1、探究：培养液中酵母菌种群数量的变化,目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素,1、酵母菌的繁殖方式主要是:,2、酵母菌的呼吸方式是:,兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸),回顾思考:,出芽生殖,例如：酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈S型增长。,探究：培养液中酵母菌种群数量的变化,介绍:血球计数板的构造,1、血球计数板：是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四
2、条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.,2、方格网的构成：,方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室, 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,3、使用方法:,将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,
3、使酵母菌全部沉降到血球计数室内.加盖盖玻片.,计数室有长宽： 1mm1mm为例, 2mm2mm, 3mm3mm等 深度均为0.1mm。,5、单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10-4 mL 。,4、计数室的规格：,如果使用16格25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.我们用规格为25格16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. （五点取样法）出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体
4、计算。,6、如何计数呢？,7、,课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其体积为0.4mm3.换算为1mL为0.4/1000即4/10000mL即410 -4mL,使酵母菌混合均匀。,可以设置对照。用无菌水代替培养液培养，取样、计数、对比。 或不需要，因不同时间取样已形成对照。,需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。,.,当遇到位于方格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).,稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.,8、血球计数板的清洁,血球计数板使用
5、后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止,酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。,2根据各组平均数据画出的增长曲线有没有什么总趋势？如果有，作出说明。如果设计了无菌水的对照，也画出增长曲线。,3影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么？,1取少量酵母菌液放入血球计数板直接计数，测得的数目是（ ）A活细胞数 B死细胞数 C菌落数 D细胞总数,A,2、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作过程如下：（1）把酵母菌培养液放置于冰箱中培养，（2）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（3）到第七天取样计数，请纠正其错误： （1）_ （2）_ （3）_.该同学用25格x16格,其中长和宽各为2mm,深度为0.1mm的血球计数板计数,用五点取样法读取酵母菌有40个,其中稀释了10倍,则1ml菌液中所含的酵母菌个数为_,应将静置改为轻轻振荡几次.,应放在适宜温度下培养.,应连续七天取样计数.,练习:,（40/80 ）106 10=5 106,欢迎指导,
