1、12.生物技术实践(B)1.(2018杭州学军中学模拟)回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等相关的问题：(1)果胶是植物细胞壁的主要成分，起着将植物细胞_在一起的作用。制作果汁时可加入果胶酶和_以分解果胶，提高果汁出汁率和澄清度。(2)果胶酶可从黑曲霉中提取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是_(A.蛋白胨和酵母提取物培养基 B.尿素固体培养基 C.MS 培养基 D.添加蔗糖的豆芽汁培养基)。由于果胶酶溶于水，不利于重复使用，可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有_的制剂。(3)用果汁制作果酒，以果汁为原料，加入一定比例的蔗糖的目的是_。最后倒入酵母悬液，混匀，加盖；发
2、酵开始时，由于微生物的需氧呼吸会使发酵瓶内出现_，原因是_。答案 (1)粘合 果胶甲酯酶 (2)D 酶活性 (3)提高果酒的酒精和糖的含量 负压 需氧呼吸消耗氧气，产生的二氧化碳比氧气易溶于水2.(2018宁波镇海中学期中)请回答与“大肠杆菌的培养与分离”实验有关的问题：(1)大肠杆菌是革兰氏_、兼性厌氧的肠道杆菌，一般对人无害。实验室利用_培养基扩大培养大肠杆菌，培养后使用灼烧、冷却后的_进行划线分离，这种_的分离是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。(2)若要将大肠杆菌临时保存，一般接种在_上，37 培养 24 h 后，置于_(A.20 B.4 C.4 D.37 )环境条件下保存。答案
3、(1)阴性 LB 液体 接种环 单菌落 (2)斜面 C解析 (1)大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌；在实验室中扩大培养大肠杆菌时常用 LB 液体培养基；接种时需对接种环灼烧灭菌；采用划线分离法筛选出高表达量单菌落。(2)若要将大肠杆菌临时保存，一般接种在斜面培养基上，37 培养 24 h 后，并置于 4 2环境条件下保存。3.在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中先将 10 升湖水水样浓缩至 10 毫升，然后各取浓缩水样 1 毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答下列问题：(1)可以通过提高培养基中_的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为_培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未
4、彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是_。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是_。(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_。为防止冷凝水影响细菌的生长需将培养皿_培养。(4)根据培养皿上菌落的平均数，可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是_。答案 (1)盐(或 NaCl) 选择 (2)未接种(或接种等量无菌水)的培养皿 未加高浓度盐的培养基培养 (3)高压蒸汽灭菌 倒置 (4)当两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的是一个菌落4.(原创)酿酒、造醋是我国的传统技艺，为了探究与改进制造工艺，进行了相关研究。请回答有关问题：(1)目
5、的菌株筛选后应该利用_培养基进行扩大培养，_是消除污染杂菌的通用方法。(2)制作葡萄酒过程中，为了使酵母菌迅速发生作用，可加少量_混匀。将葡萄浆放入发酵瓶，装量不超过_(A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%)，当发酵瓶_表示发酵完毕。(3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至_，将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒水混合物中混匀，并调 pH 至_后，倒入发酵瓶。答案 (1)液体 单菌落的分离 (2)蔗糖 B 停止出现气泡 (3)八分满 7.05.下图为葡萄酒生产工艺流程简图，请据图回答下面的问题：(1)流程中“方框”处的内容依次为_、_。(2)果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋化醋杆菌，在酒
6、精发酵旺盛时，醋化醋杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由：_。(3)果酒制作离不开酵母菌，与醋化醋杆菌比，酵母菌在结构上的主要特点是_(A.有细胞壁 B.有细胞膜 C.有核糖体 D.有成形的细胞核)。(4)若要提高果酒的产量，发酵过程中关键要控制好哪些条件？_(至少填写 2 项)。答案 (1)冲洗 灭菌 (2)不能。因醋化醋杆菌是好氧型细菌，而果酒发酵时是无氧环境 (3)D (4)适宜的温度、pH、通气量36.尿素是一种高浓度氮肥，长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的
7、细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂糖1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g(1)根据培养基的成分判断，该同学_(填“能”或“不能”)分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是_。(2)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用_法接种。(3)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。(4)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_，应当怎样操作才可避免此种现象？_。答案 (1)不 能 培 养 基 中
8、 含 蛋 白 胨 ， 尿 素 不 是 唯 一 氮 源 (2)涂 布 分 离 (3)灭 菌 无 菌 (4)菌液浓度过高 对菌液进行梯度稀释(加大稀释倍数)7.请回答下列与微生物培养、发酵过程相关的问题：(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用_方法灭菌，冷却后加入用 G6 玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需用_浸泡，并抽滤去酸，再用_冲洗，干燥后保存。(2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，可以用_(A.50%乙醇 B.70%乙醇 C.90%乙醇 D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或_中提取，配制这些微生物的培养基时需要将 pH 调至_
9、。(3)在“用果汁制作果酒”实验中，为了增加果酒的含糖量，可以在发酵瓶中加入一定量的_。答案 (1)高压蒸汽灭菌 1 mol/L 的 HCl 蒸馏水 (2)D 苹果青霉 中性偏酸 (3)蔗糖8.生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：(1)培养大肠杆菌所用的 LB 培养基一般用_法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常用_将水样进行一系列的梯度稀释。(2)将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_到 LB 固体培养基，_于恒温培养箱，在_ 条件下进行培养。用该方法统计样本菌落数时_(填“需要”或“不需要”)设置对照组。(3)下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是_。4
10、A.步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B.步骤接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液划线C.步骤多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D.步骤恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数答案 (1)高压蒸汽灭菌 无菌水 (2)涂布 倒置 37 需要 (3)C9.请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：(1)果胶是细胞壁的重要组成成分，其化学本质是_(填写如下选项)，它在细胞壁形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。A.蛋白质 B.脂质C.核酸 D.多糖(2)制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质，再用_酶处理，可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的
11、上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低成正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行_处理，从而得到干制品。答案 (1)D 粘合 (2)半乳糖醛酸 果胶甲酯 活性 (3)脱水(沉淀)解析 (1)果胶是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成的，其化学本质属于多糖。果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用。(2)果胶酶能将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物质。要使果汁更澄清，应同时使用果胶酶和果胶甲酯酶。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的活性高低成正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行沉淀处理，从而得到干制品。
