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小麦论文:小麦 赤霉病 禾谷镰刀菌 转录组学表达谱 胞外蛋白 蛋白质组学.doc

1、 小麦论文:小麦响应赤霉病菌的表达谱分析与禾谷镰刀菌胞外蛋白的研究【中文摘要】小麦赤霉病是主要由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schw)在小麦扬花期侵染麦穗所导致的真菌病害。它不仅造成小麦严重减产和品质的下降,其产生的真菌毒素还威胁着人、畜的健康,给小麦生产造成了重大的损失。目前虽然有很多关于小麦赤霉病研究的相关报道,但赤霉病发生的分子机制一直没有研究清楚。本研究从小麦对赤霉病的抗性机制以及赤霉病的致病机制两个方面进行研究,具体内容是:(1)以一对抗感赤霉病近等基因系(抗病材料Apogee73S2 和感病材料 Apogee)为材料,运用转录组学和生物信息学的方法研究正常

2、与接种病原菌条件下小麦颖壳基因表达差异;(2)采用 Shotgun 蛋白质组学策略,对赤霉病主要的致病菌禾谷镰刀菌的胞外蛋白进行研究。主要获得以下研究结果:(1)Apogee73S2 接菌后与其对照(无菌水处理)相比有 2571 个基因表达量相上调, 3620 个下调。表达量上调的差异基因主要参与植物的初级代谢过程及植物激素、苯丙素类、生物碱类的合成等次级代谢过程;Apogee73S2 与Apogee 接菌后,两样品间差异表达基因有 4196 个,其中 2192 个表达量上调,2004 个表达量下调;Apogee73S.【英文摘要】Fusarium head blight (FHB), cau

3、sed by the facultative pathogen Fusarium spp., is a serious disease in wheat (Triticum aestivum L.) and received significant attention because of the fact that it causes economic losses due to reduction in both yield and quality. Although there are many reports about the wheat response to F. gramine

4、arum infection, there is a limited understanding of the molecular mechanism involved in plant resistance against the infection of F. graminearum. This study includes two aspects: (1.【关键词】小麦 赤霉病 禾谷镰刀菌 转录组学表达谱 胞外蛋白 蛋白质组学【英文关键词】Fusrium head blight F. graminearum Transcriptome profile Solexa sequencing

5、Extracellular proteins Proteomics【索购全文】联系 Q1:138113721 Q2:139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发【目录】小麦响应赤霉病菌的表达谱分析与禾谷镰刀菌胞外蛋白的研究 中文摘要 8-9 英文摘要 9-10 1 前言 11-31 1.1 小麦赤霉病 11-18 1.1.1 小麦赤霉病病原菌 12 1.1.2 小麦赤霉病病原菌侵染过程及其病害症状 12-13 1.1.3 小麦赤霉病的地域分布 13-16 1.1.4 小麦赤霉病的防治措施 16 1.1.5 小麦抗赤霉病基因及种质资源 16-18 1.2 转录组学和生物

6、信息学 18-23 1.2.1 转录组学 18-19 1.2.2 转录组学的研究技术 19-21 1.2.3 转录组学在植物研究上的应用 21-23 1.3 植物病原菌胞外蛋白质组学研究进展 23-31 1.3.1 蛋白质组学的含义 23 1.3.2 蛋白质组学的主要技术 23-28 1.3.2.1 蛋白质样品制备方法 24 1.3.2.2 蛋白质分离技术 24-26 1.3.2.3 质谱技术 26-27 1.3.2.4 计算机图像分析软件以及蛋白质数据库 27-28 1.3.3 分泌蛋白质的合成与转运 28-29 1.3.4 分泌蛋白质组研究的技术和方法 29-30 1.3.5 植物病原菌胞

7、外蛋白组学的研究进展 30-31 2 材料和方法 31-36 2.1 小麦响应赤霉病菌的表达谱分析 31-33 2.1.1 供试材料 31 2.1.2 禾谷镰刀菌的培养及接种 31 2.1.2.1 禾谷镰刀菌的培养 31 2.1.2.2 禾谷镰刀菌接种方法 31 2.1.3 RNA 的提取及表达谱测序文库的构建 31-32 2.1.4 表达谱测序 32 2.1.5 生物信息学分析 32-33 2.2 禾谷镰刀菌胞外蛋白的研究 33-36 2.2.1 禾谷镰刀菌的培养 33 2.2.2 禾谷镰刀菌胞外蛋白的提取 33 2.2.3 禾谷镰刀菌胞外蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳 33-34 2.2.4 禾

8、谷镰刀菌胞外蛋白的LC-MS/MS 质谱分析与鉴定 34-36 2.2.5 禾谷镰刀菌胞外蛋白的生物信息学分析 36 3 结果与分析 36-44 3.1 小麦响应赤霉病菌的表达谱分析 36-41 3.1.1 RNA 质量分析 36-37 3.1.2 DGE 文库测序文库质量分析 37-39 3.1.3 基因 TAG 映射到转录组数据库中的效率 39-40 3.1.4 禾谷镰刀菌引起的小麦颖壳基因表达差异 40-41 3.1.5 差异基因的代谢通路分析 41 3.2 禾谷镰刀菌胞外蛋白的研究 41-44 3.2.1 禾谷镰刀菌胞外蛋白的单向电泳分析 41-42 3.2.2 禾谷镰刀菌胞外蛋白的鉴定 42-43 3.2.3 禾谷镰刀菌分泌蛋白的信号肽分析 43-44 4 讨论 44-46 4.1 小麦响应赤霉病菌的表达谱分析 44-45 4.2 禾谷镰刀菌胞外蛋白的研究 45-46 5 结论 46-47 6 参考文献 47-56 7 攻读学位期间发表论文情况 56-57 致谢 57-58 辅助材料 58-79 附件 79

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