1、,化脓性细菌,病原生物与免疫学,知识要点,化脓性细菌主要包括革兰阳性的葡萄球菌、链球菌和肺炎链球菌及革兰阴性的脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。通常能引起机体的化脓性炎症。,2018/10/16,学习目标,掌握葡萄球菌、链球菌、淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌主要生物学性状、致病性； 熟悉常见病原性球菌所致疾病及实验室检查方法; 了解各种病原性球菌标本采送、检验及防治原则。,前 言,化脓性细菌是指能够感染人体引起化脓性炎症的一类细菌总称。临床最常见的化脓性细菌有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。,最常见的化脓性球菌，堆积成葡萄状而得名； 分布于自然界人的皮肤和与外界相通的腔道中； 金黄色
2、葡萄球菌引起的感染最为常见(80%)；,第一节 葡萄球菌属,（一）形态与染色 球形, 直径1m 群体存在，排列呈葡萄状 革兰染色阳性 无芽胞，无鞭毛 致病性葡萄球菌有荚膜,一、生物学性状,（二）培养特性,营养要求不高，耐盐（10%）需氧或兼性厌氧液体培养基中呈均匀混浊生长固体培养基中菌落特征有色菌落: 金黄色、白色、柠檬色 血平板: 透明溶血环能缓慢分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气 致病菌凝固酶阳性、分解甘露醇,（三）分类 根据色素、生化反应分3种,金黄色葡萄球菌 金黄色色素，致病菌凝固酶（+）耐热核酸酶（+）甘露醇（+）SPA （+） 表皮葡萄球菌 白色色素，其他（-），条件致病菌 腐生
3、葡萄球菌 白色或柠檬色，其他（-），不致病,三种葡萄球菌的主要性状,（四）抗原结构,1. 葡萄球菌A蛋白（Staphylococcal protein A, SPA）与肽聚糖共价结合的单链多肽SPA与IgG的Fc结合后具有：抗吞噬促细胞分裂 引起超敏反应损伤血小板 与人、哺乳动物的IgG Fc段非特异结合：协同凝集实验 2. 荚膜抗原 胞壁中的核糖醇磷壁酸，利于细菌黏附，引起感染。,协同凝集试验,IgG,金葡菌,抗原,凝集（肉眼可见）,（五）抵抗力 强于其他无芽胞菌,干燥脓汁、痰液中存活2-3个月加热80 30 min耐盐性强（10%氯化钠）对红霉素、链霉素、氯霉素敏感易产生耐药性90% 对染
4、料龙胆紫敏感,（一）致病物质 凝固酶（Coagulase） 葡萄球菌溶血素（Staphylolysin） 杀白细胞素（Leukocidin） 肠毒素（Staphylococcal enterotoxins） 表皮剥脱毒素（Exfoliative toxin） 毒性休克综合征毒素-1 (toxic shock syndrome toxin-1， TSST-1 ),二、致病性,概念 使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质 意义：鉴别有无致病性的重要指标 分型：游离型和结合型 致病机理： 使纤维蛋白原变成纤维蛋白，沉积在菌体表面 抵抗吞噬细胞的吞噬 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏
5、 病灶特点：病灶局限、不易扩散、而且脓汁粘稠。,凝固酶(Coagulase),葡萄球菌溶血素(staphylolysin),外毒素，为蛋白质，不耐热分、五种，致病的主要是溶解人和多种哺乳动物的血细胞、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞经甲醛脱毒可制成类毒素,杀白细胞素(leukocidin),破坏中性粒细胞和巨噬细胞抵抗宿主吞噬细胞的吞噬,肠毒素(enterotoxin),外毒素，蛋白质，对热稳定，不受胃蛋白酶影响。分A-I 9个血清型，以A型最多见引起急性胃肠炎即食物中毒作用机制：到达中枢神经系统后，刺激呕吐中枢而导致以呕吐为主要症状的食物中毒,表皮剥脱毒素(exfoliative toxi
6、n),外毒素：使表皮与真皮剥离引起的烫伤样皮肤综合征 （staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS），又称剥脱性皮炎，多幼儿和免疫功能低下的成人,毒性休克综合征毒素-1 (toxic shock syndrom toxin-1， TSST-1),引起毒性休克综合征（toxic shock syndrome，TSS） 机体发热，休克及脱屑性皮疹,（二）所致疾病,侵袭性感染 皮肤与软组织：疖1个毛囊的化脓性感染痈相邻若干个毛囊的化脓性感染病灶局限，伤口化脓，浓汁黄而粘稠 内脏器官：肺炎等 全身：败血症、脓毒血症 毒素性疾病 食物中毒：肠毒素 假膜性肠炎：B
7、型毒素，不合理使用抗生素 烫伤样皮肤综合征：表皮剥脱毒素，新生儿和免疫低下者 毒性休克综合征：TSST-1，多见于女性,（三）免疫性,人类对致病性葡萄球菌有一定的天然免疫力。只有当皮肤粘膜受创伤后，或机体免疫力降低时，才易引起感染。患病后所获免疫力不强，难以防止再次感染。,小猫试验,标 本,脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等,分离培养,血浆凝固酶 发酵甘露醇 耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素，溶血,生化反应,毒素检查,三、实验室检查,防治原则,防,注意 个人卫生,防止 医源性感染,防止 耐药性产生,抗生素 药敏试验,自身菌苗疗法 类毒素,加强食品卫生管理,四、防治原则,广
8、泛分布于自然界、人及动物的粪便和健康人的口腔、鼻咽部，大多数为正常菌群。对人类致病的主要是乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌，主要引起化脓性感染、猩红热、风湿热、肾小球肾炎等。,第二节 链球菌属,（一）生物学特性1.形态与染色球形, 直径1m 革兰阳性，链状排列，无芽胞，无鞭毛，有荚膜,一、链球菌,2. 分类（1）溶血现象分类甲型溶血性链球菌(-hemolytic streptococci)乙型溶血性链球菌(-hemolytic streptococci)丙型链球菌(-streptococci),（2）抗原结构分类 20（A-V）个群，致病菌90%左右属A群 A群据M抗原，100个型 （3）对氧的需
9、求分类 需氧性 兼性厌氧 厌氧性,3. 培养特性与生化反应,兼性厌氧 营养要求较高（血液、血清、葡萄糖） 菌落特征：圆形、光滑、灰白色，血平板有不同溶血 液体培养基中呈絮状沉淀生长 触酶（-）、不分解菊糖、不被胆汁溶解,4. 抗原构造, 多糖抗原，有群特异性，是分群依据。 蛋白抗原，有型特异性，与致病有关的是M蛋白。 核蛋白抗原，无特异性。,5. 抵抗力 较弱,（1）加热60 30min可被杀死 （2）对常用消毒剂敏感 （3）在干燥的尘埃中生存数月 （4）对青霉素、红霉素及磺胺药物敏感，不易产生耐药性,1. 致病物质 A群 （1）致热外毒素（红疹毒素）：猩红热 （2）链球菌溶血素(strept
10、olysin) SLO，SLS 血清学试验：抗链球菌溶血素O抗体试验（ASO）用链球菌溶血素O作为已知抗原，测定患者血清中相应抗体，辅助诊断风湿热。抗“O”效价1:400以上可结合临床作出诊断。 （3）M蛋白（超敏反应） （4）透明质酸酶（扩散因子） （5）链激酶(streptokinases, SK)：溶解血块，利于扩散 （6）链道酶(streptodrnase, SD ：分解脓液的高粘度DNA,（二）致病性,A群链球菌所致疾病 （1） 化脓性疾病 淋巴管炎、痈、咽炎、丹毒 （2） 中毒性疾病 猩红热 （3） 超敏反应性疾病 急性肾小球肾炎 风湿热,2. 所致疾病,其他链球菌所致疾病 （1）
11、 甲型溶血性链球菌口腔、鼻咽腔正常菌群 亚急性细菌性心内膜炎 龋齿 （2） B群链球菌人类呼吸道、阴道、直肠正常菌 新生儿：败血症、脑膜炎 婴幼儿：败血症、化脓性关节炎、肺炎 成年人：肾盂肾炎、肺炎、子宫内膜炎 （3） D群链球菌条件致病,3. 免疫性,A族链球菌感染后，可产生特异免疫，主要是M蛋白的抗体（lgG）。由于型别多，无交叉免疫性，故易反复感染。猩红热病后可产生对同型红疹毒素的抗体，建立对同型牢固免疫力。,1. 标本采集 2. 直接涂片染色镜检 3. 分离培养与鉴定 4. 抗链球菌溶血素O抗体试验 (antistreptolysin O test，ASO test）原理：是一种外毒素
12、与抗毒素的中和试验，采用SLO检测血清中的抗链球菌溶素O抗体含量意义：常用于风湿热的辅助诊断，活动性风湿热患者血清中抗O抗体效价在1:400以上 5. 分子生物学方法,（三）实验室检查,1. 及时治疗病人及带菌者。2. 对急性咽峡炎和扁桃体炎患者，应彻底治疗，防止急性肾小球肾炎、风湿热等超敏反应性疾病的发生。3. A群链球菌感染的治疗，青霉素G为首选药物。,（四）防治原则,通称肺炎球菌常寄居于人类上呼吸道机体抵抗力下降时发病主要引起大叶性肺炎,二、肺炎链球菌,1. 形态与染色 革兰染色阳性球菌直径约1m、成双排列矛头状，钝端相对形成较厚荚膜无鞭毛，无芽胞,（一）生物学性状,需氧或兼性厌氧，营养
13、较高 血平板上培养24h产生灰白色菌落，周围草绿色溶血环（溶血）与甲链相似，因产生自溶酶，培养超过48h形成 “脐状”菌落 液体培养基24h混浊生长，稍久自溶变澄清 可被胆汁溶解（5-10min） 可发酵菊糖,与草绿色链球菌区别,2. 培养特性及生化反应,3. 抗原构造与分型 1. 荚膜多糖抗原： 分90个血清型 2. C物质：存在于该菌细胞壁上的特异性多糖，能被人血清中的C反应蛋白(C reactive protein，CRP)所沉淀，CRP正常人只含微量，急性炎症时剧增，故可用C多糖测定CRP，辅助诊断活动性风湿热（急性炎症） 3. 分解菊糖 4. 抵抗力 较弱，对一般消毒剂敏感 对青霉素
14、、红霉素敏感,1. 致病物质荚膜，最主要溶血素O紫癜形成因子神经氨酸酶 2. 所致疾病 大叶性肺炎 机体抵抗力下降时发病 突然发病，表现高热、寒战、胸膜剧烈疼痛、咳铁锈色痰,3. 免疫性 建立较牢固的型特异性免疫同型病菌的再次感染少见,（二）致病性与免疫性,1. 标本 如痰液、脓液、血液、脑脊液等 2.直接涂片染色镜检 3.分离培养与鉴定 鉴别试验：胆汁溶菌试验菊糖发酵试验 4.动物试验,（三）实验室检查,由于肺炎球菌对多种抗生素敏感，早期治疗通常患者可很快恢复 青霉素G为首选治疗药物,（四）防治原则,奈瑟菌属（neiseria）主要寄居在人类的鼻咽部、胃肠道和泌尿生殖道，一般不致病。对人类致
15、病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。,第三节 奈瑟菌属,（一）生物学特性1. 形态与染色 肾形、凹面相对的双球菌革兰阴性新分离株大多有荚膜和菌毛多位于患者中性粒细胞内,脑膜炎球菌（meningococcus）,流行性脑脊髓膜炎（流脑）,一、脑膜炎奈瑟菌,营养要求高巧克力色血琼脂平板 专性需氧 初次分离培养需5%10%CO2 似露滴状小菌落 易产生自溶酶 分解葡萄糖和麦芽糖 氧化酶及触酶（+）,2. 培养特性与生化反应,3.抗原构造及分类荚膜多糖抗原：分群依据，13个血清群，C重要外膜蛋白：分型依据，20个血清型脂多糖抗原：主要致病物质（内毒素）核蛋白抗原,对寒冷、干燥、热等极为敏感 在室温中3h
16、死亡 对各种消毒剂敏感 对青霉素、磺胺药敏感 （对磺胺药易产生耐药性）,4. 抵抗力,很弱,（二） 致病性,1. 致病物质荚膜：抗吞噬，增强侵袭力菌毛：有利于细菌黏附和侵入内毒素：引起小血管、毛细血管坏死、出血，导致皮肤淤斑、肾上腺出血、微循环障碍、DIC、中毒性休克2. 所致疾病流行性脑脊髓膜炎（ Epidemic meningitis ）( 流脑 ),流行性脑脊髓膜炎（流脑）,传染源：病人、带菌者 传播途径：飞沫经呼吸道侵入 发病年龄：15岁以下者 发病季节：冬春季,脑膜炎球菌 人体鼻咽部 上呼吸道| 机体免疫力降低 血流 内毒素 菌血症、败血症 突然寒战、发热、呕吐、皮肤瘀点和瘀斑| 血
17、-脑脊液屏障 脑脊髓膜化脓性炎症 出现脑膜刺激（剧烈头痛、喷射性呕吐、颈项强直） 中毒性休克和DIC 死亡,临床类型：普通型暴发型慢性败血症型,3. 免疫性,以体液免疫为主 成人交叉抗原而获得一定的免疫性。儿童因免疫力弱（最高6个月2岁儿童），发病高,（三）实验室检查,（1）标本 （2）直接镜检 （3）分离培养与鉴定 （4）快速诊断SPA协同凝集试验对流免疫电泳,脑脊液 淤血点 血液（增菌）,涂片，染色检查,巧克力血平板 （观察菌落特征）,涂片染色 生化反应 生长特征 血清凝集,预防 早发现、早隔离、早治疗 流脑疫苗 治疗- 青霉素、磺胺大剂量治疗,接种流脑疫苗,（四）防治原则,淋球菌 ( g
18、onococcus ) 淋病，发病率最高的性传播疾病。,（一）生物学特性1. 形态与染色 与脑膜炎奈瑟菌相似革兰阴性肾型，凹面相对，成双排列脓汁标本中存于中性粒细胞里慢性淋病常在细胞外无芽胞、无鞭毛新分离菌株有荚膜和菌毛,二、淋病奈瑟菌,2. 培养特性与生化反应,专性需氧营养要求高初次培养用巧克力色血平板37，5-10CO224-48h形成圆形、凸起、灰白光滑型菌落继代培养菌落变大且粗糙,分解葡萄糖产酸，不分解麦芽糖，与脑膜炎奈瑟菌区别产生氧化酶和过氧化氢酶,3. 抗原构造与分类 菌毛 脂多糖 外膜蛋白 P：主要外膜蛋白（60%），分46个血清型直接插入中性粒细胞膜使其损伤 P：与吸附易感细胞
19、有关 P：抑制抗体杀菌 4. 抵抗力 抵抗力弱，在自然界迅速死亡 对大观霉素（淋必治）和头孢曲松钠（菌必治）敏感 易产生耐药性,（二）致病性与免疫性1. 致病物质 菌毛 (Pili)：粘附 荚膜（capsule）：抗吞噬 脂多糖（LPS）：损伤上皮细胞 外膜蛋白（ OMP） P：直接插入中性粒细胞膜使其损伤P：与吸附易感细胞有关P：抑制抗体杀菌 IgA1蛋白酶,损伤吞噬细胞,淋球菌粘附,2. 所致疾病,淋病 男女泌尿道、生殖道化脓性感染 发病率最高的性传播疾病：66.1-63.3% 传染源：人类是唯一宿主 传播途径：近距离传播 性传播 间接传播 垂直传播 新生儿淋球菌性眼结膜炎（化脓性） 垂直
20、传播,3. 免疫性,人类对淋球菌普遍易感，多数患者可自愈感染后机体可产生特异性IgM、IgG和分泌型IgA抗体但由于淋球菌抗原易变异，反复感染的现象普遍,标本 泌尿生殖道、眼结膜脓性分泌物 直接涂片镜检 分离培养与鉴定 巧克力色培养基 快速诊断法 ELISA法、核酸杂交、PCR技术,（三）实验室检查法,对患者应早期用药，彻底治疗 大观霉素（淋必治）和头孢曲松钠（菌必治） 婴儿出生时，1%硝酸银滴眼,（四）防治原则,第四节 铜绿假单胞菌,铜绿假单胞菌俗称绿脓杆菌，分布广泛，是一种常见的致病菌，多见于伤口感染，可导致菌血症和败血症。,（一）形态与染色革兰阴性、有荚膜、有端鞭毛和菌毛、 （二）培养特
21、性营养要求不高，专性需氧。3524h培养，可形成圆形、大小不一、扁平、隆起、光滑菌落，可产生水溶性色素（绿脓素），使培养基呈绿色。能分解葡萄糖产酸，利用枸橼酸，分解尿素，液化明胶，氧化酶阳性。,一、生物学性状,（三）抗原结构与分类具有O、H抗原O抗原可作为血清分型的依据 （四）抵抗力抵抗力较强：551h可被杀灭对多种抗生素耐药对多粘菌素、羧苄青霉素及新型沙星类及头孢类抗生素等敏感,二、致病性,（一）致病因素内毒素、菌毛、荚膜、胞外酶和外毒素 （二）所致疾病正常菌群菌烧伤、创伤等感染局部感染可导致菌血症,本章小结与知识拓展,葡萄球菌和链球菌引起的化脓性感染有何不同，为什么？ 葡萄球菌所致化脓性感染的特点为脓汁粘稠、病灶局限。因葡萄球菌具有血浆凝固酶，使病灶周围的血浆凝固。链球菌所致化脓性感染的特点为病灶与周围界限不清，有扩散趋势，脓汁稀薄。因链球菌具有链道酶，透明质酸酶和链激酶，使其感染易于在组织中扩散。,
