1、对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析,第一节 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质 本类药物的母体结构,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构,苯佐卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,酰苯胺类药物(苯胺的酰基衍生物)的基本结构,非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚,解热镇痛药）,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,盐酸罗派卡因,(S)-N-(2,6-二甲基苯基)-1-正丙基哌啶-2-甲酰胺盐酸盐一水合物。,一、结构与性质,（一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。 如酰氨基邻位存在甲基，空间位阻难于水解，较稳
2、定。,（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。 水溶液无法直接滴定，需用非水滴定。,（四）游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。,（二） 酯键或酰胺键易水解,（五） 盐酸利多卡因（布比卡因，罗哌卡因）分子结构酰胺基氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿显色。,（六） UV,（七） IR,二、鉴别试验,（一）重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应,盐酸普鲁卡因,直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺,间接：对乙酰氨基酚,盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的
3、鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,对乙酰氨基酚 ChP（2005） 鉴别 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。,盐酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成白色沉淀，与具有芳伯氨基的同类药物区别。,（二）与金属离子反应1. 与铜和钴离子反应,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁
4、卡因等 不发生此反应。,与汞离子的反应,2羟肟酸铁盐反应,（三）水解产物的反应,1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2010）,鉴别 （2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。,2. 苯佐卡因 ChP（2010）,鉴别 （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,（四）制备衍生物测熔点,1三硝基苯酚衍生物,盐酸利多卡因 ChP（2010） 鉴别 取本品0.2g，加水
5、20ml溶解。 （1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分解。,2. 硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因 ChP（2010） 鉴别 （1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。,盐酸布比卡因、盐酸普鲁卡因胺 ChP（2010） 鉴别 （2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录A）测定，在263nm与271n
6、m的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与0.430.48。,（五）UV,（六）IR,盐酸布比卡因 ChP（2005） 鉴别 （3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。,一. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,检查方法 HPLC 杂质对照品法,杂质来源 水解产生,第三节、特殊杂质与检查,供试液:盐酸普鲁卡因0.2mg/ ml 对照品:对氨基苯甲酸1g/ml溶液。 固定相：C18 流动相：0.1%庚烷磺酸钠的0.05M KH2PO4（pH 3.0）-甲醇（68:32） 检测波长：279 nm,二. 盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查杂质：4-氨基
7、-2-氯苯甲酸 来源：生产、贮藏,【杂质检查】,USP30-NF25: HPLC-MS 分析 色谱条件：Zobax SB-C18，流动相：0.5%乙酸水溶液-0.5%乙酸乙腈溶液(87:13), 流速1 ml/min， 检测波长：254 nm 质谱条件: ESI(+), 质量扫描范围: 80600, 喷雾电压4000V,等,m/z:253,盐酸羟普鲁卡因M+1+ ，盐酸氯普鲁卡因光水解产物 m/z:172,M+1+ 4-氨基-2-氯苯甲酸准分子离子峰,（一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物,四、含量测定,ChP(2010年): 苯佐卡因,盐酸普鲁卡因及其注射液,盐酸普鲁卡因胺片剂及
8、其注射液,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,2. 主要测定条件 （1）加入适量KBr加速反应,NaNO2+HClHNO2+NaCl HNO2+HClNOCl+H2O,重氮化反应的机理为：,（1）K1,（2）K2, K1 300 K2加入KBr，可增大溶液中NO+亚硝酰离子的浓度，加快重氮化反应速度,（2）酸的种类及其浓度,在不同酸中重氮化反应的速度为： HBrHCl H2SO4 HNO3,盐酸 1:2.56；加入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳
9、定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,（3）室温条件下滴定 1030 （4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定,3. 指示终点的方法 （1）永停滴定法ChP（2005）、BP,永停滴定法（附录A） 调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏
10、转，并不再回复，即为滴定终点。,亚硝酸钠永停滴定法原理,终点前：无可逆电对，无电流产生，电流计指针停止在“0”位 终点后：过量NaNO2 阳极：NO+H2O,HNO2+H+e,HNO2+H+e,阴极：,NO+H2O,电路有电流通过，电流计指针突然偏转并不再回“0”,（2）电位法,（3）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸 2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,（4）内指示剂法中性红 不可逆指示剂,4. 测定方法盐酸普鲁卡因 ChP（2005）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录A），在1525，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠
11、滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl,（二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性.盐酸丁卡因,盐酸利多卡因，盐酸布比卡因侧链上的叔胺氮具有弱碱性，均可采用非水溶液滴定法测定含量。,原理:,溶剂:醋酸或冰醋酸或酸酐标准溶液: HClO4指示剂:结晶紫（或萘酚苯）结晶紫：紫色（碱式色）终点:蓝色或绿色（黄绿色）加入醋酸汞 作用:除去氢卤酸的干扰,蓝色、绿色、黄绿色、黄色（酸式色）,pH,滴定盐酸丁卡因时，加入适量醋酐。因醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性还强，有利于丁卡因碱性的增强，使滴定突跃敏锐。2(CH3CO)2 O(CH3CO)3O+十CH
12、3COO,【盐酸利多卡因的测定】,取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸溶解后，加醋酸汞 5ml与结晶紫指示剂1滴，用HClO4滴定液（0.1mol/L)滴至溶液显绿色，将滴定的结果用空白试验校正。每1ml HClO4滴定液（0.1mol/L)相当于27.08mg 的C14H22N2O.HCl,盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：,（三）紫外分光光度法对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。,对乙酰氨基酚 ChP（2005）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液5.0ml溶解后，加水至刻度
13、，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算，即得。,原料药 吸收系数法,USP（25） 对照法,（四）高效液相色谱法 对乙酰氨基酚泡腾片: 色谱条件: 柱C18, 流动相:甲醇-水 (pH 4.5磷酸缓冲液); 检测波长:254,取10片片剂,称取其质量 流动相溶解定容至50 ml 过滤 取续滤液10 ml 定容至50 ml ,得供试液,精密量取10 l 进样,得AX .取浓度100 g/ml对照品溶液,同法测定,得AS.,1. 盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（） A.
14、重氮化偶合反应 B. 羟肟酸铁盐反应 C. 氧化反应 D. 磺化反应 E. 碘化反应,2采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（） A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C苯佐卡因 D盐酸去氧肾上腺素,3下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（ ） A. 乙酰水杨酸 B. 对氨基水杨酸钠 C. 对乙酰氨基酚 D. 普鲁卡因 E. 苯佐卡因,4. 亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（ ） A. 添加Br B. 生成NO+Br ,加快重氮化反应 C生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行,5亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（ ） A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E.
15、自身指示剂法,6亚硝酸钠滴定法中，滴定剂（） A.亚硝酸钠 B. 高氯酸 C. 氢氧化钠 D. 外指示剂法,7. ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因的含量时，指示滴定终点的方法为（） A. 自身指示终点法 B. 电位法指示终点 C. 永停滴定法 D. 氧化还原指示剂法 E. 酸碱指示剂法,8. 以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（ ） A. 盐酸利多卡因 B. 盐酸普鲁卡因胺 C.盐酸普鲁卡因注射液 D. 盐酸普鲁卡因胺片,9. 盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（） A. 强酸 B. 加入适量溴化钾 C. 室温（1030）下滴定 D. 滴定管尖端深入液面 E. 永停法指示终点,
