1、兴奋剂的分析研究 报告,兴奋剂的有关概述,兴奋剂的定义兴奋剂的历史和现状兴奋剂的分类,检测基质的多样化趋势,尿液 血液 发样 体液（汗液、唾液）,兴奋剂检测的发展,兴奋剂检测生物芯片我国已处于领先技术基因兴奋剂2008的新挑战,最新消息，我国已自主研制成功兴奋剂检测生物芯片，这是一种蛋白芯片，可同时对9种刺激剂和麻醉剂进行检测。经过对1300多例运动员的实际尿样检测表明，该蛋白芯片与经典方法的符合率达到100%。,北京博奥生物芯片公司将在2005年进一步丰富兴奋剂检测生物芯片的检测指标，2006年在世青赛上初步投入使用并积累经验和数据，2007年完成国产化兴奋剂检测生物芯片装置的最终定型和批量
2、生产，以期在2008年北京奥运会大范围兴奋剂筛查中应用。 *,兴奋剂的英文为Dope，一说原为南非黑人方言中的一种有强壮功能的酒，一说起源与荷兰语Dop 。 兴奋剂药物并不都具有兴奋性（如利尿剂），甚至有的还具有抑制性（如b-阻断剂），国际上对禁用药物仍习惯沿用兴奋剂的称谓。因此，如今通常所说的兴奋剂不再是单指那些起兴奋作用的药物，而实际上是对禁用药物的统称。,有的可抑制和减轻疼痛，从而增强运动员的自信心；有的可以增加心率、肌肉血流量、肺通气量，从而提高循环系统和呼吸系统的机能，加强能量代谢；有的可以增加肌肉块头和力量，有助于增加训练强度和时间，从而提高速度和耐力；等等。 *,1886年，一位
3、自行车运动员因为过量使用兴奋剂而致死，成为第一例史上记录。 20世纪50年代，兴奋剂在体坛上已被广泛使用，尤其是苯丙胺，曾经风靡一时。 据有关方面估计，目前世界各国一流选手中有6%的人使用兴奋剂。*,对兴奋剂的监控已成为当今国际体育界的一个重要问题 ！,外源性：是人体自身不能分泌，由外部引入的物质，如刺激剂、麻醉剂、合成蛋白剂、利尿剂、b-阻断剂。尿样中一 旦查出就可判断为阳性。分析方法相对内源性药物简易很多。,内源性：自身能分泌，体内本身含有的物质。主要有肽类激素和甾体类固醇激素。由于要区自身分泌与人为引入，所以分析难度较大。#,同位素比质谱的应用,原理：碳元素在自然界中存在的规律，同一来源
4、化合物中碳的两种同位素13C和12C的丰度比是相同的。商品化的类固醇激素来源于大豆等植物的提取，其13C/12C比值较低，而人体内的该比值比较高。,程序：先利用气象色谱将目标化合物分离，经燃烧炉氧化成CO2，并进入质谱分析仪，记录m/z=44，45，46的强度，分别对应于12C16O16O，12C16O16O+13C16O16O，13C16O16O的丰度，校正后可计算出13C/12C值。,仪器：GC/C/IRMSgas chromatography /combustion / isotope-ratio mass spectrometry,分析方法改进后 更加公正,我过某著名乒乓球运动员，曾因
5、为脑垂体腺体瘤导致尿样中表睾酮异常增高而被怀疑使用了兴奋剂，后来正是因为同位素比质谱的分析方法，为其洗去了冤屈。*,尿液尿样检测是兴奋剂检测的理想样本。其优点在于：取样方便；对人无损害；尿液中的药物浓度高于血液中的药物浓度；尿液中的其他干扰少。尿样进入实验室，首先进行尿样ph和尿比重测定，然后按药物的化学特征分为四组进行筛选分析，主要是化学提取和仪器分析两步，最后由计算机打出检测报告。 *,血样血样检测的目的主要是补充尿样分析方法的 不足，目前尚处于研究探索阶段，目前仅用于血液回输，红细胞生成素，生长激素，绒毛膜促性腺激素，睾酮等的测量。*,发样在法医，毒性分析中已有较长历史，但在兴奋剂研究中
6、是才兴起研究方向。有采样容易，无损伤，不易作弊的特点，备受关注。,样品处理：有机溶液-去离子水-有机溶液洗涤；剪碎或磨成粉末，以增加提取时的表面积；药物与头发中的角蛋白结合牢固，需预先消化。 Fabien Bevalot等将50mg的发样用甲醇处理并用固相柱处理以后，HPLC-ESI-MS检测，灵敏度达110-7。,优势：皮质类固醇在体内消除很快，如果 赛前停药，尿液分析就检测不到，而发样分 析仍可检出。#,体液虽然药物含量浓度低，但可提供有益的互补信息，仍不失为一种值得研究的基质。*,利尿剂，顾名思义，此类药物有稀释尿液的功能。主要用于掩盖或“清洗”体内其它违禁药品的存在，以逃避兴奋剂检查。
7、高效液相色谱法 （HPLC）*,基因兴奋剂将挑战“北京2008”：随着科学和医疗的发展，高科技手段将进一步挑战WADA一向引以为傲的口号“玩真的（playtrue）”，目前最先进且已经迫在眉睫的当属基因兴奋剂（genedoping）。,2008 奥运会远离兴奋剂！,与经典液相色谱法的主要区别,流动相改为高压输送、采用高效固定相、具有在线检测器及仪器化等。该法具有分离效能高、分析速度快及应用范围广等特点。根据这些特点，人们又称该法为高速液相色谱法、高压液相色谱法、高分辨液相色谱法等。这些名称都是在发展过程中人们根据该法的某些特点而命名，高效液相色谱法是当前色谱工作者认同的名称。,高效液相色谱法与气相色谱法比较,高效液相色谱法分析对象广，它只要求样品能制成溶液，而不需要气化，因此不受样品挥发性的约束。对于挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物尤为有利。如氨基酸、蛋白质、生物碱、核酸、甾体、类脂、维生素、抗生素等。分子量较大、沸点较高的有机物以及无机盐类，都可用高效液相色谱法进行分析。 *,
