1、两种基因敲除小鼠的培育,摘要,从美国哈佛大学引进了两种基因敲除小鼠。这两种品系小鼠的体内分别缺少Cystatin C（胱抑素C ）和 Cathepsin S（组织蛋白酶 ），简称C-C 和 C-S。在三年的培育过程中，我们对其生长繁殖、生理生化等一系列指标作了测定，现将结果汇报如下。,一、材料和方法,一、材料 1、动物：Cystatin C-null小鼠和 Cathepsin S-null小鼠。 2、饲料：浙江大学实验动物中心自己配制生产的全价饲料。水是普通自来水。皆经121度、20分钟、真空高压蒸汽灭菌。 二、方法 1、饲养：饲养于屏障系统内。空气为高效过滤，温度 湿度 压强 2、繁殖：雄鼠
2、8-9周龄，雌鼠7-8周龄即可配种。严格的兄妹交配，1雌 1雄长期同窝。仔鼠在3-4周后离开母鼠，按性别分笼饲养。 3、初生之日起，每周测定体重，至15周止。 4、统计1-5胎的繁殖情况。 5、BP98A-血压仪 6、动物心电图分析仪（日本软隆公司） 7、动物血细胞计数仪 8、罗氏全自动生化仪,二、结果,1、 Cystatin C-null小鼠和 Cathepsin S-null小鼠的生长,Cystatin C-null小鼠(),Cystatin C-null小鼠(),Cathepsin S-null小鼠(),Cathepsin S-null小鼠(),2、Cystatin C-null小鼠（C
3、-C）和 Cathepsin S-null小鼠（C-S）的繁育,T-Test,3 心电图,4 生理指标,5 血液常规,6 血液生化指标,三、讨论与结论,组织蛋白酶(cathepsin)是一大类裂解肽键的蛋白水解酶，其中组织蛋白酶 S(cathepsin s) 属于半胱氨酸蛋白酶,其作用非常广泛，参与机体多种生理、病理过程。它不但可敛细胞的炎性坏死，还参与细胞凋亡的调控 ，在多种疾病的发生发展过程中发挥重要的作用。 Cystatin C(Cys C) 又称半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C ,中译名为胱抑素C 是半胱氨酸蛋白酶的细胞外抑制剂,在cystatin 中含量最为丰富,并对细胞内蛋白的转换起作用。
4、它广泛存在于脊椎动物的组织中，参与炎症过程及一些神经性疾病。因此，这两类物质成为近来医学研究的热点,Cystatin C-null小鼠和 Cathepsin S-null小鼠是美国哈佛大学Guo Ping shi 教授研制培育的基因敲除小鼠。这两种品系小鼠的体内分别缺少Cystatin C和 Cathepsin，因此，是研究与Cystatin C和 Cathepsin S有关疾病的十分理想的动物模型。2005年11月份，浙江大学医学院附属二院的项美香教授获得哈佛大学的赠送，引进了两对种鼠。,这两个品系的小鼠是在C57BL/6的基础上，分别敲除了控制合成组织蛋白酶 S(cathepsin s)和
5、胱抑素C （Cystatin C)的基因后生产的。 两品系间的一些繁育指标如分娩间隔(天) 、产仔数、成活率(%)等没有多大差别，差异不显著。 但两品系间在生长上有差异。从第六周开始， Cystatin C-null小鼠的生长要比Cathepsin S-null小鼠生长的快。两者差异显著。,小鼠的生长发育跟周围的环境条件，如温度、湿度、光照、噪音等和饲养，饮水的关系十分大，甚至饲养员的喂养习惯都会影响到它们的生长。因此，世界上各地方，各实验室饲养的小鼠情况是不一样的。即使同一种品系，也会随着环境的不同而生长的不同。所以该两个品系小鼠的生长情况与来源于网上C57BL/6数据的可比性教差，只能参考。,谢 谢！,
