1、电化学发光免疫分析技术简介演讲人：赵志德演讲时间：2010-3-18标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点内容标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点内容免疫测定的发展和应用免疫测定免疫浊度测定（g-ng）标记免疫测定（ng-pg）放射免疫测定法 酶免疫测定法 荧光免疫测定法 化学发光免疫测定法 电化学发光免疫测定法 免疫透射浊度测定法 免疫胶乳浊度测定法免疫速率散射浊度测定法电化学发光1960S197080S 2000S放射免疫酶免荧光免疫化学发光标记免疫技术的发展标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点内容电化学发光免疫分析(ECLIA)Elet
2、ro-chemilumine scence immunoassay什么是电化学发光免疫分析 (ECLIA) ？ ECL是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合 电化学发光免疫测定是电化学发光（ECL）和免疫测定相结合的产物，是目前非常先进的标记免疫测定技术 。ELECTROCHEMILUMINESCENCEIMMUNOASSAY磁性微粒子亲和链霉素 生物素钌标记物 Paramagnetic microparticle-SB-AgAb complex labelled with Ru(bpy)3+2+ 反应时间 : 18 分钟专利的电化学发光检测技术
3、免疫复合物电化学发光技术主要技术 三联吡啶钌标记技术 链霉亲和素生物素技术 磁性微粒子技术 电启动的化学发光反应专利的电化学发光检测技术钌复合物标记 三联吡叮钌复合物 Ru(bp)3+2+标记； 水溶性小分子， 免疫损伤小； 结构稳定， 受干扰影响小； 与三丙胺（发光电子供体）共同参与氧化还原反应； 应用广泛（激素，核酸等）三联吡啶钌N羟基琥珀酰胺(NHS)酯夹心法 捕获法核酸检测竞争法磁性微粒子亲和素 -生物素抗原 抗体 探针钌标记物电化学发光具有广泛的检测空间电化学发光技术主要技术 三联吡啶钌标记技术 链霉亲和素生物素技术 磁性微粒子技术 电启动的化学发光反应专利的电化学发光检测技术共价配
4、合物 生物素链霉亲和素耦联体系 1分子亲和素 4分子生物素 结合力强，特异性高 提高检测灵敏度电化学发光技术主要技术 三联吡啶钌标记技术 链霉亲和素生物素技术 磁性微粒子技术 电启动的化学发光反应专利的电化学发光检测技术磁性颗粒载体 直径仅 2.8 um, 体积小，悬浮于液体中，构成均一，稳定的类均相试剂 凹凸不平，增强包被效率 磁性吸引，易于 AgAb复合物的结合分离 反应前仪器自动混匀电化学发光技术主要技术 三联吡啶钌标记技术 链霉亲和素生物素技术 磁性微粒子技术 电启动的化学发光反应电极表面的电化学发光反应电化学发光信号的检测稳定的检测窗口电化学发光免疫反应全过程磁性微粒子亲和链霉素 生
5、物素钌标记物电化学发光免疫反应过程1.反应杯的标记免疫反应Elecsys HIV Combi图解第四代抗原抗体联合检测单克隆HIV抗体检测P24 抗原使用大量的重组抗原gp41/gp36 和 RT 来检测 IgG and IgM抗体光电倍增管磁铁工作电极电极电极清洗液电化学发光免疫反应过程2.测量池中的ECL反应电极电极工作电极磁铁TPATPATPATPA光电倍增管电化学发光免疫反应过程2.测量池中的ECL反应电化学发光免疫反应过程3.电极表面的电化学发光反应标记免疫的发展简介电化学发光技术原理电化学发光技术特点内容 试剂稳定 测量范围宽，灵敏度高 特异性优异 检测菜单丰富 准确性好，精密度高 操作简便电化学发光技术特点试剂稳定性货架期18个月，开封后3个月 试剂稳定 测量范围宽，灵敏度高 特异性优异 检测菜单丰富 准确性好，精密度高 操作简便电化学发光技术特点检测范围宽，减少稀释
