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脂肪酸检测方法.doc

1、脂肪酸检测方法脂肪酸(fatty acid) ,是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链,是有机物,直链饱和脂肪酸的通式是 C(n)H(2n+ 1)COOH,低级的脂肪酸是无色液体,有刺激性气味,高级的脂肪酸是蜡状固体,无可明显嗅到的气味。脂肪酸是最简单的一种脂,它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下,可氧化分解为 CO2 和 H2O,释放大量能量,因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。科标检测参照国标及各种文献将脂肪酸衍生化成脂肪酸甲酯,使用十九酸内标,用正己烷提取后稀释后用气相色谱质谱联用仪,外标法结合内标法定量分析。科标检测出具专业脂肪酸检测报告。检测方法:1、样品提取称取

2、适量样品,加入 4mL 的甲醇/CH2Cl2 (1:3)混合溶液,摇匀;恒温在 30以下超声抽提 10min。取出离心管,放于离心机中离心( 1800rpm,10min) ,收集上清液,重复3 次;将萃取液在柔和氮气流下吹干。2、萃取液的皂化加入 3mL 6%KOH 的甲醇溶液(配制:6gKOH/ 甲醇 118mL 左右) ,超声 10min,放置30min,重复 3 次,室温放置过夜(瓶盖盖紧)进行碱水解;加入 2mL 正己烷,超声10min,摇匀,震荡离心,弃除上层正己烷萃取液,重复 3 次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相) ,加入约 1mL 4N 的 HCl 使 pH2,再用 2mL 正

3、己烷萃取 3 次。3、脂肪酸的衍生化将上述萃取液,转移到带盖玻璃管中,用氮气吹干后,加入约 2mL BF3-MeOH,玻璃管上空间冲入氮气后盖盖密闭,于 90下加热 2h;待样品冷却后,加入 5%NaCl 溶液约1ml,用 2ml 正己烷萃取 3 次,并将萃取液转移到 2mL 进样瓶中,氮气吹干,待分析。4、色谱条件色谱柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25m升温程序:80 度起始温度,保持 1 分钟;10 度/min 升温到 200 度,5 度/min 升温到225 度,2 度/min 升温到 250 度,保持 5min。MS,EI 源,分流模式:不分流scan 模式传输线温度:280离子源温度:280进样口温度:290氦气,恒流模式,流速:1 .2mL/min。扫描范围:30-400进样量:1L。检出限:0.02mg/kg5、结果计算与评价科标检测利用外标法及内标法计算含量。

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