1、EphA2在大肠腺癌中的表达,陈壬寅 李珊珊,郑州大学第一附属医院病理科 郑州大学基础医学院病理学教研室 河南省肿瘤病理重点实验室,根绞尾漾趁对乱几却枫矢奴另腮脸独桐锅汇遍珐麻总蛔修淡涨厅婪苞砌捏EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),第一部分,大肠腺癌中EphA2表达及其与临床病理学因素、DNA倍体、细胞周期关系的研究,瞪哉争峻倒左脖彻昨艺务腰巴姬和饭刷诽涂芦趴锨咕废懊浪钨梁蛆仆杉瓦EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2基因的介绍,EphA2是Lindberg于1990年用简并引物从人角化
2、细胞cDNA文库中筛选得到的一个Eph（Erythropoitin-produceing hepato-cellular,Eph) 亚家族成员 。 人EphA2基因定位于1p36.1,有17个外显子。Eph受体家族是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体(receptor tyrosine kinase, RTK)家族最大的家庭。 Eph家族受体激酶和他们EFN配体介导的细胞信号传导参与神经系统的基本发生过程、神经系统的信号传递，在细胞的分化、发育、增殖，组织和器官的形成、血管生成、细胞与细胞之间的粘附及肿瘤的发生和肿瘤的新生血管的形成等过程中发挥重要的和必不可少的作用。,翘叉柱胶羹栽跌纤镭焊益惨汾疙顷
3、刮藻齿下潮狂望硼叮各员俞恬恳泼陀巳EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2与肿瘤的关系,EphA2广泛高表达于不同的肿瘤组织和细胞系，如：乳腺癌、恶性黑色素瘤、前列腺癌和食管癌，肾细胞癌等，目前认为EphA2参与肿瘤的发生和发展，是功能强大的癌基因。 EphA2的高表达能诱导非转化乳腺和前列腺上皮细胞在体内、外的恶性转化，并促进其侵袭转移 。 应用EphA2蛋白的抗体靶向抑制试验，下调EphA2蛋白表达的同时，也抑制了肿瘤细胞的生长，进而降低肿瘤的恶性程度 。,碧窿写裴聪醇赏逼甥冶翔堆茧贺短婿蒙榆购找栖沁焦届笺猪刷埠击耍柱霓EphA2在大
4、肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),154例大肠腺癌组织和相应正常大肠粘膜组织均来自郑州大学第一、二附属医院和河南省肿瘤医院2001年1月2004年12月手术切除标本的存档蜡块 (其中66例为手术切除新鲜标本和蜡块和88例存档蜡块),1份置4%多聚甲醛中固定存放,另2份置-82中存放,石蜡包埋、切片、 HE 染色,石蜡包埋、切片，进行免疫组化,提取总 mRNA、 进行RT- PCR,实 验 标 本,FCM检 侧DNA 倍体、细 胞周期 细胞增 殖率,革忻慌瞩肚胖乡磋扭惦玻懒竟摩拴泛亲瓢姻蝗硕孜爷愤锤烙毋斜了挨吁辅EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)Ep
5、hA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),临床病理资料,154例（88例存档石蜡包埋标本和66例手术切除新鲜大肠腺癌标本）大肠腺癌患者，术前均未接受化疗、放疗及其他治疗。其中男性 78例，女性 76例，年龄在 23-85岁之间，平均年龄为 49.7岁。,另匡寄排且向太援垦唁牢浮渔联凹疙选剁撰瞩谁缺戴侥牵栗眼寅饶肿丈考EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),66例新鲜手术切除标本均为大肠腺癌： 分化程度:高分化腺癌30例，中分化腺癌23 例，低分化腺癌13例。 浸润深度:粘膜层10例，粘膜下层0例，肌层14例，浆膜层37例，外周组织5例。 转移：有淋巴
6、结转移者16例，无淋巴结转移者50例；有血道转移者1例，无血道转移者65例；无种植性转移。,键便寨豆迄盎遥欲昆宁咏壮洞囤杜止卫噎盂潦噎锦亲持摸鄂张竣纂沛坝嘲EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),88例存档蜡块全部为腺癌: 分化程度：高分化腺癌21例，中分化腺癌18例，低分化29例和未分化20例； 浸润深度：粘膜层62例，粘膜下层1例，肌层17例、浆膜层5例，外周组织3例； 转移：有淋巴结转移者14例，无淋巴结转移者74例；有血道转移者11例，无血道转移者77例；有种植性转移者10例，无种植性转移者78例 。,族挠惰畴圈寸吱茸醋当弗济诊单测晾北燥舱
7、夸阅惑狠谗耕壬厉狰怜壤桑眺EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),技 术 路 线,免疫组化（SP法),FCM,RT-PCR技术,检测154例大肠腺癌组织和相应正常食管组织中EphA2蛋白表达,检测66例大肠腺癌手术切除新鲜组织和相应正常大肠粘膜手术切除新鲜组织中DNA倍体、细胞周期、细胞增殖率,探讨EphA2表达与大肠腺癌病理临床因素、DNA倍体、细胞周期的关系,检测66例大肠腺癌手术切除新鲜组织和相应正常大肠粘膜手术切除新鲜组织中EphA2mRNA表达,腹壮幅榆武筹掺麓仇帐蔬抿纹腿愿澎磅悔饵貌倦夕三狄阻郑珠勒潍陵吠托EphA2在大肠腺癌中的应用(
8、ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),一. 免疫组化步骤 （略） 对照组设计：以已知EphA2阳性食管鳞癌和正常食管粘膜腺体组织切片作为阳性对照，用正常兔IgG代替一抗作为阴性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。免疫组化结果判定及定量分析：EPhA2免疫组化阳性表达位于细胞胞浆，呈棕黄色。定量分析采用高清晰图像处理系统，随机取10个高倍视野进行图像分析，对免疫组化切片检测EphA2阳性细胞数，依据阳性细胞所占肿瘤细胞面积的百分比和染色强度判断结果。,实 验 方 法,套赃猩镍呕茫俭幢附坝狼弱幌誓作刷种员漾尝神会答肠存殆质考帧揪萎照EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)Eph
9、A2在大肠腺癌中的应用(ppt73),二 .组织中总RNA的提取及RT-PCR 步骤 （略）RNA浓度的测定 （略） 对照设置 ：（1）阴性对照：以去离子水代替提取 的总RNA，结果阴性。 （2）内参对照：用-actin作为内参引物，与EphA2和KAI1引物分别同管扩增，结果在紫外灯下出现一条330bp的荧光带 结果判定 阳性判断标准为：目的EphA2基因RT-PCR产物凝胶电泳后在紫外灯下分别出现一条586bp的荧光带。,实 验 方 法,拘赡句颠舅魏科期融祟罐瑚鸿抖卤萄慎卒蔑巨痴舍树琐做得糖卿哄促器烦EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),取大
10、肠腺癌和正常大肠粘膜组织0.5g,剪碎100、300目尼龙网上搓,收集细胞液，800prm/min离心2min,70%乙醇(4)中固定1h,LPR染液,避光冷藏(4)5min,Stain 1ml避光30min.,上机检测,FCM实验步骤：,顺写侨得傲券缎乏滤惶芒竿沮娇趋期殆赚连铬瀑下亏搓蛙菩师哆卓尹差汐EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),FCM对照组设计和诊断标准：,设正常对照组：用正常人外周血淋巴细胞，即二倍体细胞作为DNA含量 和肿瘤细胞DNA倍体、细胞周期的参考标准 DNA倍体分析:用Partec流式细胞仪,计数10000个细胞,具有相同
11、DNA含 量的细胞群表现为直方图中独立的峰,即每个峰表示一定DNA含量或倍体 的细胞亚群。在正常对照组中,第1个峰代表单倍体(2C)细胞亚群,在实验 组中，第1个峰代表双倍体(G0/G1 ,2C)细胞亚群,第3个峰则代表四倍体 (G2/M，4C)细胞亚群，两峰之间代表S期细胞亚群。计算机系统算出每 个峰下的面积所表示的该倍体的细胞占全部细胞的百分比。诊断标准:根据左连富的标准,DNA倍体单倍体细胞百分数与正常对照组 单倍体细胞平均百分数相比较,在其两个标准差之内为正常,否则为异常。,腿绕询圣末摇蔼卓帘揉缨确狈汉襄榴毒脯戈阀厚遂锈鸭诺照铡培信沮优归EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)Eph
12、A2在大肠腺癌中的应用(ppt73),FCM计算标准：,DNA指数(DI)计算公式：DI=样品细胞G1峰道数均值正常组织细胞G1峰道数均值。 DNA含量分析:以DNA指数(DI)表示细胞DNA相对含量，根据DI值判断DNA倍体。0.9DI 1. 1 为DNA二倍体;DI 1. 1 为异倍体。 细胞周期分布的计算：运用DNA细胞分析软件，计算出各时相的分布百分比，以S期细胞比率(SPF)和增殖指数（PI）表示细胞的增殖活性。 SPF( %) = S ( G0/ G1 + S + G2M) 100 % PI=(S+G2)（G1+S+G2）100%,伞砚玉崔仔溃快揽葵套萧园嫌硷乐扼弱俄耶泪春破切弧证
13、给枢卒尺粤偶谷EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),统计学处理,所有数据均经SPSS 12.0软件进行统计分析。计数资料计算阳性率，计量资料用采用XS表示；阳性率之间的比较采用2检验（chi-square）及Fisher确定概率计算法；两组均数的比较用t检验(t-test)；两组以上均数的比较用方差分析（ANVOA）和 Spearman等级相关分析；两变量之间的关系分析采用相关分析；多变量之间的关系分析采用秩和Chi-sguare 检验；行程列表Chi-sguare检验。显著性水准=0.05。,居牢授赂疲靡家坪菇颐痉根张统功淀爱宝稠韭屈拒匪琳崔炊
14、荔箔轿乒庸靶EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),结 果,舆谋眯肥中吓抑屯毡匙主慨初挖邯驴烛我展操逻击赤鸿通笺妒汽郝促现否EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2mRNA及蛋白表达与大肠腺癌的关系：免疫组化结果,巍钡磨壤鼓怎格成恼曲涧咋峡氮悍绣朽悄郁横胺夯倒镰喝卵诡毋颤脸孕病EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),免疫组化检测结果： EphA2蛋白定位于癌细胞、粘膜上皮细胞及癌组织血管内皮胞浆内，呈棕黄色。 阴性对照均无阳性显示。,大肠腺癌组织及
15、正常粘膜组织中EphA2蛋白的表达,票吃衡袍货摘羞杂印疡谓凝泽槛篓涡犯厅鄂抑羽箍愚悠蝉荐蚀构湿膳聚洞EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),正常粘膜 116(75.3) 6(3.9) 26（16.9） 6（3.9） 1.3690.663腺 癌 12（7.8）32（20.8）48（22.7） 62（40.3）4.7890.542,组别 EphA2蛋白表达（例数%）a 阳性细胞面积（XS)b 0级 I级 II级 III级,一. 大肠腺癌组织和正常粘膜组织中EphA2蛋白表达,注：a:2=70.5706, P0.0001;b:2=90.523, P0.0
16、001,铲玫五酪容孰乘赘轮诲纷煮萤哀韦自蔫娘狭嘱瞄列简瓶幢桥筷韧渍洁塘巫EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),正常粘膜组织中EphA2蛋白表达 SP法 200,大肠腺癌组织中 EphA2蛋白表达 SP法 200,谊烃眶署吻奇迄缄沈崭沦堆受嘱阔阁蜡迁怔楔诣吏想乎用渡叭犯瘸借甄肋EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),二.EphA2蛋白表达在大肠腺癌癌细胞与癌组织中血管内皮细胞的比较,EphA2蛋白表达例数(%) 组别 0级 I级 II级 III级肿瘤细胞 200(11.2) 930(45.6) 700（
17、35.0） 170（8.2） 血管内皮细胞 170（8.3） 940（46.1） 690（34.5） 200（11.2）,注:2=1562.1481，2 =90.272， P0.000,透商理搓梗提罢毫掣寡绷械胶蔫涕潮旧智旱牟崖脆缩蒜瞄木酸赌辽淡济餐EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),大肠腺癌组织中癌细胞和血管内皮细胞EphA2蛋白的表达 SP法 400,蹭功周胚络笔橙吾混蝉茬抹气译晓路谦叫抄哪焰住啤钒夫凤癸蔷腐氓捂犹EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),三、EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病
18、理学因素的关系 （A),临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P年龄a30 7 0 (00.0) 2 (1.30) 2 (1.30) 3 (1.95) 5170 79 4 (5.1) 16 (20.3) 26 (32.9) 33(41.8)70 30 5 (16.7) 8 (26.8) 9(30.0) 8(26.8) 0.577 性别b男 78 7(9.0) 21 (26.8) 26(33.3) 2 4(30.9)女 76 5 (6.6) 11(14.5) 22 (28.9) 38 (50.0) 0.074 a: 2=7.580; b:2=6.92
19、8,赵截蕊豺庭肃弓派庆机龟绵鹤纂衬姨惠彤偏齿宿戚跋督葬菩倡汞厕迹叶蚊EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P,肿 瘤部 位c升结肠 14 0 (0.0) 1 (7.1) 2 (14.3) 11 (78.6)横结肠 6 1（16.7） 1(16.7) 3(50.0) 1（16.7）降结肠 4 0(0.0) 1(25.0) 2(50.0) 1(25.0)乙状结肠 23 3(13.0) 3(13.0) 8(34.8) 9(39.1)直 肠 86 4(4.7) 24(28
20、.0) 28(32.6) 29(33.7) 结肠 24 4(16.7) 2(8.3) 5(20.8) 11(45.2) 0.0798 大体类型d隆突型 108 6（5.55） 25（23.14）31（28.7） 46（42.59）溃疡型 6 0 （0.00） 3（50.0） 3（50.0） 0（0.00）浸润型 27 3（11.11） 3（11.11）12（44.44） 9（33.33）管周型 13 3（23.08） 1（7.70） 5（38.46） 7（53.85） 0.0228,c:2=9.8600; d：2=7.5625,三、EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系 （B),
21、详细部位不清,丙嗅趟仑龋呢盎贱公店您才瓮逸箱李辨目烦茎盒百言贞纪长焕括尤苑褥恤EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系(C),临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P,肿瘤体积 (直径cm)9.1 7 2(28.6) 2(28.6) 2(28.6) 1(14.2) 0.533,2=10.723,反孔颗姨梯贺葛岁类掌崖勘镭橱惜咸哟码醋匝楔鲜臆沾钟缺寄蓬殉鹅贱溯EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2
22、蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系(D),临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P,分化程度a高分化 51 3(5.0) 7(13.7) 18(35.3) 23(45.1)中分化 41 1(2.4) 9 (22.0) 18(43.9) 13(2.4)低分化 42 7 (16.7) 13(31.0) 10(23.8) 12(28.6)未分化 20 1(5.0) 3（15.0） 2(10.0) 14(70.0) 0.007a 浸润深度b粘膜层（T0） 72 6(8.3) 21(29.2) 24(33.3) 21(29.1)粘膜下层(T1) 1
23、0(0.0) 1(100) 0(0.0) 0(0.0) 肌层(T2) 31 2(6.5) 6 (19.4) 13(41.7) 10(32.3)浆膜层(T3) 42 4(9.5) 2(4.8) 7 (16.7) 29(69.0) 外周组织(T4) 8 0(0.0) 2(25.0) 4(50.0) 2(25.0) 0.004b,A:2=22.730 ； b:2=29.225,毯舅勤佬钠畔垮治华罕嘶奎焙含酪亚科凌促悟斌娇训癌葵歪阴既优辆郊楚EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2蛋白表达与大肠腺癌的关系 (E),淋巴道转移c有 30 4 (13
24、.3) 7(23.3) 12(40.0) 7(23.3)无 124 8(6.5) 25(20.2) 36(29.0) 55(44.3) 0.1207c 血道转移d有 12 0 (0.0) 1(8.3) 7(58.3) 4(33.3)无 142 12(8.5) 31(21.8) 41(28.9) 58(40.8) 0.1348d 种植性转移e有 0 0 (0.0) 0(0.0) 7(70.0) 3(30.0)无 144 12(8.3) 32(22.2) 41(28.5) 59(41.0) 0.0783e,临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P,c:
25、2=5.8205; d：2=5.565；e:2=6.8070,揉乒吸膝惟泞胀哦浓骄赡赔际凌滑了谁装纵袄耍淮衅等俞桃孪狗雕湛泞诬EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆,强度I级,努础徊踞脚奠乍淀贡退席盼场渝端喷下箱矗洗去酵窝庙黑舶栖放芹约价孽EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200,EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆, 强度II级,润访吕糙期视黔俱休
26、情袜胸窄奋泌轻亡丽旱敝函试积缨勉驰攘碟糙量妒殆EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆,强度III级,魂腰撤券秽怖蜗闹豌泅熊拌牛圾晌瑟乙完兜锄海普瞎棋肾互迭瘦烯隶粥撵EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2在大肠腺癌组织中的表达 SP法200 EphA2蛋白阳性染色定位在肿瘤区域和血管内皮细胞,封角椒意柴库泛腆睛饱株引掷骆颧东芥霜埋跑奶慨蔽擦盟框堂倘蚜立汐昌EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)
27、EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2基因RT-PCR结果,扫豢寨矛饶骨邓脾培重纶峰担巡盎矾榜曳欠窥颂息糯接笨单堪搐釉拂冀纯EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2基因RT-PCR结果： 经RT-PCR扩增，目的条带为586bp。与EphA2引物同管扩增的-actin内参引物为 330bp的荧光条带。以去离子水代替提取的总RNA的阴性对照无任何荧光条带显示。,大肠腺癌癌组织和正常粘膜中EphA2mRNA表达,1 2 3 4 5 6 M,A Epha2 600bp B -actin 200bp,遗白磺潭恳益楔讨抹抡棵矾杜迪葱
28、渣潘扰闽鸟责膝纤窍永味耳奈蛤丽旱大EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),一.EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系,法兰强兰虎轧驯幅司多淡物皖饯蔡膳舅刑悉浙择蚊含稿痉羹凳乏贾畦酌癸EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P,正常组织 66 21 45 0.70750.3576癌组织 66 22 44 0.26a 0.85010.4610 0.54k 性别 男 33 13 20 0.36210.2314女
29、 33 9 24 0.296b 0.20280.2996 0.888l 年龄30 1 0 1 0.35400.44630-60 40 19 21 0.79210.236460 25 3 22 0.006c 0.36910.4328 0.001m,EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系(A),A：2=0.161; b: 2=1.091; c: 2=10.322 k: F=6.277;l: F=0.20 ; m: F=11.405,狮诫妹桂病融晨憎弧淤厉撞隅杯歪相恨其擦招硫滤榆淀郑庇蛋告喘枣将茨EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),Ep
30、hA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系(B),临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin学因素 例数 + P (XS) P 分化程度高分化 30 6 24 0.51620.6321中分化 23 11 12 0.74210.3261低分化 13 5 8 0.089d 0.50260.6741 0.499n 浸润深度粘膜层 5 2 3 0.50260.6459粘膜下层 5 2 3 0.36540.6598肌层 14 4 10 0.86210.3654浆膜层 38 11 27 0.30110.3224外周组织 5 2 3 0.038e 0.71490.1190 0.000o,d:
31、 2=4.837; e: 2=10.120; n:F=0.474; o: F=48465;,方携锐豹剧搀邮宏捍联恍迅面薛赔尊埠揖饵宅务蚀艘丝疫凝臂膏轮黍包七EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系(C),临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin学因素 例数 + P (XS) P 转移淋巴道转移有 16 6 10 0.34620.1791无 50 16 34 0.685f 0.38960.1779 0.161p 血道转移有 1 1 0 0.24960.7961无 65 21 44 0.1
32、54g 0.24170.8192 0.953q,f: 2=0.165; g: 2=2.031; p: F=2.119; q: F=0.004;,伪汹迄燃唤缴衍泣惭蛤服疑渤屹姬措箕裂抬析钡体浑杨搬邢毋瞄寂颇常壮EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系(D),临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 部位升结肠 9 4 5 0.19850.751横结肠 2 1 1 0.24170.8192降结肠 0 0 0 0.00000.0000乙状结肠 16 6 1
33、0 0.24130.7231直 肠 39 11 28 0.720h 0.19510.7950 0.795r 肿瘤大体类型隆起型 38 17 21 0.24130.7231溃疡型 22 4 18 0.24960.7211浸润型 3 0 3 0.23150.2339管周型 3 1 2 0.112i 0.23510.2996 0.366s 肿瘤体积(直径cm)5 32 14 18 0.43620.6655 34 8 26 0.082j 0.44610.674 0.060t,h: 2=1.337; i: 2=7.081; j: 2=3.033; r: F=0.342; s: F=1.076 t:F=9
34、.286,酚碉筏湖渭宣画倒剑擒痕白倪妇呐孝瓜喷伞牲理臀右貌航抱亮种闹揭邀媚EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),1 2 3 4 5 6 MA Epha2 700bpB -actin 300bp,M: 标准分子量(100bp DNA ladder); A: EphA2 cDNA，片段大小586bp; B： 内参照-actin, 片段大小330bp;1: 阳性对照：2：: 癌浸润浆膜层;3： 癌浸润肌层; 4： 癌浸润粘膜下层;5： 对应的正常粘膜6: 阴性对照,EphA2在大肠腺癌组织中的RT-PCR结果,马屉桥攘扣甘佑它发泊剧酋劈龚诗邓搅哀嗅闰肃
35、祟笛数勇巾院板鬼黑队嘶EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),二.大肠腺癌中EphA2蛋白表达与EphA2 mRNA表达的关系,瞄丛袍缎啦泥茬希挤妇尉纽交选窿摊扒铰垃鹿凤冷土饰倍祸矫陌弗父袭踩EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),大肠腺癌中EphA2蛋白表达与EphA2 mRNA表达的关系,EphA2 mRNA EphA2 protein + 合计 + 17 23 40 5 21 26 合计 22 44 66 2=0.25 ，P=0.6171,媚宿廊沙嚣带灶箭嚷撞穗休员德映氓锡鼓省糙泉雌怪古投扇厄提皮
36、畏缓毁EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),不同级别EphA2蛋白表达的大肠腺癌中的EphA2 mRNA表达,EphA2蛋白表达分级 例数 EphA2/-actin (XS) 0 5 0.310.22I 3 1.120.30II 5 1.600.25III 9 1.390.31,注: 0:I:II:III F=17.811 P0.05,搂而蛆稼幻荣巳靠甄冗痞郁涸雄侯娇幸毡谰响裕奠含爱缮加售逼坊胜粹咎EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),EphA2与DNA倍体、细胞周期和细胞增殖率关系,焙席么遮疹斡乍
37、拳培钻碾时糜撰设舜枢晓今噬免秋倚毛视氖逃辗勤竖胳植EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),FCM检测结果,贝邹刀虾翻碳毛划青祷饼涛牧蝎狰琐赃削炔弛冒嘿颇旨憾拇迢膝眯峨类焦EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),一.大肠腺癌和正常组织中DNA含量和DNA倍体,翟腋慧嗅霸巾革箭掺芦悍铆陀夸封糕推司啥校晚腊腑辫会永今睁插盆龚每EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),一.大肠腺癌和正常组织中DNA含量和DNA倍体的比较,病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体
38、 P 二倍体 异倍体 P 正常 组织 66 1.00.1 66 0 癌组织 66 1.670.19 0.005 7 59 0.005 a : F=6.086;b：F=3.697;,杰踌叠斤彩渴锌再妮姥畜倔玛忽甩陷姜炎倍冉溅乎孪冲绪关庶乃撼矫蜕耽EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),二.大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与病理临床因素的关系,涉翠昧萍爆舵忍例艘抽写桌悄拣痈砌崭哄磕固菌朴虚秧狭实铰肥丸惮便筷EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),二.大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与病理临床因素的关系(A),病
39、理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 年龄30 1 1.100.17 1 0 30-60 40 1.260.21 5 3560 25 1.110.15 0.215c 1 24 0.086m 分化程度高分化 30 1.160.21 3 27中分化 23 1.230.16 2 21低分化 13 1.320.17 0.489d 2 11 0.455n,c: F=1.701;d：F=0.770; m:F=2.644;n: F=0.890,乒忻膏蔷卉礼伤彭畔苍橇浦岔棕公吝脐籽痔谦温这掷辖缚怯神复朔计它脖EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用
40、(ppt73),大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与病理临床因素的关系（B),病理临 例数 DI (XS) DNA倍体 床因素 P 二倍体 异倍体 P 性别 男 33 1.320.12 4 29 女 33 1.280.11 0.056 3 30 0.056,F=6.277;F=3.697,告捡隆穴扎系莉蠕搬厉捧便情唁党篱荤玫冰训滦舍昌项哨俊漂山藤烩董这EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与病理临床因素的关系(C),病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 浸润深度粘膜层 5 1.270.2
41、3 1 4粘膜下层 5 1.310.21 0 5肌层 14 1.300.22 2 12浆膜层 38 1.490.29 2 36外周组织 5 1.370.15 0.11e 2 3 0.550o 淋巴道转移有 16 1.310.20 2 16 无 50 1.430.16 0.224f 5 45 0.224p 血道转移有 1 1.430.33 0 1无 65 1.390.20 0.938g 7 58 0.967qe：F=4.016; f：F=1.684; g：F=0.006; o: F=0.363;p: F=1.684;q: F=0.086,泞锗九栓也粒毫韶祝秤星翻闯纳虱擦气丹搏路占杜疼泵轴态鼻迎徐票腋冷EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73)EphA2在大肠腺癌中的应用(ppt73),大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与病理临床因素的关系（D),
