1、机能学实验,实验目录,实验目录,机能学实验目的,使学生正确使用生理学的基本实验仪器，初步掌握基本操作技术； 使学生了解获得知识的基本方法和初步分析整理实验结果的能力，并借以验证和巩固理论课的某些基本理论。 在实验过程中培养学生对科学工作的严肃的态度，严格的要求，严密的工作方法和实事求是的工作作风。 通过实验逐步培养学生具有敏锐的观察力，比较、分析和综合的能力以及独立思考的能力，以便循序渐进地完成医学院校学生基本技能的训练任务。,实验报告的书写,自行操作的实验，每人均须做实验报告，学期终了将全部报告交给指导老师考核。 实验报告应在下一次实验前交给指导教师，无特殊原因不得延误。 题头部分：班级、姓
2、名、学号、组别、实验时间、实验题目实验室号、指导教师 正文：目的 实验器材 方法步骤 结果 结果分析及讨论 结论,实验室规则,遵守纪律，因故外出或早退应向老师请假。进实验室必须穿隔离衣。实验时应严肃认真，不进行与实验无关的活动。 实验者必须先熟悉仪器使用要点，仪器损坏或失灵，应请老师修理或调换。违章操作致使仪器损坏者，应按章赔偿。 实验器械，用后洗净擦干，如数归还。若有损坏或遗失，应及时报告，酌情赔偿。 爱护公物，节约器材、药品和动物。实验物品不得擅自带离实验室。 实验结束，将本组实验器材和桌凳收拾干净，将动物尸体及污物投放指定处。实验室由各组轮流打扫，保持整洁。,实验一 坐骨神经腓肠肌标本的
3、制备刺激强度和频率与骨骼肌收缩的关系,目的要求,1、学习坐骨神经腓肠肌标本制备方法。 2、观察不同的刺激强度和频率与骨骼肌收缩形 式之间的关系。,实验器材,1.药品与器材 任氏液。蛙板，玻璃板，蛙类手术器械1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪各1把，大、小镊子各1把，探针1根，玻璃分针2根)，培养皿，锌铜弓，丝线，图钉，肌动器，张力换能器；BL-410生物机能实验系统。 2.实验对象 蟾蜍。,方法步骤 1.制备坐骨神经腓肠肌标本破坏脑和脊髓-图A 剪去躯干上部及内脏-图B 剥皮 、洗手及器械、分离两腿 制作坐骨神经腓肠肌标本-图C.D用锌铜弓检查标本兴奋性,A,B,C,D,2.将标本固定在肌动器内，连
4、接张力换能器。 3.打开电脑，进入BL-410生物机能实验系统。实验项目神经肌肉实验刺激强度与反应的关系刺激频率与反应的关系,结果 1. 阈刺激、阈上刺激、最大刺激,2.单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩,注意事项1. 实验过程中经常用任氏液湿润标本，以防干燥。 2. 股骨不可保留过短，否则标本不好固定。 3. 分离神经须用玻璃分针，不能用金属器械。 4. 避免过长时间地连续刺激标本，以防标本疲劳。,思考题,1为什么要用任氏液湿润标本？ 2锌铜弓为什么能够检验神经肌肉的兴奋性？,实验二 神经干动作电位的引导、传导速度和不应期的测定,目的要求,学习神经干标本的制备。 观察坐骨神经干的单相、双相
5、动作电位、双向性传导并测定其传导速度。 观察机械损伤对神经兴奋和传导的影响. 学习绝对不应期和相对不应期的测定方法. 了解蛙类坐骨神经干产生动作电位后其兴奋性的规律性变化.,实验器材,1.仪器与材料：生物信号处理系统、解剖针、手术剪、眼科剪、圆头手术镊、尖头手术镊、玻璃勾针、神经屏蔽盒及连接导线，棉花、蛙板、烧杯。 2.药品：任氏液 3.动物：蟾蜍或蛙,方法步骤,1.坐骨神经干标本的制备 毁脑脊髓 剪除躯干上部及内脏 剥皮（之后洗净双手和用过的全部手术器械） 完成坐骨神经标本 分离两腿 游离坐骨神经 完成坐骨神经标本,剪除躯干上部及内脏 图4-1-4 剥去皮肤,标本的制备,2.连接实验装置 3
6、.实验观察 双相动作电位的观察： 单项动作电位的观察：在两记录电极之间滴上KCl溶液，观察动作电位的变化。观察到变化后，用任氏液洗掉KCl溶液，直至动作电位恢复。 刺激强度与复合动作电位幅值的关系 测定神经干动作电位的传导速度。 不应期的测定：,动作电位传导速度的测定 Measurement of Conduction Velocity of AP,+,S,t,刺激器,输入通道,R1- Rr1+ R2- R2+,双相动作电位 Biphasic Action Potential,注意事项,标本剥制过程，尽量减少神经的损伤； 刺激参数设置要合理，过大会损毁神经。 双刺激的参数要一致。,结果,观察和
7、记录神经干动作电位并对其特性进行分析； 测出动作电位的各个时期； 测出绝对不应期和相对不应期。,解释在一定范围内神经干动作电位的振幅随刺激强度而改变，是否与单个神经纤维动作电位的“全”或“无”定律相矛盾？ 改变神经干的方向后，动作电位的波形发生了什么变化，为什么？ 分析KCl溶液对动作电位影响的机理。 利用现有仪器和记录动作电位的方法，设计一个测定坐骨神经不应期的实验，讲清楚实验原理？,思考题,实验三 呼吸运动的调节及影响因素（综合实验）,目的要求 1、学习用BL-420E生物机能实验系统描记呼吸运动的方法。 2、观察某些神经体液因素对呼吸的影响。 3、观察药物对呼吸运动的影响。 4、掌握实验
8、动物呼吸运动的描记方法。,实验器材 1、仪器与材料BL-420E生物机能实验系统，哺乳类动物手术器械、气管插管、50CM的橡皮管、缝合针、呼吸换能器 2、药品25氨基甲酸乙酯、3%乳酸、CO2气体2%盐酸吗啡，10%尼可刹米 3、动物健康家兔，体重2-3Kg,方法步骤 （一）手术操作1.称重、麻醉、固定2.颈部手术，气管插管，分离双侧迷走神经，3.剑突部位剪毛，将连接换能器的缝合针，固定于剑突处。 （二）仪器连接,（三）实验观察项目1、描记正常呼吸曲线（频率，幅度）2、增大解剖无效腔3、增加吸入气中CO24、耳缘静脉注射3乳酸0.5ml5、观察药物对呼吸的影响腹部皮下注射2盐酸吗啡，呼吸抑制。
9、立即耳缘静脉注射10尼可刹米100mg,观察呼吸变化。,6、先剪断一侧迷走神经，观察呼吸变化，再剪断对侧迷走神经观察呼吸变化。 7、电刺激迷走神经中枢端，观察呼吸的变化。,注意事项 1、气管插管时，注意防止切口出血过多，避免吸入肺影响肺通气。 2、每项实验均要有正常呼吸曲线作为前后对照 思考题 1、缺O2、CO2和H+对呼吸运动的影响机制有何不同？ 2、分析迷走神经在节律呼吸运动中起何作用? 3、吗啡、尼可刹米对呼吸运动有何影响？作用机制是什么？,实验四 蛙心起搏点的观察、期前 收缩与代偿间歇、蟾蜍心脏灌流，胃肠运动观察（录像）,目的要求1.学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏的结构。2.观察心脏
10、起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。 实验原理1. 两栖类动物的心脏解剖2. stannius结扎 实验器材 动物：蟾蜍 仪器及药品：蛙类手术器械，丝线，任式液。,一、蛙心起搏点的观察,方法步骤1.破坏脑脊髓 。2. 仰卧位固定于蛙板上。3.打开胸腔暴露心脏 ，观察心脏的结构 。4. 斯氏结扎，记录结果。,实验结果及理论分析,斯氏结扎记录表（次/分钟）,两栖类动物的心脏为两心房、一心室，心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的自动节律最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。,实验目的1学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。2观察心
11、脏在兴奋过程中兴奋性的变化。 实验原理心肌的有效不应期（收缩期，舒张早期） 实验器材动物：蟾蜍仪器及药品：BL-420生物实验系统，刺激电极，蛙心夹，张力换能器，蛙类手术器械，任式液。,二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇,方法步骤1. 破坏脑脊髓 2.仰卧位固定于蛙板上。3. 打开胸腔暴露心脏4. 蛙心夹于心脏舒张期夹住心尖 5. 连接张力换能器和刺激器6. 选择合适的刺激强度 ；分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激，观察心跳曲线的变化。,实验结果,讨论,结论,1. 蟾蜍毁髓时要彻底。 2. 实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。 3. 刺激电极要与心室肌接触良好，应避免短路。 4. 心跳
12、曲线的上升支应代表心室收缩，下降支代表心室舒张，如相反则应将换能器倒向。 5. 先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以检测强度是否适宜。 6. 每个组蛙心夹留在支架上，勿丢失。,注意事项,思考题,1.正常情况下，为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点？它对潜在起搏点如何控制？ 2.每次结扎后会出现什么现象，为什么？ 3.如何证实心肌有较长的不应期？心肌的较长不应期有何生理意义？ 4.期前收缩后一定出现代偿间歇吗？为什么？ 5.代偿间歇是怎样产生的？ 6.为何期前收缩幅度有时比正常心缩幅度高，有时比正常心缩幅度低？ 7.为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现？,窦房沟,实验五 心血管活动的神经体液调节及影响因素
13、(综合实验),目的要求,学习哺乳类动物动脉血压的直接描记方法； 观察神经体液因素对心血管活动的影响； 掌握哺乳类动物手术常规； 熟悉BL-420生物机能实验系统； 复习相关理论课内容。,实验器材,1.仪器与材料：BL-420生物机能实验系统，压力传感器，塑料动脉插管 2.药品：25氨基甲酸乙酯（麻醉），1：10000去甲肾上腺素（升压）5%肝素（抗凝） 3.动物：家兔,arterial cannula,Urethane,方法步骤,1.称重、麻醉、固定： 25氨基甲酸乙酯4mL/kg(理论估计值)由耳缘静脉缓慢注入，观察麻醉指征。背交叉固定 2.颈部手术：a.剪毛，气管插管b.分离右侧颈部迷走神
14、经，减压神经c.分离双侧颈总动脉（carotid artery）d.左侧颈总动脉插管，先结扎远心端，在近心端夹动脉夹，向近心端插入动脉插管。,3.观察项目 a.正常血压曲线，向上为血压升高，向下为血压降低。 b.用动脉夹夹闭右侧颈总5-10s c.电刺激右侧减压神经，观察 d.结扎右侧迷走神经，并剪断，观察 e.电刺激右侧迷走神经外周端，观察 f.注射1：10000去甲肾上腺素0.10.5mL,注意事项,1一项实验后，须持血压基本恢复后再进行下一项实验。 2.随时注意动脉套管的位置，特别是动物挣扎时，避免扭转插管阻塞血流或裁穿血管。 3.随时注意动物麻醉的深度，如实验时间过长，动物经常挣扎，可
15、补注少量麻醉剂。 4.刺激神经之前，应先检查是否有刺激电流输出。 5.神经需刺激时才拉出，不要一直由保护电极勾住，防止神经干燥。,思考题 1.分析每一实验观察项目引起血压变化的机制。 2.通过本实验掌握了那些基本操作方法？,实验六 减压神经、膈神经放电,目的要求 1、学习哺乳类动物在体神经干（减压神经和膈神经）动作电位引导的方法。 2、观察减压神经放电特点以及血压升降时神经冲动的变化 3、观察膈神经放电的特点以及与呼吸的关系。 4、观察神经体液因素对减压神经和膈神经放电的影响。,实验器材 1、仪器与材料哺乳类动物手术器械、引导电极、电极固定架、BL410生物机能实验系统、监听器 。 2、药品2
16、5氨基甲酸乙酯、1:10000去甲肾上腺素、CO2 3、动物健康家兔，体重1.52.5Kg,方法与步骤 （一）手术操作1、称重、麻醉、固定2、颈部手术，气管插管3 、先分离一侧减压神经， 引导放电（滴加石蜡油）4、后分离膈神经，引导放电（滴加石蜡油）,（二）仪器连接把减压神经或膈神经搁置在悬空的引导电极上，注意勿使神经牵拉太紧；引导电极不可触及其它组织；在创口内滴入温液体石蜡，防止神经干燥。,放大器,监视器,监听器,引导电极,（三）实验观察项目 1、正常减压神经放电（监听到类似于火车开动声）观察显示器屏幕上减压神经群集放电的节律、波形和振幅，及其与血压的关系。其节律与心律同步，幅度约为3010
17、0V，大小随血压高低而变化。一簇群集放电的波形为先大后小的三角形。 2、耳缘静脉注射10-4去甲肾上腺素0.5ml观察膈神经放电,3、记录正常的膈神经放电膈神经群集放电呈梭形与吸气同步，从监听器可听到“潮汐声”声音。,4、吸入气中CO2浓度增加对膈神经放电的影响。 思考题 1.试比较膈神经放电形式与减压神经放电形式有何异同？ 2.如何通过实验证明膈神经是传入或传出神经？,实验七 生理、病理因素及药物对家兔泌尿功能的影响 (综合实验),实验目的 1、学习输尿管（膀胱）插管、颈总动脉插管的方法。 2、掌握用BL-420E生物机能实验系统记录血压和尿滴的方法。 3、观察影响尿生成和血压的因素，观察血
18、压变化与尿量之间的关系 4、用酚红排泄实验检测肾小管的分泌和排泄功能。 5、观察利尿药、垂体后叶素对尿量和血压的影响 6、学习尿糖定性的检测方法 7、加强学生实践能力和知识综合运用能力,实验器材 1、仪器与材料BL-420E生物机能实验系统，哺乳类动物手术器械、压力传感器、受滴传感器、动脉夹、动脉插管、输尿管插管、培养皿、保护电极、尿糖定性试纸、输液器、铁架台 2、药品25氨基甲酸乙酯、肝素溶液、0.01去甲肾上腺素溶液、呋塞米注射液、垂体后叶素注射液、25葡萄糖溶液、0.9氯化钠溶液、酚红注射液。 3、动物健康家兔，体重1.52.5Kg,方法与步骤 （一）手术操作1、称重、麻醉、固定2、耳缘
19、静脉输液。3、颈部手术，气管插管，分离右侧迷走神经，左侧颈总动脉插管。4、下腹部手术，左（或右）侧输尿管插管或膀胱插管。 （二）仪器连接,（三）实验观察项目1、正常血压和尿量；正常尿液颜色2、耳缘静脉注射25葡萄糖溶液10 ml，观察血压和尿量变化，并在注药前后做尿糖定性实验。3、耳缘静脉注射104去甲肾上腺素0.3ml，观察血压和尿量变化。,4、耳缘静脉注射酚红溶液1 ml，记录尿液变红颜色的时间。 5、耳缘静脉注射呋塞米1 mL , 观察血压和尿量 变化。 6、结扎并剪断右侧迷走神经，电刺激迷走神经外周端，观察血压和尿量变化。 7、耳缘静脉注射垂体后叶素3u, 观察血压和尿量变化。,思考题
20、,1大量饮水、静脉注射生理盐水和高渗葡萄糖所引起的多尿，其机制有何不同，为什么？ 2静脉注射垂体后叶素后，尿量常常会出现先多后少的现象，如何解释？ 3静脉注射速尿后，尿量增加的机制是什么？,实验八 反射时的测定 反射弧的分析（设计性实验）,目的要求,学习反射时的测定方法；了解刺激强度与反射时的关系； 学习反射弧的测定方法。 了解反射弧的组成及其各部分在反射活动中所起的作用,实验原理,神经调节的主要方式是反射（在中枢神经系统的参与下，机体对刺激所产生的具有适应意义的反应过程称为反射）。 反射活动的结构基础是反射弧。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏，反射活动就无法实现。 脊髓是中
21、枢神经系统的最低级部位，它的机能最简单，便于观察。 在反射活动中，由于神经元特别是中间神经元联系方式的不同，使反射活动表现出种种特征。如：反射时的长短、反射活动空间范围的大小、反射活动持续时间的久暂，以及引起反射活动的刺激条件，等等。 从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射时。,实验器材,1.仪器与材料：蛙类手术器械1套、蛙板、铁架台、刺激器、刺激电极、小烧杯、培养皿、小滤纸片、棉花、纱布、橡皮筋、大头针、丝线。 2.药品：0.25、 0.5、1的硫酸。 3.动物：蟾蜍。,keywords,脊蛙 硫酸 手术器械 刺激电极 典型的反射弧由感受器、传人神经、神经中枢、传出神经和效应器5个部分组成
22、。 坐骨神经 屈肌反射和对侧伸肌反射、搔扒反射？,？,方法步骤 (参考),蛙针或断头法破坏蛙脑成脊蛙(最长可存活几个星期)，用夹子夹住下颌，悬在铁架台上，待其兴奋性恢复后？，进行下面实验。 1.正常脊髓反射活动的观察： (1)屈肌反射和对侧伸肌反射：以培养皿盛0.5硫酸少许，接触蛙下肢趾尖，观察受刺激侧和对侧下肢的反应。 （刺激后要立即洗去硫酸，以免损伤皮肤 ，并应擦干水渍） (2)搔扒反射：以浸有0.5硫酸的小滤纸片贴于蛙的腹侧部，观察后肢反应的早迟及动作的准确性。,2. 反射时的测定：依前法用0.25及1的硫酸刺激左脚趾，用秒表测定反射时。每种浓度重复3次。求其平均值。3.用剪刀在蛙左侧后
23、肢股部皮肤做一环形切口，将切口以下皮肤剥净，直至趾端（包括趾底），再以0.5硫酸刺激，结果如何？ 4.依前法用0.5的硫酸刺激右脚趾？在右侧后肢股部的背侧，分离出坐骨神经(位置不能太低，分支尽量剪断)，结扎，剪断， 0.5硫酸刺激右脚趾？ 5.以适当强度电刺激右侧坐骨神经中枢端，观察同侧及对侧的肢体反应；刺激外周端？ 6.脊髓对维持肌紧张的作用：另制备脊蛙一只，待反射恢复后即用蛙针将脊髓破坏， 0.5硫酸刺激脚趾，有无反射出现？比较破坏脊髓前后四肢的紧张情况，说明原因。,方法步骤 (参考),注意事项,1每次实验时，要使皮肤接触硫酸的面积不变，以保持相同的刺激强度。 2每次用酸刺激后，均应迅速用
24、水洗去蛙趾皮肤上的硫酸，以免皮肤受伤。洗后应沾干水渍，防止再刺激时硫酸被稀释。 3浸入时间最长不超过10秒。,作业和思考,1. 分析反射弧的组成与作用。 2.什么叫反射时？反射时的长短主要取决于哪些因素？ 3.什么叫做脊蛙？为什么进行这个实验要使用脊蛙？ 4.为什么剪断了传入或者传出神经纤维后，反射就不再出现了。 5.为什么剥掉了皮肤以后，H2SO4刺激皮肤反射活动不再出现了？ 6.完全损毁中枢神经以后，动物的肌肉紧张程度有什么变化？反射活动还出现吗？ 7.完全损毁中枢神经以后，用电直接刺激肌肉，还收缩吗？如果收缩，这叫做反射吗？为什么？,在用脊蛙进行反射弧分析的实验中，破坏反射弧在左后肢的部
25、分结构，观察双侧后肢对刺激的收缩反应，结果如下表：,上述结果表明，反射弧的被破坏部分可能是 A.感受器 C.传入神经和效应器,B.感受器和传入神经 D.效应器,实验九 钾代谢障碍（综合性实验 ）,目的要求,1观察高血钾对心脏的毒性作用。 2了解和掌握高血钾心电图改变的特征。,高钾血症的概念,血清钾浓度高于55mmol/L称为高钾血症。,高钾对心肌电生理特性的影响,兴奋性轻症、重症细胞内外K+浓度差变小，静息电位阈电位差值变小；重度高钾去极化阻滞。 传导性：静息电位0相除极化传导性； 心电图表现为P波和QRS波变低、增宽 自律性： K+e膜对K+的通透性4相K+外流相对性的Na+或Ca2+的内向
26、电流4相自动除极速度自律性；心电图表现为心率减慢及异位心律。 收缩性： K+e K+、Ca2+竞争 Ca2+的内流兴奋-收缩偶联。心脏停搏于舒张状态。,正常心电图,4,0,2,1,3,0期：Na+内流 1期：K+外流 2期：Ca2+内流对应ST段 3期：K+外流对应T波 4期：Na+内流,高血钾症时心电图表现,T波高尖 P波、QRS波振幅降低，间期增宽，S波增深 心律失常,P,R,T,Q,S,高钾血症,0,0,3,心室传导阻滞,心室纤颤,实验器材,仪器与材料 5ml注射器、小儿头皮针、手术剪、电脑、bl-420E机能实验系统。 药品 20%氨基甲酸乙酯溶液、2%、5%、10%氯化钾溶液。 动物
27、 家兔。,方法与步骤,称重20%氨基甲酸乙酯5ml/kg全麻固定 电极插入四肢踝部皮下连接按左前（红），右前（黄），右后（黑）顺序 开电脑病生钾代谢障碍描记记录正常心电图耳缘静脉缓慢滴注2%KCl 2ml/5分/次，重复3次5%KCL记录心电图变化 出现异常时进行抢救葡萄糖酸钙2ml，快速注入待心电图恢复正常时，滴注10%KCl 2 ml，直至出现室颤心电活动停止打印心电图，每组一张。,注意事项,1. 若记录心电图时出现干扰，排除肌电干扰后，应将动物移至离心电图机稍远处，检查各导程线有无脱落，针形电极是否接触紧密，并尽量避免导程线纵横交错的现象。动物固定台上要保持干燥。 2. 每次使用针形电极
28、时，要用酒精或盐水擦净，并要及时清除针形电线周围的血和水迹，以保持良好的导电状态。 3. 钾溶液推注速度要放慢，避免心肌局部急性高钾造成心肌损伤。,思考题,1.钾代谢紊乱与酸碱平衡紊乱有何关系？其尿液酸碱度的变化有何特征？ 2.血钾浓度轻度升高和重度升高对心肌兴奋性的影响有何不同？为什么？,实验十 缺 氧,目的要求,1、通过给动物低氧环境，影响血红蛋白的带氧能力或使组织不能利用氧等方法，复制乏氧性缺氧、血液性缺氧的模型复制； 2、从动物呼吸、皮肤黏膜颜色等指标,显示各类缺氧模型的不同症状和特征。 3、了解复制模型的原理及方法，有利于深入研究各类缺氧的发生、发展和转归。,实验器材,器材:小白鼠缺
29、氧瓶、CO发生装置、1ml注射器、酒精灯、剪刀、镊子。 药品:钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚硝酸钠、1%美兰、 生理盐水。 动物 小白鼠,方法与步骤,1乏氧性缺氧 (1) 取钠石灰约5g及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况，呼吸频率（次/10s），深度，皮肤和口唇粘膜颜色，然后紧塞瓶塞，记录时间，以后每3min重复观察上述指标1次（如有其他变化则随时记录）直到动物死亡为止。 (2) 动物尸体留待2.3.4实验做完后，再依次打开其腹腔，比较血液或肝脏颜色。,2一氧化碳中毒性缺氧,(1) 装好CO发生装置。 (2) 将小白鼠放入广口瓶中，观察其正常表现，然后与CO发生装置连接。
30、 (3) 取甲酸3ml放入试管中，加入浓硫酸2ml，塞紧。（可用酒精灯加热，加速CO产生，但不可过热以至液体沸腾，因CO产生过多过快动物迅速死亡，血液颜色改变不明显。） (4) 观察指标与方法同上。,3亚硝酸钠中毒性缺氧,(1) 取体重相近的两只小鼠，观察正常表现后，向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml，其中一只注入亚硝酸钠后，立即再向腹腔注入1%美兰溶液0.3ml，另一只再注入生理盐水0.3ml。 (2) 观察指标与方法同1，比较两鼠表现及死亡时间有无差异。,结果与分析,注意事项,1缺氧瓶要塞紧。必要时可涂少许水于瓶塞外面以防漏气。 2观察指标时，不要受主观因素影响，并注意其演变过程。 3吸取硫
31、酸、甲酸与美兰等试剂时，注意不要溅到衣服、皮肤或地面上 4CO中毒性缺氧实验完毕后，及时处理CO发生装置内的残留物。 5小白鼠腹腔注射时，应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，但也应避免将药液注入肠腔或膀胱。,思考题,1缺氧的概念及分类 2一氧化碳中毒及亚硝酸盐中毒分别属于哪种缺氧 3何谓紫绀？与缺氧有何关系？ 4缺氧时呼吸加深加快有何生理意义？ 5. 一氧化碳中毒发声装置中要不要关闭另一侧通气管 6急性低张性缺氧的血氧变化特点？ 7试分析慢性缺氧时红细胞增多的机制及其利弊。 8低张性缺氧实验中为何要在瓶中放入钠石灰,实验十一休克模型的复制与解救 （综合性实验）,目的要求,复制家兔失血性休克 本实验通过复
32、制家兔失血性休克，观察失血性休克动物的动脉血压和微循环的变化，并探讨失血性休克的发病机制及其抢救措施。,休克的概念,休克是多病因、多发病环节、有多种体液因子参与，以机体循环系统功能紊乱，尤其是微循环功能障碍为主要特征，并可能导致器官功能衰竭等严重后果的复杂的全身调节紊乱性病理过程。,病因及分类,失血与失液：失血量达到20%以上可引起失血性休克。 烧伤 创伤 感染 过敏 强烈神经刺激 心脏和大血管病变,休克可分为三期,休克初期：心率加快，血压正常或略升高，但脉压差减小，尿量减少。皮肤苍白，四肢冰冷。 休克期：血压呈进行性下降，神志淡漠；少尿或无尿；脉搏细弱、频速；发绀和花斑。 休克晚期：血压极度
33、降低，重要器官衰竭。,失血性休克抢救,补充血容量：量需而入。 合理应用血管活性药物：扩血管药物、缩血管药物联合应用。,实验器材,仪器与材料 兔手术台、实验手术器械一套、注射器（1ml、30ml）、输血输液装置、血压描记装置、气管插管、动脉套管和静脉导管。 药品 20%氨基甲酸乙酯、5%肝素生理盐水溶液（5mg/ml）、生理盐水、1%去甲肾上腺素、多巴胺。 动物 家兔,方法与步骤,1称重耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯5ml/kg麻醉固定剪毛切开颈部气管插管分离右侧颈外静脉和左侧颈总动脉耳缘静脉注射肝素生理盐水1ml/kg。,2动脉插管：生理盐水充满颈总动脉插管。动脉夹夹闭近心端，结扎远心端，眼科
34、剪在远心端处剪开“V”形斜口，插入动脉插管，连接电脑描记血压。 3.静脉插管：夹闭近心端，再结扎远心端。在靠近远心端剪口，插入静脉插管。 4先在腹股沟内1/3与外2/3交点处摸到股动脉的搏动，切开一侧股部皮肤，行股动脉插管，以备放血用。,5放血前观察动物的各项生理指标，包括皮肤粘膜颜色、心率、呼吸、血压等，并作记录。 6股动脉放血：放血的时有同学负责观察血压，当血压降到45mmHg以后，停止放血。或按体重放血(15ml/Kg)。,7分组抢救 回输余血，5分钟内输完。 回输余血和生理盐水（15ml/kg），5分钟内输完 回输余血和生理盐水（15ml/kg）后，给予含多巴胺0.2mg/Kg 回输余
35、血和生理盐水（15ml/kg）后，给予去甲肾上腺素。 注射完以后，观察血压的改变10分钟。,注意事项,1麻醉要深浅适度，若麻醉过浅动物可因疼痛而产生神经源性休克。 2本实验手术多，应尽量减少手术性出血和休克，保证实验的成功率。 3插塑料管前塑料管内要充盈生理盐水，并排尽气泡。,思考题,试述失血性休克早期动脉血压变化的特点及其机制。 试述低血容量性休克的补液原则及其理由。,实验十二 肝性脑病 （综合性实验）,目的要求,1切除大部分肝脏造成急性肝功能不全模型。继而经由消化道输入碱性氯化铵溶液，导致肠道中氨生成增多并吸收入血，引起实验动物血氨迅速升高，出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状，证明氨在
36、肝性脑病发病机制中起主要作用。 2本实验的目的是学习复制急性肝功能不全模型的方法，了解氨在肝性脑病发病机制中的作用并探讨其治疗措施。,实验器材,仪器与材料： 兔手术台、实验手术器械一套、注射器（5 ml、10 ml、50 ml），导尿管、搪瓷圆盆、粗棉线、细丝线。 药品： 1%普鲁卡因、复方氯化铵溶液、1%醋酸、2.5%谷氨酸钠混合液。 动物： 家兔。,方法与步骤,取兔一只，称重，仰卧固定兔台上，腹部正中剪毛，上腹部正中用1%普鲁卡因作局麻。 从胸骨剑突起作上腹部正中切口（约56 cm），打开腹腔可见到肝脏。用手轻轻向下压肝脏，切断肝与横膈之间的镰状韧带。 将肝脏各叶向上翻，除右外叶及与肝尾叶
37、外，用粗棉线自根部将其余各叶结扎、切除。 顺胃幽门部找出十二指肠，在其表面作荷包缝合，用眼科剪一小口，插入一管，结扎固定，然后关闭腹腔，进行观察和试验。,观察家兔一般情况，呼吸频率及深度，角膜反射及对刺激的反应。 通过十二指肠插管向肠腔内注入复方氯化铵溶液（5 ml/kg/5 min）。仔细观察动物情况（呼吸加速、反应性增高、肌肉痉挛等），直至出现全身性大抽搐为止。 自耳缘静脉注射2.5%谷氨酸钠混合液（3 ml/kg）进行治疗，并向十二指肠注入1%醋酸（5 ml/kg），观察症状有无缓解。,结果与分析,注意事项,1切断镰状韧带时要小心勿伤害其后方的下腔静脉。 2结扎线应扎于肝叶根部避免拦腰勒
38、破肝叶。,思考题,1结合本实验，说明血氨升高原因。 2氯化铵中毒的机理是什么？ 3血氨升高对脑有何毒性作用？ 4.肝功能严重障碍者需灌肠时应选用何种灌肠液？为什么？,实验十三 病例分析 （综合性实验 ）,患者，女32岁，幼时曾因“凤湿性心脏病二尖瓣狭窄、关闭不全“入院治疗。5年前发现心房纤颤，近年来症状逐渐加重，在上坡或登楼梯时感到头晕、心悸、气短，休息后好转。最近症状进一步恶化，2周来有时夜晚入睡后感到气闷而惊醒，并坐起喘气和咳嗽，3天前因感冒引起气喘加重而入院。,体检：体温37.5，心率146次/分，血压14/10.9kPa(105/82mmHg)，呼吸36次/分，神智清楚，慢性病容，端坐
39、呼吸，口唇明显紫绀，颈静脉怒张，呼吸浅快，双肺水泡音。心尖抬举性搏动， 心音强弱不等，节律不齐，心尖部可听到收缩期吹风样及舒张期隆隆样杂音。肝大于肋下5cm，有压痛。双下肢浮肿，腹水(+)。胸部X片可见自肺门开始的蝶形云雾状阴影，肺纹理增 多，双侧膈下移。心脏呈球形，向左右扩大。心电图显示心房纤颤、左心室劳损。多普勒超声心动图显示有二尖瓣狭窄和关闭不全，舒张期及收缩期右室壁普遍肥厚及动力增强，左右心腔扩大。,思考题 (1)什么是心力衰竭？心力衰竭的主要原因有哪些 (2)心力衰竭有哪些分类？该患者属于哪一类心力衰竭？其依据是什么？ (3)该患者的心功能不全是如何逐步加重的？ (4)病人的心率为什
40、么会加快？这有什么利弊？(5)患者出现了哪种类型的心肌肥大？这有什么代偿意义？为什么最终还会转向衰竭？ (6)患者为什么会出现夜间阵发性呼吸困难？端坐姿势为什么能缓解呼吸困难？ (7)患者出现水肿的机制有哪? (8)该患者的治疗原则是什么?,实验十四 药物的量效关系实验（蟾蜍腹直肌法 综合性实验）,目的要求,1.了解药物的量效关系； 2.熟悉量效关系实验方法和量效曲线的绘制；,实验器材,1. 实验动物：蟾蜍 2.实验器材：仪器：蛙类手术器械、平滑肌浴皿、通气钩、肌力换能器、记录仪、空气球胆药品：乙酰胆碱溶液、任氏液,方法与步骤,1. 准备：浴皿中加入任氏液并通气，连接好实验装置，保证实验条件。
41、 2.标本的制备：蟾蜍破坏大脑与脊髓，仰卧位固定，暴露腹直肌，剥离腹直肌，宽0.50.8cm、长23cm，两端用线结扎后剪下。标本放入置有任氏液的烧杯内，备用。,3.标本的悬挂：将腹直肌标本一端固定在通气钩上，浸入含 30ml任氏液的平滑肌浴皿中（调整线的长度，腹直肌完全浸入任氏液）；另一端连接肌力换能器及记录仪。稳定10min，描记正常收缩曲线，即可加药进行实验。,4.累积给药：按低浓度高浓度加药，打开记录议，信号记录速度要慢，每次加药后，待肌肉收缩反应不再继续增大，记录0.51.0cm；再加入第二剂量。依次进行直到出现最大效应。测量并记录每次肌肉收缩的幅度。,5. 计算方法：效应百分率各剂
42、量的效应最大效应100 6.绘制量效曲线：计算机自动绘图，示教。,注意事项,1. 实验前、后必须充分洗净浴皿； 2.通入空气12 气泡秒； 3.每次加药剂量要准确，否则影响实验结果；,思考题,1. 何谓药物的量效关系? 2.药物的量效关系曲线有几种类型?,实验十五 磺胺嘧啶血浆半衰期（t1/2）的测定（比色法）,实验目的,1. 掌握药物血浆半衰期（ t1/2 ）的测定方法。 2掌握耳缘静脉和心脏取血的方法。,实验器材,1. 实验动物：家兔 2.实验器材：仪器：721分光光度计、离心机、离心管、试管、注射器、加样器、吸球、试管架、天平、兔固定器。药品： 0.5%肝素生理盐水、7.5%三氯醋酸、0
43、.5%亚硝酸钠、0.5%麝香草酚、20%磺胺嘧啶。,方法与步骤,1.取离心管3支，分别标记A、B、C，各加入7.5%三氯醋酸2.9ml，备用。 2.取家兔1只，称重后用经肝素生理盐水湿润的1ml注射器，由耳缘静脉取血0.2ml。保留针头，注射器中血液注入A管。用另一注射器自原针头注入20%磺胺嘧啶2ml/kg。记录注完时间。,3. 给药后5min及35min左右，用同样方法自；另一 侧耳缘静脉各取血0.2ml，分别注入B管及C管。记 录取血标本的准确时间。,4.将A、B、C 3支离心管摇匀，以1500转/分转速离 心5min，取离心后上清液1.5ml，各置于编号A、B、 C的试管中，每管加0.
44、5%亚硝酸钠0.5ml，摇匀2min， 再加0.5%麝香草酚1.0ml，可见橙红色反应。置于 721分光光度计内，以525nm波长测定A、B、C管 光密度OD值（Xa、Xb、Xc），以下公式进行计算。,5. 计算结果： （1）代入一室模型半衰期基本比例t1/2：Tlog（1/2）：log RTT为间隔时间；RT为T时后药物浓度留存率。 （2）计算零时药物浓度（C0）和分布容积（Vd）C0= C1log-1(0.301 )C1是第一次取血的药物浓度，t1是第一次取血时间VdD0/C0；D0是用药剂量。,注意事项,1.耳缘静脉取血时，注射器不可混用； 2.如耳缘静脉取血有困难时，可采用心脏取血；,
45、思考题,1. 何谓血浆半衰期? 2.测定血浆半衰期有何临床意义?,实验十六 LD50的测定 序贯法,目的要求,1. 掌握测定药物LD50的药理学意义、序贯法的实验方法和计算方法； 2. 熟悉盐酸普鲁卡因的毒性作用。,1. 实验动物： 小白鼠（18-22g），雌雄各半 2.实验器材：仪器：注射器、鼠笼、函数型计算器 药品：2普鲁卡因、苦味酸溶液,实验器材,1.实验前按表3-6拟定实验的药物剂量，相邻两剂量按等比安排。相邻两剂量对数差为0.046。 2.每实验组取取小鼠10只，雌雄各半，称重后用苦味酸标记；,方法与步骤,表3-6 小鼠半数致死量实验结果,3. 先取小鼠1只，腹腔注射第一个剂量即2普
46、鲁 卡因0.1ml/10g，若第一只小鼠用药后未出现死亡， 下一只动物则用高一剂量，如出现死亡，下一只 动物应用低一剂量。在表中记录时，动物死亡用 “”表示，未死亡用“”表示。若在同一剂量中 连续出现“”两次，则下一次实验结束，最后一 只动物不做实验，但在表格中占一个，用E表示。,4. 实验结果的计算与表达LD50=log1（C/N）mg/kg 式中： C（RlogD）R剂量组的动物只数logD剂量D的对数值；N实验动物总数R,1. 对实验动物进行随机化分组； 2.各组药物浓度不能混淆； 3.给药剂量及部位要准确,进针的深浅一致；,注意事项,思考题,1. 何谓半数致死量? 2.常用的LD50计
47、算方法有哪几种?,实验十七 药物的镇痛作用 扭体法,观察哌替啶、罗通定的镇痛效应。 掌握扭体法的镇痛实验方法。,目的要求,1、实验动物 小白鼠（18-22g） 2、仪器与材料 1ml注射器、粗天平、鼠笼 3、实验药品 0.6%冰醋酸溶液、生理盐水、 0.2%哌替啶溶液、0.2%罗通定溶液,实验器材,1、取健康小白鼠9只，随机分为3组，每组各3只。 2、三组分别腹腔注射0.2%哌替啶、0.2%罗通定、生理盐水0.1ml/10g。 3、用药后半小时，各鼠分别腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只。观察并记录10min内各组出现的扭体反应数。,方法与步骤,4、综合全实验室的实验结果，计算药物抑制扭体百
48、分率。对照组扭体次数-实验组扭体次数 抑制扭体百分率=对照组扭体反应次数,1、冰醋酸应用时需新配，以免存放过久作用减弱。 2、扭体反应：腹部内凹、后腿伸张、臀部抬起 。,注意事项,思考题,1、哌替啶与罗通定的镇痛特点有何不同? 2、哌替啶与罗通定的临床用途有哪些?,实验十八 利多卡因对抗电刺激诱发的心律失常作用（综合性实验）,1.观察利多卡因对电刺激引起的心律失常的对抗作用并学习电刺激诱发的心律失常方法 2.掌握在体心脏描记法及给药法,目的要求,1.仪器与材料 BL-420E生物机能实验系统，探针，图钉，蛙板，普通剪刀，手术剪，镊子，蛙心夹，铁柱架， 1ml注射器 2.药品 0.2%利多卡因，任氏液 3.动物 蟾蜍,
