% 及以下的叶片表现症状，即叶片出现叶肉变黄或呈现不规则形的黄色病斑；2 级：26%5O%的叶片表现病状，病斑颜色大部分变为黄色或黄褐色，叶片边缘略有卷枯现象；3 级：51%75%的叶片表现病状，少数病叶凋落；4 级：76%及以上的叶片表现病状，多为褐色掌状枯斑，严重时叶片大量脱落，甚至棉株枯死。A.2 病情指数、校正系数、相对病情指数的计算公式DI =(各级病株数相应病级)调查总株数最高病级(4) 100 (1)式中：DI为病情指数K=50感病对照品种的实际病情指数 (2)式中：K为校正系数X=K鉴定材料的病情指数 (3)式中：X为相对病情指数，K为校正系数_
